白少伟 徐 媛 庞文生 胡 娟

福建中医药大学药学院，福建 福州 350122

以药食两用、保健中药为原料研制保健食品，配方中原料药的主要成分包括皂苷和多糖等多种化合物，多糖不仅是一类非特异性免疫增强剂而且有降血糖、降血脂、降血清过氧化脂质和降低胆固醇浓度、抗血凝、抗癌等作用［1］。总多糖通常作为增强免疫力、抗疲劳的功能性指标成分［2］。本文利用多糖溶于水，不溶于醇的特点，将样品中多糖经乙醇沉淀分离后，以D－葡萄糖为标准，通过苯酚－硫酸法测定其含量［3］。

1 仪器与试剂

UV－1800紫外可见分光光度计 (上海美谱达仪器有限公司)，数显恒温水浴锅，台式离心机。D－无水葡萄糖(中国药品生物制品鉴定所)，浓硫酸、苯酚、无水乙醇等试剂均为分析纯;水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 试样处理 精密吸取5.0ml样品于50ml离心管中，加适量无水乙醇，混匀，使样品中乙醇的终浓度为90%，4℃静置1h，于4000r/min离心10min，弃去上清液。这样分多次收集沉淀。沉淀物用适量乙醇洗涤至无色。以4000r/min离心10min，弃去上清液，沉淀加热除去乙醇，用水溶解，定容于100ml容量瓶中，摇匀，作为供试溶液。

2.2 标准曲线的制备 精密称取干燥恒重的无水葡萄糖对照品10mg，加水溶解，定容到10ml，得1.0mg/ml的葡萄糖对照品贮备液。精密吸取对照品贮备液0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.8ml，置10ml具塞试管中，分别向各管内加水使至体积为2.0ml，再依次向各试管加5%苯酚溶液1.0ml，摇匀，依次迅速加入浓硫酸5.0ml，摇匀;以水作为空白，于分光光度计490nm波长处测定吸光度，以葡萄糖浓度(mg/ml)为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。回归方程y=0.0209x+0.0199，r=0.9991。

2.3 样品测定 精密吸取供试溶液2.0ml，置于具塞试管中，按“2.2项”方法测定吸光度，计算供试溶液浓度。

2.4 计算

式中X－样品中总多糖含量以无水葡萄糖计，g/100ml;C－由回归方程计算得供试溶液浓度，mg/ml;V－供试溶液定容体积，ml;M－样品取样体积，ml。

表1 多糖含量测定结果

3 讨论

3.1 文献表明蛋白质对多糖的测定影响并不大，而增加去蛋白步骤会造成多糖的进一步损失。因此，本方法建立中未考虑去蛋白步骤［4］。

3.2 醇沉的提取方法和以苯酚－硫酸显色的含量测定方法，操作简便易行，检测数据真实、可靠，可作为该配方质量的检测方法。

［1］Wensheng Pang，Siding Lin，Juan Hu．Antitussive Activity of Pseudostellaria heterophylla Pax Extracts and Improvement in Lung Function via Adjustment of Multicytokine Levels［J］．Molecules 2011，16(11):3360－3370．

［2］于村．保健食品中多糖测定的研究［J］．中国卫生检验杂志，2000，10(3):281－282．

［3］邬卫东，张晓文．硫酸－苯酚法测定枸杞胶囊中多糖的含量［J］．内蒙古中医药，2003，22(6):39－39．

［4］赵宁，问亚琴，潘秋红．苯酚－硫酸法测定干红葡萄酒中的多糖含量［J］．中外葡萄与葡萄酒，2011，35(5):9－12．