丽 丽 红 梅 王青春 白长喜

1.内蒙古医科大学，内蒙古 呼和浩特 101100;2.呼和浩特市中蒙医院，内蒙古 呼和浩特 100500

缺血性心脏病 (IHD)包括冠状动脉粥样硬化性心脏病 (冠心病，CHD)，是最常见、最危险的一种心血管病。世界许多国家，尤其是发达国家人们的首要死因。在我国，CHD是目前主要的健康杀手之一，统计数字显示，每年每105例死亡患者中有42例患者死于CHD，值得关注的是我国的CHD发病率近年来呈逐年增长趋势，且呈年轻化倾向，已成为全球性的重大的社会公共卫生问题，因而诊断和防治本病备受重视［1］。目前，尚缺乏疗效、安全性及毒性等方面较理想的治疗CHD的药物。研制多环节、多层次、多靶点协同治疗CHD新药物来提高疗效、安全性及减少毒副作用是世界医药科技研究的一个热点和发展趋势，但这种多靶型新药尚未问世而成为亟待解决的课题［2、3］。

蒙药吉如很－新2号复方 (简称新2号)是目前治疗心血管病的蒙药中疗效较好的典型方药，是国医大师苏荣扎布教授在50多年的治疗心血管病的临床实践中创造出来的验方，由广枣、阿魏、沉香、野牦牛心、肉豆蔻、丁香、藏红花、白云香、牛黄等16味药组成，对一些心血管病包括CHD有独特、显著的疗效，且绿色、安全、廉价，很有推广应用价值。但目前尚未对新2号治疗缺血性心脏病包括CHD的药理作用及其机理，药效物质基础 (有效成分)等进行现代科学研究和阐释，从而严重影响着科学地推广应用新2号治疗CHD及以新2号为基础研发更有效、安全的治疗CHD的新药。

前期研究表明，在缺血性心脏病的大鼠模型上，新2号复方通过改善心电图S－T段、T波改变，明显升高已降低的血清一氧化氮 (nitric oxide，NO)浓度，明显降低已升高的血清乳酸脱氢酶 (LDH)、肌酸激酶 (CK)含量等药理作用，有明显保护缺血引起的心肌损害和心功能的作用。本研究为了进一步探讨新2号复方中各组分对治疗缺血性心脏病的药效，进一步阐明新2号复方中的“主药”和“佐药”，在新2号基础上研发有更好疗效、安全的新蒙药甚至多靶型分子配方创新药提供线索和依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组 健康SD大鼠 (SPF级)，体重200±20g，70只，由北京维通利华实验动物中心提供。分别雌雄各半，饲养环境为清洁级，随机分为10组，即给药组:新2号复方组、白云香组、兔心组、紫硇砂组、阿魏组、木香组、白澶香组、栀子组，正常组和模型组。

1.2 实验仪器 Sapphi re 600全自动生化分析仪 (爱尔兰)，TU－1901紫外分光光度计 (北京)，GBV2258－90离心机 (河北)，JA503电子天平 (上海)，HH－601超级恒温水浴锅 (江苏)，毛吸细管，BL－420S生物机能实验系统，大鼠灌胃器。

1.3 药品及试剂 冰片、地丁、栀子、白澶香、黄伯、木棉花、兔心、白云香、紫硇砂、阿魏、木香、栀子 (呼和浩特药品公司提供)，蒙药新2号 (批号:980446，内蒙古民族大学附属医院提供)，0.9%生理盐水 (批号:101101，安微双鹤药业有限责任公司制)，一氧化氮试剂 (批号:32516181016，南京建成科技有限公司提供)。

1.4 实验方法

1.4.1 造模方法 寒凉性蒙药冰片、栀子、地丁、木棉花、白檀香、黄柏等按 1.5∶1.5∶1∶2.5∶1.5∶1 比率取出。然后粉碎成粉末，过100目筛。在60度的恒温水浴锅上制成30mg/ml的水煎剂［4］。除了正常组以外每组60mg/200g，每日2次/鼠，灌胃给药4周 (分别早上9点和下午四点)，同时采用控食、惊劳等 (时间不固定)综合方法建立心“气虚”型心刺痛SD大鼠模型。

1.4.2 空食方法 通过观察，正常组每天30g/每只，实验组15g/每只。

1.4.3 惊劳方法 实验组大鼠每天固定时间游泳下沉10分钟，以最大限度的耗竭动物的体能。游泳标准为动作明显失调、慌张，鼻部在水面上下游动10分钟。同时采用不同时间段惊吓的方法［5］。

1.4.4 给药方法 兔心组、白澶香组、白云香组、紫硇砂组、栀子组、木香组、阿魏组从第五周开始按体重比率分别 0.005g/200g、 0.004g/200g、 0.002g/200g、 0.002g/200g、0.002g/200g、0.003g/200g、0.7mg/200g量每天 (上午10点和下午五点)给药两次，持续两周。正常组给予等量的0.9%生理盐水，其它组模型药不能间断，跟原来一样照常给。

