吴友茹，陈明勇，朱 静

(四川省绵阳市中心医院呼吸内科 621000)



·论 著·

肺纤维化患者血清及诱导痰肺表面活性蛋白水平测定及意义

吴友茹，陈明勇△，朱 静

(四川省绵阳市中心医院呼吸内科 621000)

目的 检测特发性肺纤维化患者急性加重期血清及诱导痰肺表面活性蛋白D(SP-D)水平并探讨其临床治疗意义。方法 选择特发性肺纤维化患者急性加重期住院治疗26例，分别收集纳入患者入院时及治疗后病情缓解血清及诱导痰液标本，采用酶联免疫吸附试验检测血清及诱导痰SP-D水平。选择42例健康人群作为对照组。结果 特发性肺纤维化患者急性加重期及病情缓解期血清SP-D平均水平分别为(196±82)、(125±69)ng/mL，健康对照组为(96±47)ng/mL，诱导痰SP-D平均水平为(153±71)、(106±64)ng/mL，急性加重期与缓解期及健康对照组SP-D水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 血清SP-D检测可作为特发性肺纤维化患者急性加重诊断的生物学指标。

特发性肺纤维化； 急性加重期； 肺表面活性蛋白D； 血清； 诱导痰

特发性肺纤维化(IPF)是最常见的、致死性的间质性肺疾病，是一种病因不明，局限于肺部，慢性进行性纤维化间质性肺炎的一种特殊形式，组织病理学和/或高分辨计算机层面X线成像术显示为普通间质性肺炎特征[1]。新近观点认为，IPF的发生是由于尚未明确的刺激导致序贯性肺损伤，反复过度损伤修复最终导致肺纤维化。肺表面活性蛋白D(SP-D)为肺高度特异性蛋白，参与免疫、炎症及过敏反应调节，近年来国内、外进行的多项研究证明SP-D与慢性气道炎症的形成有关[2-3]。本研究旨在通过检测IPF急性加重期患者血清及诱导痰液标本中SP-D水平，探讨血清及诱导痰液标本SP-D水平变化及能否作为IPF患者严重程度检测的一项生物学指标。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2011年6月至2014年6月在绵阳市中心医院呼吸内科因IPF急性加重(AEIPF)住院的患者共26例，其中男13例，女13例，年龄51～67岁，平均(62±6)岁。IPF诊断标准采用2011年3月美国胸科协会/欧洲呼吸协会提出的IPF诊断标准[1]：所有入选患者都行肺部HRCT扫描，HRCT表现为典型的UIP模式，双侧肺部病灶表现主要分布在胸膜下及基底部的网格状阴影、蜂窝肺、牵拉性支气管扩张、肺结构扭曲及少磨玻璃影。排除其他已知原因的间质性肺疾病，如家庭或职业环境暴露，结缔组织疾病和药物毒性等。AEIPF诊断标准：(1)过去或现在诊断IPF;(2)1个月内发生无法解释的呼吸困难加重；(3)低氧血症加重或气体交换功能严重受损；(4)新出现的肺泡浸润影，排除肺部感染、肺栓塞、气胸及心力衰竭等。所有患者入院后都给予糖皮质激素抗炎联合乙酰半胱氨酸、氧疗、肺康复治疗，对感染诱发加重的患者同时予抗感染等治疗，病情缓解好转出院时，收集缓解期血清标本。42例健康对照者来自医院的工作人员及门诊体检者，均无呼吸道疾病史及服用药物，所有对照者肺功能检查均正常。

1.2 仪器与试剂 人SP-D酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒购于上海丰寿实业有限公司。

1.3 方法

1.3.1 外周血标本的采集与处理 所有AEIPF患者入院时及缓解出院时清晨采肘静脉空腹血液标本5 mL各1份，静脉血采集后室温静置30 min，3 500 r/min离心10 min，分离血清，于-70 ℃冰箱保存。测定前将样本置于室温复融，混匀，再次离心，取上清液测定。采用ELISA测定血清标本中SP-D水平。操作严格按说明书进行。

1.3.2 诱导痰的采集与处理 患者入院后清洁漱口后，雾化吸入3%高渗性盐水5～8 mL，诱导咳痰，将咳出的痰液置于培养皿中。向痰液内加入4倍体积的0.1%的二硫苏糖醇，涡旋振荡10 min；再加入等量的磷酸盐缓冲液振荡5 min，2 000 r/min离心10 min，取上清液分装，于-70 ℃冰箱保存。采用ELISA测定痰液标本中SP-D水平。操作严格按说明书进行。

