胡广卫 ， 沈艳丽 ， 赵全邦 ， 晁宜林 ， 阚 威 ， 周继章 ， 马睿麟 ， 蔡金山

(1.青海省动物疫病预防控制中心 ， 青海西宁810001 ； 2.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室 ， 甘肃兰州730046)



青海省部分地区牦牛流产原因初步调查

胡广卫1， 沈艳丽1， 赵全邦1， 晁宜林1， 阚 威1， 周继章2， 马睿麟1， 蔡金山1

(1.青海省动物疫病预防控制中心 ， 青海西宁810001 ； 2.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室 ， 甘肃兰州730046)

为查明青海省部分地区牦牛流产的病因，用问卷调查的方法对4个县(市)7个乡的104个牧户进行了牦牛流产情况调查，流产率平均为21.39%；用虎红平板试验和间接血凝试验对采自4个县(市)的616份牦牛血清分别进行了布鲁菌病、衣原体病和弓形虫病抗体检侧，阳性率分别为45.62%、68.34%和13.96%。结果表明，这些地区牦牛的流产与衣原体病和布鲁菌病密切相关。

青海 ； 牦牛 ； 流产

青海省牦牛存栏量约570 万头，占世界牦牛的三分之一还要多。牦牛产业是牧区农牧民赖以生存的物质基础和支柱产业，是高原牧区藏族同胞生产和生活物资的来源。近年来，据部分地区兽医工作人员和牧民反映，牦牛的空怀率和流产率逐年升高，对畜牧业的健康发展造成了极大的影响。青海省多年来未对布鲁菌病进行详细调查，而各地对动物衣原体病越来越重视，牦牛衣原体病的流行病学资料比较多[1，3，8]，个别县(市)的阳性率也比较高。另外，家畜的流产也与弓形虫病的感染有一定的关系。为了查清这些地区牦牛流产与布鲁菌病、衣原体病和弓形虫病的联系，我们开展了相关动物疫病的流行病学调查。近期，农业部将布鲁菌病纳入强制免疫动物疫病范围后，有必要对牦牛衣原体病的情况进行一些调查和研究，所以我们及时开展了牦牛衣原体灭活疫苗研究与推广项目。在项目依托下，我们深入牧区牧户，采取问卷调查和血清学调查的方式，对衣原体病、布鲁菌病和弓形虫病3种动物疫病进行检测，分析结果，提出防治建议。

1 材料与方法

1.1 入户调查 以问卷调查的方式，共调查贵南、海晏、乌兰和玉树4 个县(市)7 个乡的104 个牧户，调查内容包括牦牛存栏数、母牛数、怀孕数、产仔数、流产数等。

1.2 血清来源 在贵南、海晏、乌兰和玉树4 个县(市)入户调查的同时，采集并分离牦牛血清，共采集616份牦牛血清。

1.3 材料 布鲁菌病虎红平板凝集抗原、阴性血清、阳性血清；弓形虫IHA 抗原、阴性血清、阳性血清及稀释液；衣原体抗原、阴性血清、阳性血清及稀释液均由中国农业科学院兰州兽医研究所提供。

1.4 试验方法

1.4.1 布鲁菌病 采集和分离后的血清，每份按30 μL滴加到玻璃板上，加入30 μL虎红平板凝集抗原，混匀后3 min 观察结果。当出现肉眼可见的凝集颗粒时，判为阳性；无凝集的判为阴性。

1.4.2 衣原体病 在V型反应板所有孔中加入稀释液0.075 μL；第1 孔加入被检血清0.025 μL，呈4 倍递增稀释3 孔。第3 孔弃去0.025 μL，同时设阴、阳性和空白对照各2 孔；每孔加入抗原0.025 μL，置振荡器上震荡2 min，盖上玻璃板在37 ℃恒温箱中作用2 h 判定结果。要求阳性对照孔各稀释度完全凝集，阴性、空白对照孔不发生凝集，则试验成立；被检血清第2 孔(1∶16)出现“++”及以上凝集者为阳性；1∶4孔出现“+”及以下凝集者为阴性；1∶4 孔出现“++”至1∶16 孔出现“+”以下者为可疑。

1.4.3 弓形虫病 反应在96 孔V 型微量有机玻璃反应板上进行，设阴阳性对照孔，每孔加75 μL稀释液和被检样品、阴性、阳性血清25 μL，稀释至第3 孔。每孔加25 μL 诊断抗原，之后将反应板置于微量振荡器上1～2 min，盖上一块玻璃板以防落入灰尘，置37 ℃下作用2～3 h 后，进行结果判定。阳性对照血清各孔均为凝集(+)，阴性对照血清除第l孔允许存在前滞现象(+)外，其余各孔均不能出现凝集(-)，被检血清抗体滴度达到1∶64判为阳性，50%凝集(++)为阳性终点。