1.5 观察指标

1.5.1 心电图 分别是实验开始后的第四周和第六周，用少量乙醚把大鼠麻醉后，仰卧位固定，将针状电极插入四肢皮下，分别记录20S、40S、60SⅡ导联心电图。并观察T波高度、S－T段位移和心率变化，并比较心电图变化差异［6］。结果均以均数±标准差 (±s)表示。

1.5.2 血清一氧化氮含量 实验开始后的第四周和第六周，给药完空腹12小时后眼眶取血3－5ml血液放入塑料管中静置2－3h，待血凝后以3500 r/min离心10min，分离血清0.1ml，放入离心管中，置于零下80度冰箱贮藏备用。采用分光光度计比色法检测NO含量。严格按照试剂盒说明的操作程序测定大鼠血清NO。

1.5.3 乳酸脱氢酶和肌酸激酶 实验开始后的第4周和6周，给药完空腹12小时后眼眶取血3－5ml血液放入塑料管中静置2－3h，待血凝后以3500r/min离心10min，分离血清0.1ml，放入离心管中，置于零下80度冰箱储藏备用。

1.6 统计方法学 采用SPSS1.5统计学分析，数据均以均数±标准差 (±s)表示，两组间使用t检验方法，多组间使用F检验方法。P＜0.05为具有统计学意义。

2 实验结果

2.1 心“气虚”型心肌缺血大鼠模型的建立 按上述方法制作心“气虚”型心肌缺血大鼠模型，第四周造模成功，主要依据为:模型大鼠心电图T波、ST段改变、心率减慢，血清NO明显降低，血清LDH、CK明显升高，模型组上述检测指标第一周与第四周比较差异有高度统计学意义 (P＜0.01)，说明造模成功并稳定，模型组上述检测指标第四周与第六周比较差异无统计学意义 (P＞0.05)结果见表1。

表1 心“气虚”型心肌缺血大鼠模型建立指标结果

2.2 新2号组分对心“气虚”型心肌缺血大鼠心电图改变的影响 在上述模型的基础上，第四周对给药组动物给药后，第6周检测各项指标均有明显改善心“气虚”型心肌缺血引起的心电图S－T段位移的作用。在第六周，模型组与正常组比较在心电图T波、ST段改变、心率减慢 (P＜0.01)，给药组与模型组的比较新2号组、阿魏组、兔心组、白云香组、木香组心电图T波、ST段位移差异有高度统计学意义 (P＜0.01)。组分组与新2号组比较白澶香组与白云香组心电图S－T段位移有高度统计学意义 (P＜0.01)。经七个新2号组分组俩俩之间比较，阿魏组、云香组、兔心组、木香组之间差异无统计学意义 (P＞0.05)，均有减少心“气虚”型心肌缺血引起的ST段位移的作用。结果见表2。

表2 新2号组分对心“气虚”型心肌缺血大鼠心电图改变的影响 (n=7，±s)

表2 新2号组分对心“气虚”型心肌缺血大鼠心电图改变的影响 (n=7，±s)

注:与模型组比较*P＜0.05，＊＊P＜0.01;与正常组比较●P＜0.05，●●P＜0.01;与新 2号组比较★P＜0.05，★★P＜0.01。下同。

组别 T波 ST波321±51.11兔心 0.103±0.032＊＊ 0.171±0.0421★＊ 318±46.9白澶香 0.172±.0.059●●★★ 0.187±0.041 288±11.40●●紫硇砂 0.135±0.046●● 0.195±0.068★ 295.±11.30●栀子 0.179±0.059●●★ 0.208±0.064●★ 285±13.82●●白云香 0.143 ±0.022●●＊＊★★ 0.158 ±0.033＊＊★ 296 ±8.85●●木香 0.140±0.022●●＊＊ 0.147±0.027＊＊ 296±7.95●●模型 0.190±0.033●● 0.211±0.024●● 287±14.7●●新2号 0.1065±0.016＊＊ 0.1268±0.010＊＊ 322.2±3.6＊＊正常组 0.0804±0.015＊＊ 0.1362±0.058＊＊ 317.9±18.9心率阿魏 0.111±0.084●●＊＊ 0.136±0.016＊＊＊＊

表3 新2号组分对心气虚型心肌缺血大鼠血清NO含量的影响 (n=7，±s)

表3 新2号组分对心气虚型心肌缺血大鼠血清NO含量的影响 (n=7，±s)

注:同上。

组别 第六周血清NO(umol/L)阿魏 35.55±11.20＊＊★★●●兔心 63.28±7.98＊＊●●白澶香 40.23±11.01★★●●紫硇砂 37.11±10.75★★●●栀子 39.07±10.70★★●●白云香 43.96±9.06★★●●木香 38.67±10.15★★●●模型 40.59±10.17●●新2号 71.53±27.34＊＊正常组 74..61±10.62

