杜 娟，张勇萍#，杨世明△，安 宁，李 丹，杨 琳，陈 扬，穆士杰▲

(1.第四军医大学唐都医院输血科，陕西西安 710038；2.第四军医大学西京医院输血科，陕西西安 710032)

·临床研究·

265例血型不规则抗体特异性及其临床分布情况的分析*

杜 娟1，张勇萍1#，杨世明1△，安 宁2，李 丹1，杨 琳1，陈 扬1，穆士杰1▲

(1.第四军医大学唐都医院输血科，陕西西安 710038；2.第四军医大学西京医院输血科，陕西西安 710032)

目的 探讨血型不规则抗体特异性和阳性率及其在临床科室的分布情况。方法 采用微柱凝胶法对孕妇产前检查或拟输血治疗的患者进行血型不规则抗体筛查，对筛查阳性的血标本再用相同方法进行抗体特异性鉴定，统计分析血型不规则抗体的特异性和阳性率及其在临床科室的分布情况。结果 265例血型不规则抗体阳性者中，男95例(35.8%)，女170例(64.2%)。非特异性自身抗体32例(12.1%)，特异性同种抗体233例(87.9%)，其中Rh血型系统抗体201例(75.8%)，MNS血型系统14例(5.3%)，P血型系统1例(0.4%)，Lewis血型系统11例(4.2%)，Kidd血型系统3例(1.1%)，Duffy血型系统3例(1.1%)。免疫球蛋白类型：IgG型204例(77.0%)，IgM型58例(21.9%)，IgG+IgM型3例(1.1%)，抗体效价在4～512之间。37℃反应性：+/-～++++。血型不规则抗体在临床科室中的分布：妇产科、血液科及感染科的血型不规则抗体阳性率居前三位，分别为15.5%(41/265)、12.8%(34/265)及11.3%(30/265)。结论 对孕妇或拟输血者进行血型不规则抗体筛查和特异性鉴定，对防治新生儿溶血病，保障患者手术和治疗及时用血及输血安全有重要意义。

红细胞血型； 不规则抗体； 特异性鉴定； 临床科室； 分布情况

血型不规则抗体是指ABO血型系统以外的所有红细胞血型抗体，血型不规则抗体多为免疫产生的IgG型抗体，可导致母婴血型不合新生儿溶血病、溶血性输血反应、ABO血型正反定型不符及交叉配血不合[1]。鉴于血型不规则抗体导致的上述不良反应及危险性，在产前或输血前对孕妇或患者进行血型不规则抗体检测，提前预防或选择不含相应抗原的血液进行输注，是防治新生儿溶血病和降低输血不良反应发生率，确保输血安全有效的重要措施[2-3]。现将265例血型不规则抗体的特异性和阳性率及其在临床科室的分布情况报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2012年6月30日至2015年6月30日在唐都医院住院择期手术和拟输血治疗以及在妇产科生殖中心就诊，血型不规则抗体筛查为阳性的血标本265例，其中男95例(35.8%)，女170例(64.2%)，年龄24 h至80岁。经唐都医院伦理学委员会批准、患者家属知情同意。

1.2 试剂与仪器 抗A、抗B、抗D、抗C、抗c、抗E、抗e、抗M、抗N及抗P1定型血清，抗体筛查细胞及鉴定谱细胞、抗IgG、抗C3d及多特异性抗人球蛋白试剂均由上海生物医药有限责任公司提供，抗S、抗Lea、抗Leb、抗Jka、抗Jkb定型试剂为英国BIOSCOT公司产品，聚凝胺试剂盒由贝索公司提供；微柱凝胶血型及配血试剂卡由瑞士达亚美公司提供。

1.3 检测方法

1.3.1 血型不规则抗体筛查 向标记的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号微柱凝胶卡中加被检血清50 μL，再加1%的相应抗体筛查红细胞25 μL，置37 ℃孵育15 min，取出置专用离心机离心10 min，观察结果，红细胞全部沉于微柱凝胶卡底部者为阴性，聚集在微柱凝胶卡上部或中段者为阳性。

