王业盈 施 明

南京同仁堂药业有限责任公司，江苏 南京 210012

胆舒排石颗粒是我公司自行研制的新药品种，由栀子、金钱草、茵陈等18味中药组成，临床上主要用于胆石病合并慢性胆囊炎湿热兼气血瘀阻证。为保证该制剂的安全、有效、质量可控，采用高效液相色谱法测定该药品中栀子苷的含量。

1 仪器与试药

Agilent 1100高效液相色谱仪，十万分之一电子天平(sartorius)，KQ－300DE型数控超声仪。乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水。栀子苷对照品 (批号:110749－200309，中国药品生物制品检定所提供)。胆舒排石颗粒 (南京同仁堂药业有限责任公司)。缺味阴性样品:按处方分别配成相应的缺味处方药，模拟制剂工艺，加相应辅料制成。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱:依利特 SinoChrom ODS－BP柱(5um，4.6×250mm);流动相:乙腈－水 (15∶85);流速:1.0ml/min;柱温:35℃;检测波长:238nm。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备 取栀子苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含40μg的栀子苷溶液，备用。

2.2.2 供试品溶液的制备 取本品装量差异项下的颗粒，粉碎成细粉，取1g，精密称定，置锥形瓶中，精密加甲醇50ml，称定重量，超声提取40分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，置10ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，备用［1－2］。

2.2.3 阴性对照溶液的制备 取缺栀子的样品，按2.2.2项下的方法制成阴性对照溶液。

2.3 干扰试验 分别吸取对照品、供试品溶液、阴性对照溶液各10μL，按照“2.1项”下的色谱条件测定，结果阴性无干扰［3］。色谱图见图1、图2、图3。

2.4 线性考察 分别精密量取1ml、2ml、4ml、6ml、8ml、10ml的栀子苷对照品溶液 (70.5μg/ml)，移入10ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀。分别吸取10μl注入高效液相色谱仪，测定，记录峰面积。以峰面积Y对进样浓度X(μg/ml)进行线性回归，得回归方程为:Y=1820043X+11313，r=0.9998(n=6)，线性范围为70.5ug～705ug。

2.5 精密度试验 取同一批次的样品1.0g，精密称定，按“2.2.2项”下的方法制备成供试品溶液，连续进样6次，体积10μml，测定其峰面积［4］。计算RSD为1.02%，符合要求，表明该方法的精密度较好。

2.6 重现性试验 精密称取6份同一批号的样品，按照“2.2.2”项下的方法制成供试品溶液，进样体积5μl，注入高效液相中测定其峰面积［4］。计算得RSD为0.52%，符合要求。表明该方法的重现性较好。

2.7 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于0h、4h、8h、12h、16h、20h进样，进样体积10μl，注入高效液相中测定其峰面积，计算得RSD为1.13%，符合要求。表明供试品溶液在20h内比较稳定。

2.8 加样回收率试验 取已知含量的样品约0.5g，精密称定，加入一定量的橙皮苷对照品，按“2.2.2项”下的方法制成供试品溶液，测定其峰面积。计算得平均回收率为100.6%，RSD为1.9%，均符合要求，说明该方法可以用于橙皮苷的含量测定。具体结果见表1所示。

表1 加样回收率试验结果 (n=2)

2.9 含量测定 分别取三个不同批次的胆舒排石颗粒样品1g，精密称定，按照2.2.2项下的方法制成供试品溶液，测定橙皮苷的含量，结果见表2所示。

表2 样品含量测定结果(n=2)

3 讨论

胆舒排石颗粒是由金钱草、栀子等十八味中药精制而成，处方药味多，相互干扰大，最初标准是采用薄层扫描法测定栀子苷的含量，但操作复杂，精密度较差，回收率低，现经过研究改为采用高效液相色谱法测定成品中栀子苷的含量，方法快速，结果准确，操作简便，可用于胆舒排石颗粒的质量研究。

［1］中华人民共和国药典2010年版 (一部)［S］．北京:化学工业出版社，2010，202．

［2］谭忠军，杨慈海，程丽军，等．HPLC测定清火栀麦片中栀子苷的含量［J］．中成药，2005，27，(28):988－989．

［3］奚永兰，徐富柱．高效液相色谱法测定乳宁颗粒中芍药苷的含量［J］．中国民族民间医药，2012，21(6):42－43．

［4］蒋永海．高效液相色谱法测定金胆片中虎杖苷的含量［J］．西北药学杂志，2006，21(4):148－150．