2.3 新2号组分对心“气虚”型心肌缺血大鼠血清一氧化氮含量的影响 在上述模型的基础上，第四周对给药组动物给药后，第六周检测血清NO指标，模型组与正常组比较差异有高度统计学意义 (P＜0.01)，给药组与模型组比较兔心组与新2号组差异有高度统计学意义 (P＜0.01)，七个组分组跟新2号组比较跟兔心组之间的差异无统计学意义 (P＞0.05)。经七个组分组俩俩比较，兔心组改善心“气虚”型心肌缺血引起的血清NO降低的作用。结果见表3。

2.4 新2号组分对心“气虚“型心肌缺血大鼠血清乳酸脱氢酶和肌酸激酶含量的影响 在上述模型的基础上，第四周对给药组动物给药后，第六周检测各项指标，正常组与模型组比较血清LDH、CK含量有高度统计学意义 (P＜0.01)。给药组与模型组比较兔心组与新2号组差异有高度统计学意义 (P＜0.01)，七个组分组跟新2号复方组 (简称新2号组)比较跟兔心组之间的差异无统计学意义 (P＞0.05)。经七个组分组俩俩比较，兔心组改善心“气虚”型心肌缺血引起的血清LDH、CK含量升高的作用。结果见表4。

表4 新2号组分对心气虚型心肌缺血大鼠血清LDH和CK含量的影响 (n=7，±s)

表4 新2号组分对心气虚型心肌缺血大鼠血清LDH和CK含量的影响 (n=7，±s)

注:同上。

第六周组别 LDH(U/L) CK(U/L)阿魏 1003.6±19.01●●★★ 910.0±7.48●●★★兔心 963.6±10.69＊＊●●★ 661.9±16.10●●＊＊★白澶香 1001.9±9.69●●★★ 920.9±12.10●●★★栀子 1020.9 ±9.69●●★★ 914.6±9.09●●★★紫硇砂 1014.7±9.83●●★★ 924.6±11.47●●★★白云香 1001.6±7.93●●★★ 908.3±6.80●●★★木香 1008.4 ±12.23●●★★ 916.1±9.44●●★★模型 1019.9±66.94●●★★ 924.43±13.00●●＊＊正常组 923.6±16.98 636.0±10.47新2号 947.6±15.23●●＊＊ 637.7±16.00●●＊＊

3 讨论

蒙医学认为冠心病心绞痛属蒙医“心刺痛” (吉如很－哈特拉嘎)之范畴，以冠心病中的稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛、心肌梗死可归入心刺痛各型。 《四部医典》［7］、《哲对宁诺尔》［8］将心刺痛分为赫依性 (或心气虚型)心刺痛、齐素性心刺痛。《蒙医内科学》［9］分为赫依偏盛型、齐素偏盛型、黏性心刺痛3种。

为了明确新2号复方的“主药”和“佐药”，以蒙医药与现代科学技术结合的思路与方法，用寒凉性蒙药冰片、栀子、地丁、木棉花、白檀香、黄柏等制成的水煎剂灌胃大鼠与控食、惊劳大鼠等结合的综合方法建立心“气虚”型心刺痛模型，用新－2号复方的组分单味药进行干预并观察了药理作用。蒙药方剂一般有主 (君药)、辅药 (臣药)、佐药、使药等四部分组成。主药是指对某种疾病或病变部位起到重要治疗作用的方剂组份药物;臣药是指协同君药增强其功效，对主症和其他症状有治疗作用的方剂组分药物;佐药是指具有协同君药治疗附加症作用的方剂组分药物;使药是指对君、臣药间起到桥梁作用且协调方剂各组分的药物，它可减少剧毒药物的毒性，缓和其烈性［12］。结果新－2号复方的组分阿魏、白檀香、紫硇砂、白云香、木香均有改善心“气虚”型心肌缺血引起的S－T段位移的作用;新－2号组分兔心明显心电图T波、ST段改变、心率减慢，明显升高已降低的血清NO，明显降低已升高的血清LDH、CK含量。上述新－2号组分对心“气虚”型心肌缺血有一定的治疗作用，其中兔心的作用优于上述其他组分，阿魏虽然入药量小，但心电图效果明显，有待进一步研究。蒙医药学认为:兔心有镇赫依，镇静，止痛等功效。为诸药先导，用于治疗气喘，心刺痛，心闷、心神不安、失眠、心悸等症。阿魏可抑赫依 (理气)，祛巴达干 (化痰)，调胃火，消食开胃，杀虫，止痛。主治赫依(气滞)引起的呵欠频作，寒栗，腰膝关节疼痛，游走性疼痛，干呕，心悸，心慌意乱，头晕耳鸣，失眠，心脏赫依病，肝脏赫依病，头赫依病及头虫病等。 《无误蒙药鉴》载:“驱虫，治寒性病，心脏赫依病”［13］。白澶香具有清搏热、滋养、止痛的作用，主治心肺搏热、炽热、疫热等症。紫硇砂温中，祛巴达干赫依，润肠通便，解痉，止痛。主治赫依 (气滞)，刺痛。白云香祛黄水消肿、止痛、治疮伤等功效。木香有祛巴达干、调依血相搏、活血化瘀、调和体素、止痛、化痰等功效。本研究对新－2号的推广应用及研发新药提供了一些科学依据。

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