2 结果

入户问卷调查结果显示，牦牛流产率从高到低分别是玉树市32.19%、海晏县31.26%、贵南县19.30%、乌兰县16.51%，平均为21.39%，见表1。实验室检验结果显示，牦牛衣原体病血清学阳性率从高到低分别是海晏县88.89%、贵南县74.29%、玉树市42.22%、乌兰县39.45%，平均为68.34%；牦牛布鲁菌病血清学阳性率从高到低分别是海晏县55.56%、玉树市53.33%、乌兰县44.95%、贵南县32.86%，平均为45.62%；牦牛弓形虫病血清学阳性率从高到低分别是乌兰县20.18%、贵南县 15.71%、海晏县 13.53%、玉树市3.33%，平均为13.96%，见表2。除了弓形虫病的血清学阳性率较低外，布鲁菌病和衣原体病的阳性率均比较高。

3 讨论

本次牦牛流产的调查是在问卷调查的基础上，以血清学监测为主进行的。从问卷调查结果来看，4县(市)牦牛流产率为16.51%～32.19%，平均 21.39%，比侯生库等[2]的调查结果要高；相对应的，血清学调查结果显示，衣原体病、布鲁菌病和弓形虫病的阳性率分别为68.34%、45.62% 和13.96%，相对于马怡隽[1]和张立成等[3]开展的衣原体病血清学调查、王云平[4]和赵启明等[5]进行的布鲁菌病调查、李晓卉[6]和陈世堂等[7]进行的弓形虫病血清学调查结果来说，阳性率高出很多。这与问卷调查和血清学调查都集中在牦牛发生流产情况比较严重的牧户中进行有关，但也说明了这些地区牦牛比较严重，同时与多种动物疫病有关。

表1 2014-2015年贵南、海晏、乌兰和玉树

表2 2014-2015年贵南、海晏、乌兰和玉树4县(市)

血清学监测结果中，贵南、海晏、乌兰和玉树4 县(市)牦牛衣原体病阳性率分别为74.29%、88.89%、39.45%和42.22%，处在较高的水平，特别是牦牛衣原体灭活疫苗研究与推广项目的试点县贵南和海晏，阳性率在80%左右。周继章等[8]报道了用间接血凝试验对采自青海的牦牛血清检测衣原体抗体，结果平均阳性检出率为18.7%。马怡隽等[1]报道了用正向间接血凝试验对全省227 份牛血清进行了检测，平均阳性率为26.4%。张立成等[3]报道了用正向间接血凝试验对全省506 份牛血清进行了检测，平均阳性率为36.8%。本次调查平均阳性率为68.34%，由此可见，近些年来青海省牦牛衣原体病的阳性率呈逐年上升的趋势。从入户调查的结果来看，4 县(市)的牦牛流产率也比较高，除玉树外，贵南、海晏和乌兰牦牛流产率与衣原体病血清学阳性率呈正相关，说明这几个地区牦牛的流产与衣原体病的感染有很大关系。

近些年，我国人间和畜间的布鲁菌病感染率逐年上升，过去有布鲁菌病流行的省区皆出现了疫情反弹，东北和西北的近10个省区尤为突出[9-10]。本次调查的牦牛布鲁菌病血清学阳性率从高到低分别为海晏县55.56%、玉树市53.33%、乌兰县44.95%、贵南县32.86%，4县(市)阳性率均比较高，这也说明了这些地区牦牛的流产除了与衣原体病相关之外，还与布鲁菌病有着密切的关系。李桂兰等[11]在青海省天峻县和祁连县进行牛羊布鲁菌病感染情况的调查，祁连县牦牛阳性率为7.49%，母牛流产在5%～7%之间；天峻县牦牛阳性率为13.13%，牛的流产率在2%，流产率较往年有所上升。黄文明等[12]进行了青海省牛布鲁菌病血清学调查，阳性率为3.51%。本次调查的结果相比于以上数据，阳性率都比较高，说明这些地区牦牛布鲁菌病严重流行。

弓形虫病对动物繁殖的影响较大，我国牛弓形虫病的感染率在2.41%～67.46%[13]。据蔡进忠等[14]的调查，青海省牦牛弓形虫病阳性率平均为8.03%，各地高低不一。另据傅义娟[15]的调查，青海省牛弓形虫病阳性率平均为12.67%。本次调查的结果平均为13.96%，与历史数据较为相近。