1.3.2 血型不规则抗体特异性鉴定 对抗体筛查阳性的血标本再用微柱凝胶法进行抗体特异性鉴定，取微柱凝胶卡标记1～10号，在各微柱管中加入与标记号相对应的抗体鉴定谱细胞20 μL，再于各管中加入被检血清40 μL，于37 ℃孵育15 min，置专用离心机1 030 r/min离心10 min，观察结果；被检血清与10个谱细胞中任何一个凝集，与自身对照不凝集判者为有特异性抗体，与所有谱细胞和自身对照均凝集者，判为有自身抗体或未检出特异性抗体，与谱细胞均不凝集者判为未检出特异性抗体，同时检测其红细胞上的相应抗原是否为阴性。

1.3.3 血型不规则抗体效价及37 ℃反应性的检测 对检出特异性抗体的血标本进行倍比稀释后，用试管法进行抗体效价测定。血型不规则抗体37 ℃反应性的检测：采用试管盐水法及间接抗人球蛋白试验两种方法，分别将被检血清与含有相应抗原的红细胞在37 ℃进行反应，只要其中任何一种方法在37 ℃出现凝集者，即判为有临床意义的血型不规则抗体。

2 结 果

2.1 血型不规则抗体的特异性和Ig类型及37 ℃反应性 在265例血型不规则抗体阳性中，男95例(35.8%)，女170例(64.2%)。非特异性自身抗体32例(12.1%)，特异性同种抗体233例(87.9%)，其中Rh血型系统抗体201例(75.8%)，MNS血型系统14例(5.3%)，P血型系统1例(0.4%)，Lewis血型系统11例(4.2%)，Kidd血型系统3例(1.1%)；Duffy血型系统3例(1.1%)。免疫球蛋白类型：IgG型204例(77.0%)，IgM型58例(21.9%)，IgG+IgM型3例(1.1%)，抗体效价在4～512之间；37 ℃反应性：+/-～++++(表1)。

表1 265例血型不规则抗体特异性鉴定结果

“/”：无资料；“+/-～++++”：凝集强度；“-”：阴性。

2.2 血型不规则抗体阳性在临床科室的分布 在265例血型不规则抗体中，妇产科41例(15.5%)，血液科34例(12.8%)，传染科30例(11.3%)，脑外科29例(10.9%)，普外21例(7.9%)，骨科18例(6.8%)，胸外科17例(6.4%)，消化科14例(5.3%)，肿瘤科11例(4.2%)，泌尿科7例(2.6%)，新生儿科5例(1.9%)，其他科室38例(14.3%)。妇产科、血液科及感染科的血型不规则抗体阳性居前三位。

2.3 血型不规则抗体阳性与输血及妊娠的关系 在265例血型不规则抗体阳性中，多次输血或妊娠大于或等于2次者163例(61.5%)，孕产妇及新生儿溶血病患者67 例(25.3%)，初次输血或原因不明者35例(13.2%)。

3 讨 论

输血是临床治疗疾病和抢救危重患者生命及时有效的重要手段，但因血液制品含有抗原及抗体成分的特殊性，在输血过程中有可能出现不同程度的输血不良反应[4]。近年来，随着单克隆抗体血型检测试剂敏感度的不断提高，由ABO血型定型错误而引起的输血不良反应已极少见，但由ABO以外的血型不规则抗体引起的输血不良反应仍时有发生[5]。血型不规则抗体在人群中的检出率约为0.3%～2%[6]，可由母婴血型不合的妊娠、异型输血、注射血液制品以及其他难以察觉的免疫刺激而导致血型不规则抗体的产生[7]。由于血型不规则抗体可引起溶血性输血反应、新生儿溶血病、ABO血型正反定型不符及交叉配血不合[8-11]，因此在产前及输血前对孕妇和受血者进行血型不规则抗体筛查及特异性鉴定，提前采取干预措施和选择不含相应抗原的血液进行输注，对预防新生儿溶血病、确保临床输血安全尤为重要。