2 结 果

2.1 IPF患者诱导痰SP-D水平比较 AEIPF患者诱导痰液中SP-D水平为(153±71)ng/mL，缓解期患者诱导痰液中SP-D水平为(106±64)ng/mL，急性加重期较缓解期高，差异有统计学意义(P<0.05)。

2.2 3组血清SP-D水平比较 IPF患者急性加重期血清SP-D水平为(196±82)ng/mL，缓解期血清SP-D水平为(125±69)ng/mL，经治疗后血清SP-D水平下降，治疗前、后血清SP-D水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。健康对照组血清SP-D水平为(96±47)ng/mL，AEIPF患者血清SP-D水平显著高于健康对照组，两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。

3 讨 论

既往临床研究中发现，大部分慢性肺疾病患者血清SP-D水平相对于健康对照组有增高，这提示血清SP-D水平是慢性肺部疾病的血清学标志。本研究结果发现，健康对照组和IPF患者组血清SP-D水平具有明显差异，IPF患者血清SP-D水平明显高于健康对照组。Nakamura等[4]对10例AEIPF患者进行180 d随访研究，并对入院当天血清Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(KL-6)及SP-D水平进行检测，研究发现入院当天血清SP-D水平越低的患者其平均生存时间越长，认为AEIPF患者血清SP-D水平可作为AEIPF患者预后评估有价值的生物学标志。Huang等[5]对日本IPF患者研究发现，联合检测血清KL-6、SP-A和SP-D对IPF患者的诊断及预后判断意义更大。

本研究也发现，AEIPF患者血清SP-D水平在入院当天较恢复期出院时明显升高，可能与在院治疗使用糖皮质激素有关。同样国外有研究证实，IPF患者在疾病恶化时血清SP-D水平会升高，当全身应用糖皮质激素后其水平会下降[6]。Janssen等[7]进一步研究发现，血清SP-D水平可以作为结节病及IPF患者疾病严重程度及预后的生物学标志，死亡患者较生存下来的IPF患者SP-D水平要高，且血清SP-D水平和激素治疗的效果呈平行关系。SP-D在肺主动防御中起核心作用，能够增强抗原清除，调和过敏反应，有利于炎症消退。Kucejko等[8]对27例结节病、7例IPF及9例过敏性肺炎患者支气管肺泡灌洗液用ELISA检测SP-D、Clara细胞分泌的蛋白-16和白细胞介素-10水平，发现SP-D水平为76.49 ng/mL，并发现其水平与患者第1秒用力呼气容积及肺活量检测水平呈负相关。Bonella和Costabel[9]同样对结缔组织相关性间质性肺疾病血清源自肺泡上皮蛋白KL-6、SP-D及SP-A等血清学标志物研究发现其血清水平升高或支气管肺泡灌洗液水平升高能反映肺纤维化的发展，以及肺功能损伤和预后判断。

本研究对IPF患者急性加重期及缓解期血清SP-D水平检测证实，AEIPF患者血清SP-D水平明显高于健康对照人群及恢复期患者，监测血清SP-D水平为AEIPF病情及疗效评价提供了一个新的生物学检测指标。

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[4]Nakamura M,Ogura T,Miyazawa N,et al.Outcome of patients with acute exacerbation of idiopathic interstitial fibrosis (IPF) treated with sivelestat and the prognostic value of serum KL-6 and surfactant protein D[J].Related Citations,2007,45(6):455-459.

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[9]Bonella F,Costabel U.Biomarkers in connective tissue disease-associated interstitial lung disease.Semin[J].Respir Crit Care Med,2014,35(2):181-200.

The levels and clinical significance of serum and induced sputum sputum pulmonary surfactant protein inpatients with pulmonary fibrosis

WUYou-ru,CHENMing-yong△，ZHUJing

(DepartmentofRespiratoryMedicine，CenterHospitalofMianyang,Mianyang，Sichuan621000,China)

Objective To explore levels and the clinical significance of serum and induced sputum(SP)-D in patients with acute exacerbation of idiopathic pulmonary fibrosis(AEIPF).Methods The contents of serum and induced sputum SP-D for 26 patients with AEIPF and stable IPF were detected by ELISA,42 cases of healthy people were choosen as control group.Results Average serum SP-D levels in patients who experienced an acute exacerbation and remission were (196±82),(125±69)ng/mL,respectively,the control group was (96±47)ng/mL,induced sputum SP-D was(153±71),(106±64)ng/mL.The serum SP-D for patients with COPD in acute exacerbation stage was significantly higher than that for patients in stable stage and controls(P<0.05).Conclusion The serum SP-D may be a potential diagnostic biomarker for AEIPF.

idiopathic pulmonary fibrosis； acute exacerbation； SP-D； serum； induced sputum

吴友茹，女，本科，主任医师，主要从事肺间质纤维化方面的研究。△

，E-mail:clzw082005@163.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.03.025

A

1672-9455(2015)03-0350-02

2014-06-21

2014-11-12)