青海省牦牛数量众多，牦牛在农牧民的生产生活中占有十分重要的地位。牦牛的流产给农牧民的生产和增收造成了巨大的损失，降低牦牛的流产率是我们动物防疫部门迫切需要解决的问题。综合3种动物疫病的调查结果，布鲁菌病和衣原体病阳性率较高，相对应的，牧户牦牛的流产率也较高，说明这两种病是导致牦牛流产的主要原因；而弓形虫病感染率相对不高，对牦牛流产的影响不如前两种疫病。近年来，国家对家畜布鲁菌病的防治比较重视，已经把布鲁菌病的免疫纳入强制免疫计划；而无论是畜牧兽医机构，还是牧户，对家畜衣原体病的认识和重视程度均不高。所以，对家畜衣原体病的防治显得尤为重要。我们开展的牦牛衣原体灭活疫苗研究与推广项目以此为出发点，在前期充分进行流行病学调查的基础上，采集了流产牦牛的胎盘和流产胎儿，分离纯化病原并研制疫苗，为有效的防控牦牛衣原体病，降低牦牛流产率打下了基础。

[1] 马怡隽.青海省畜禽衣原体病的血清学调查[J].中国兽医科学，2013，43(02)：213-215.

[2] 侯生库，谢仲秀.牦牛地方性流产的病因学调查[J].畜牧与兽医，2012，03：109-110.

[3] 张立成，王谢忠，张茂华，等.青海省牲畜衣原体病血清学监测[J].中国兽医杂志，2014，50(4)：38-39.

[4] 王云平，王生祥，傅义娟，等.青海省牛羊布病疫情形势及防治策略[J].青海畜牧兽医杂志，2015，02：42-43.

[5] 赵启明，游潇倩，张乃忠，等.青海牛羊布鲁菌病监测与分析[J].上海畜牧兽医通讯，2014，02：60.

[6] 李晓卉.青海牦牛弓形体病的血清学调查[J].中国草食动物，2004，04：30-31.

[7] 陈世堂，王谢忠，沈得贵.青海省牦牛弓形体病的血清学调查[J].中国畜牧兽医，2010，37(08)：192-193

[8] 周继章，邱昌庆.我国家畜衣原体病流行状况[J].中国畜牧兽医，2007，34(7)：110-112.

[9] Xulong L，Hailong Q，Zhaoyang B，etal.Seroprevalence of Brucelia infection in yaks(Bos grunniens)on the Qinghai-Tibet plateau of China[J].Trop Anim Health Prod，2011，43(2)：305-306.

[10] ChenZ，Zhang W，Ke Y，etal.High-risk regionsof human brucellosis in china：implications for prevention and early diagnosis of travel-related infections[J].Clin Infect Dis，2013，57(2)：330-332．

[11] 李桂兰，赵启明.青海省祁连、天峻地区牛羊布鲁菌病现状调查[J].中国动物检疫，2011，28(06)：57-58.

[12] 黄文明，尕松代吉，李增魁.青海省牛布鲁菌病的流行病学调查[J].中国兽医杂志，2015，51(06)：39-41.

[13] 张居作，陈汉忠，徐君飞.我国弓形虫的感染现状[J].动物医学进展，2008，29(07)：101-104.

[14] 蔡进忠，李春花.青海家畜弓形虫病血清学调查与流行情况分析[J].中国兽医杂志，2011，47(1)：45-46.

[15] 傅义娟.青海省猪牛羊弓形虫病的血清抗体检测[J].中国兽医科技，2003，33(9)：69-70.

Preliminary investigation on Abortion of Yaks in part of Qinghai Province

HU Guang-wei1， SHEN Yan-li1， ZHAO Quan-bang1， CHAO Yi-lin1，KAN Wei1， ZHOU Ji-zhang2， MA Rui-lin1， CAI Jin-shan1

(1.Qinghai Animal Disease Control Center，Xining 810001，China；2.Lanzhou Veterinary Research Institute，Chinese Academy of Agricultural Sciences，State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology，Lanzhou 730046，China)

In order to find out the reason on abortion of Yaks in part of Qinghai Province，the rates of abortion of yaks from 104 farmers of 7 townships and 4 counties were investigated.The average abortion rate was 21.39%.Chlamydiosis，brucellosis and toxoplasmosis in yaks were examined by rose bengal plate test and indirect hemagglutination assay，and the positive rates were 45.62%，68.34% and 13.96%，respectively.The results show that abortion of yaks in these regions is related to chlamydiosis and brucellosis.

Qinghai ； yak ； abortion

CAI Jin-shan

2016-03-02

青海省农业科技成果转化与推广计划(2014-N K-532)

胡广卫(1982-)，男，兽医师，硕士，从事动物疫病防控工作，E-mail：qhhgw@sina.com

蔡金山，E-mail：cjsheyf@163.com

S823.8+5

A

0529-6005(2016)10-0003-03