李富欣 孙丹丹 闫雪生*

（1 山东中医药大学，山东 济南 250355；2 山东省中医药研究院，山东 济南 250014）

中药中三萜酸类成分的研究进展

李富欣1孙丹丹2闫雪生2*

（1 山东中医药大学，山东 济南 250355；2 山东省中医药研究院，山东 济南 250014）

目的 对中药中三萜酸类成分近十年的研究概况进行综述。方法 通过查阅近10年来关于三萜酸成分研究的文献，对三萜酸类成分的结构分类、提取分离、含量测定、药理作用等进行归纳综述。结果 中药中三萜酸类化合物多数为四环三萜酸和五环三萜酸，具有广泛的生理活性。结论 三萜酸类化学成分在中药中分布广泛，并且具有广阔的应用前景,亟待开发。

三萜酸；结构分类；提取分离；含量测定；药理作用

三萜酸类化合物在中草药中分布很广，在山楂、枇杷叶、茯苓等中药中都含有三萜酸成分。三萜酸是以游离态存在的酸性三萜类化合物，具有免疫调节、护肝、抗炎、抗病毒、降血糖等活性[1]。近10年来国内关于三萜酸成分研究论文达百余篇，现将其结构分类、理化性质、提取分离、含量测定和药理作用研究进展综述如下。

1 三萜酸的结构分类

目前已发现的三萜酸类化合物多数为四环三萜酸和五环三萜酸。五环三萜酸类成分在药用植物中较为常见，结构上分为4类，分别是乌苏烷型、齐墩果烷型、羽扇豆烷型和木栓烷型。其中乌苏烷型的代表性化合物为熊果酸（UA）和科罗索酸（CA）；齐墩果烷型的代表为齐墩果酸（OA）和甘草酸（GA）；羽扇院型的代表为桦木酸（BA）、2，3-羟基白桦酸；木栓烷型的代表为南蛇藤素。

2 三萜酸的提取和分离纯化

2.1 三萜酸的提取工艺：目前，用于三萜酸的提取方法主要有:溶剂回流提取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法等。

2.1.1 溶剂回流提取法：溶剂回流提取法系指用乙醇等挥发性有机溶剂浸提，加热浸提液，挥发性溶剂先流出后被冷凝，重新流回进出器中浸提药材，这样循环往复，直至有效成分回流浸提完全的方法。乙醇加热回流提取是传统的中药提取方法，但此法提取温度高，加热时间长，提取效率低。王逸萍[2]等用山楂中总三萜酸作为考察指标，采用正交试验对山楂提取条件进行优选：药材用8倍80%的乙醇提取，提取时间1.5 h，提取率达94.03%。

2.1.2 超声波辅助提取法：超声波提取法是利用超声波强大的机械作用、热效应、空化作用等增加物质分子的运动频率和速度以及溶剂穿透力，从而使药材有效成分浸出率提高。张方[3]等采用超声法提取茯苓中三萜类化合物，在温度为25 ℃，频率为25 kHZ，确定茯苓中三萜类化合物的最佳提取工艺为：用20倍量的乙酸乙酯提取3次，每次30 min。

2.1.3 微波辅助萃取法：微波辅助萃取系指利用微波对中药与适当的溶剂的混合物进行辐照处理，从而在短时间内提取中药中有效成分的一种新方法。黄秀香[4]等采用正交实验，考察温度、时间、氢氧化钠浓度、固液比4个因素的影响，得出微波提取时最佳工艺是以16倍量的3%氢氧化钠溶液作提取剂，在温度为92 ℃条件下提取10 min。微波提取具有提取率高，提取速率快，提取温度低，能量消耗小，安全可靠无污染等特点，用于中草药的提取应用前景广阔。

2.2 三萜酸的分离纯化：目前用于三萜酸的分离纯化方法主要是大孔树脂吸附法，指将中药提取液通过大孔树脂，吸附其中的有效成分，再经洗脱回收，除掉杂质的一种纯化方法。袁怀波[5]等以体积分数为70%的乙醇为洗脱剂，上样液的pH值为6，采用AB-8大孔吸附树脂对木瓜三萜酸进行分离纯化效果最优，产品的洗脱率达89.33%，纯度达36.51%。

三萜酸的分离纯化方法还有酸碱沉淀法、活性炭吸附法、重结晶法、硅胶柱色谱法等，但是这些方法应用较少，主要还是以大孔树脂吸附法为主。

3 三萜酸的含量测定

3.1 比色法：周巧霞[6]等选用熊果酸为对照品，采用比色法测定山楂生药及总三萜酸含量，得出高氯酸1.0 mL，5%香草醛-冰醋酸溶液0.4 mL，60 ℃水浴15 min，冰浴冷却，加冰醋酸5.0 mL摇匀，在548 nm处测定，效果最佳。该比色法操作简便，吸收值稳定，并且干扰小。

3.2 分光光度法：黄秀香[7]等利用在高氯酸的条件下香草醛-冰醋酸与三萜酸的反应测定总三萜酸，5%香草醛-冰醋酸0.4 mL，高氯酸0.6 mL，水浴温度60 ℃，水浴加热时间为10 min，是熊果酸测定的最佳条件，在550 nm下有一个较好的吸收值，结果总三萜酸在2.53～13.14 Lg/mL呈良好的线性关系，测定样品回收率为99.07%，该法简便、快速、灵敏。