本研究265例血型不规则抗体中，检出非特异性自身抗体32例(12.1%)，主要为血液系统疾病患者，由于患者存在自身免疫性溶血性贫血，检出的不规则抗体多数为自身温抗体，在血型鉴定和交叉配血中起干扰作用[12]。自身温抗体主要是IgG型，极少部分为IgM型，自身冷抗体是一种温度范围很窄的IgM型冷凝集素[13]，在4 ℃反应较强，超过37 ℃通常不反应。患者体内存在较强的自身温抗体时，应采用自身洗涤或放散后的红细胞在4 ℃吸收血清中的自身抗体后再进行同种抗体的检测，以免其封闭或掩盖同种抗体，导致严重的溶血性输血反应。确定了同种抗体的特异性以后，选择不含相应抗原的血液进行交叉配血及输注[14]。

本研究检出特异性同种血型不规则抗体233例(87.9%)，其中Rh血型系统抗体201例(75.8%)，MNS血型系统14例(5.3%)，P血型系统1例(0.4%)，Lewis血型系统11例(4.2%)，Kidd血型系统3例(1.1%)，Duffy血型系统3例(1.1%)。结果显示，Rh血型系统不规则抗体的阳性率最高，其次为MNS血型系统，提示Rh及MNS血型系统最容易产生血型不规则抗体。其中Rh血型系统的抗E、抗cE及抗-C是最常见的血型不规则抗体，也是引起迟发性溶血性输血反应及新生儿溶血病的主要因素[8-9]。抗M、抗Le、抗Jk及抗Fy是除Rh抗体之外比较常见的血型不规则抗体，但其临床意义明显小于Rh抗D、抗E及抗C。通常RhD抗原性比E抗原性更强，抗D的检出率本应高于抗E，因我国较早采用RhD抗原相容性输血，由输血引起的抗D逐渐下降，由输血引起的抗E呈上升趋势[15]。本研究265例血型不规则抗体中，免疫球蛋白类型为：IgG型204例(77.0%)，IgM型58例(21.9%)，IgG+IgM型3例(1.1%)，抗体效价在4～512之间。37 ℃反应性：+/-～++++。其中IgG型或IgG+IgM型血型不规则抗体207例(78.1%)，而且绝大多数为IgG型抗体，能在37 ℃与含有相应抗原的红细胞发生+/-～++++的凝集反应，因此说明所检出的血型不规则抗体具有临床意义[16]。

本研究265例血型不规则抗体临床分布情况显示，妇产科、血液科及感染科的血型不规则抗体阳性率居前三位，分别为15.5%、12.8%及11.3%。妇产科的血型不规则抗体阳性主要为孕产妇，血液科主要为白血病、自身免疫性溶血性贫血及多发性骨髓瘤患者，传染科主要为乙型及丙型肝炎患者，可能与上述患者反复多次输血有关[17]。从血型不规则抗体产生的种类及途径分析，抗D多由妊娠免疫引起，抗E及抗Le多由反复输血引起。本研究结果显示，有输血史或妊娠史的患者血型不规则抗体阳性明显高于无输血史或妊娠史者，女性患者的血型不规则抗体阳性(64.2%)明显高于男性患者(35.8%)。其原因可能是由于女性患者受到妊娠和输血的双重免疫机会[18]，从而导致其血型不规则抗体阳性明显高于男性。

综上所述，反复输血和多次妊娠极易受到免疫刺激而产生血型不规则抗体[19-20]，且绝大部分为IgG型抗体，在37 ℃有反应性，可引起溶血性输血反应及新生儿溶血病。因此，在产前和输血前对孕妇及受血者进行血型不规则抗体筛查及特异性鉴定，及早发现和确认有临床意义的血型不规则抗体，对防治新生儿溶血病，确保临床输血安全和有效有重要意义。

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陕西省自然科学基金(2009JM4006)；陕西省社发公关项目(2010K15-03-07)。

#同为第一作者。

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，E-mail：shxkyshm@fmmu.edu.cn。

▲，E-mail：musj1963@fmmu.edu.cn。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.07.035 文献标识码：A 文章编号：1673-4130(2016)07-0956-03

2015-11-20)