3.3 高效液相色谱法：HPLC分析范围广、速度快、分离效能高，是最常见的三萜酸类成分分析方法。李保明[8]等使用HPLC测定灵芝子实体中9种三萜酸，采用Alltima C18色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），流动相为乙腈-0.04%甲酸溶液，检测波长254 nm，流速1.0 mL/min，柱温15 ℃，得出该方法可行、重复性好，可定量测定灵芝中三萜酸的含量。

除了以上3种方法外，还有毛细管电泳法、薄层扫描法、气相色谱法等方法测定药用植物中的三萜酸成分。

4 三萜酸的药理作用

4.1 降血糖降血脂作用：洪晓华[9]等观察女贞子三萜酸对实验性糖尿病大鼠的治疗作用，结果显示女贞子三萜酸能明显降低血糖和三酰甘油，改善糖耐量，对血清胰岛素、糖化血清蛋白、胆固醇等影响不明显，因此女贞子三萜酸降血糖作用较强，对血脂具有一定的调节作用。

4.2 抗肿瘤作用：肿瘤的形成是多步骤、多因素、多基因突变的，许多化学致癌物能诱发和促进肿瘤形成。枇杷叶中的乌苏酸具有广泛的生物学效应，抗肿瘤作用突出，它对多种致癌物有抑制作用，并且对多种恶性肿瘤细胞有明显诱导分化和细胞毒及抗血管形成作用，近年来，其防癌抗癌作用引起了广泛关注，有望成为低毒有效的新型抗癌药。

4.3 抗炎、抗菌、抗病毒作用：葛金芳[10]等用枇杷叶三萜酸（50，

150，450 mg/kg）给大鼠灌胃给药，降低了慢性支气管炎（CB）大鼠支气管肺泡灌洗液（BAL F）中白细胞总数，并且中性粒细胞和肺泡巨噬细胞比例明显上升；降低了CB大鼠支气管黏膜炎症的浸润程度，减少了支气管内的分泌物，减轻了支气管黏膜的上皮细胞脱落情况，抑制了支气管黏膜上皮细胞增生，使支气管内径、通气量增大。实验表明枇杷叶三萜酸一定程度上可以改善慢性支气管炎，其对CB的治疗作用可能与其平衡细胞因子产生、调节机体免疫有关。

4.4 免疫调节及保肝作用：李春雨[11]等从茯苓总提取物中分离提取出单体化合物茯苓酸，观察到茯苓酸具有抗排斥作用，认为茯苓酸可以从多个环节抑制急性排斥反应。中药茯苓酸的出现为进一步研究开发茯苓，进而从中药中筛选出低不良反应的具有明确免疫抑制作用的免疫抑制剂奠定了良好的基础。枇杷叶中的齐墩果酸具有解毒、护肝的作用，可以有效的保护CCl4引起的急慢性肝炎损伤[12]。三萜酸类化合物是一类在中药材中广泛分布，并具有多种生物活性的天然产物，具有很高的药用价值，其构效关系的研究及其开发利用值得我们进一步深入探讨。近年来，由于各种提取技术、分离技术以及测定技术等分析手段的迅速发展，使三萜酸类化合物的研究取得了可喜的进展，但我们仍需要多方努力，共同挖掘出该类化合物巨大的药用潜能。

[1] 李宏杨,刘国民,刘飞,等.熊果酸及五环三萜同类物的研究进展[J].湖南工业大学学报,2009,23(5):18-21.

[2] 王逸萍,徐智勇.山楂中总三萜酸提取工艺优选[J].中华中医药学刊,2007,25(4):774-775.

[3] 张方,陈平.超声提取茯苓中三萜类成分的工艺研究[J].武汉工业学院学报,2013,32(4):5-10.

[4] 黄秀香,林翠梧,陈丽芬,等.微波提取毛老虎茎中总三萜酸的正交实验研究[J].中药材,2008,31(1):123-125.

[5] 袁怀波,江力,陈宗道.大孔树脂分离纯化木瓜总三萜酸的研究[J].食品与机械,2007,24(4):80-82.

[6] 周巧霞,张经硕,顾明,等.测定山楂及提取物总三萜酸的含量[J].中国野生植物资源,2004,23(5):43-44.

[7] 黄秀香,袁霞,林翠梧,等.分光光度法测定毛老虎茎中三萜酸的总含量[J].时珍国医国药,2007,19(2):297-298.

[8] 李保明,古海锋,李晔,等.HPLC测定不同产地灵芝中9种三萜酸[J].中国中药杂志,2012,37(23):3599-3603.

[9] 洪晓华,于魏林,李艳荣,等.女贞子提取物总三萜酸降血糖作用的实验研究[J].中国中西医结合杂志,2003,23(S1):121-123.

[10] 葛金芳.枇杷叶三萜酸的抗炎免疫作用及对慢性支气管炎的治疗作用与机制研究[D].合肥:安徽医科大学,2004.

[11] 李春雨,刘宏宇,张国伟,等.茯苓酸抗大鼠心脏移植急性排斥反应的实验研究[J].中国胸心血管外科临床杂志,2010,17(2):139.

[12] 郭 宇,吴松吉,朴惠善.枇杷叶的化学成分及药理活性研究进展[J].时珍国医国药,2006,20(6):928-929.

R284.1

A

1671-8194（2016）34-0022-02