HPLC法测定香砂养胃丸中橙皮苷的含量

2014-07-09朱艳红

中国民族民间医药 2014年7期

孟和朱艳红

内蒙古通辽市食品药品检验所，内蒙古通辽 028000

香砂养胃丸为《中国药典》2010年版一部收载的品种，由木香、砂仁、白术、陈皮、茯苓、半夏、醋香附、枳实、豆蔻、姜厚朴、广藿香、甘草等十二味药材组成的复方制剂。具有温中和胃功效。主要用于胃阳不足，湿阻气滞所致的胃痛、痞满，症见胃痛隐隐、脘闷不舒、呕吐酸水、嘈杂不适、不思饮食、四肢倦怠。其中陈皮、枳实具有理气健脾，燥湿化痰;破气消积、化痰散痞的功效［1］，对本处方的临床疗效有重要作用。《中国药典》2010年版一部未对香砂养胃丸中的陈皮和枳实进行含量测定。以陈皮和枳实中的主要有效成分橙皮苷为定量指标可有效控制产品质量，本文参考有关文献［1－3］，采用HPLC法测定其中橙皮苷的含量，现将结果报告如下。

1 仪器和试药

岛津LC－10AT高效液相色谱仪 (由 SPD－M10A VP型检测器，CTO－2A柱温箱、SIL－HTA自动进样器、CLASS－VP色谱工作站组成)。

橙皮苷对照品 (中国食品药品检定院提供，供含量测定用批号:110721－201115。含量95.3%)。香砂养胃丸(包头中药有限责任公司;批号:1212202，1212204，1212205)。甲醇为色谱纯，水为高纯水。

2 方法和结果

2.1 色谱条件色谱柱:采用 Agilent TC－C18 5μm，4.6μm×250mm柱。流动相为甲醇－水 (60∶40)，检测波长为284nm，柱温:30℃，流速为1.0ml·min－1，进样量:10μl，理论板数:橙皮苷峰计算不得低于2000。分离度大于1.5，符合规定。橙皮苷的保留时间14.3min左右。阴性对照色谱在14.3min处无干扰峰。见图1。

2.2 对照品溶液的制备精密称取橙皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.47757mg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备取香砂养胃丸，研细，取粉末0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，密塞，超声 (功率:250W，频率:50kHz)处理40分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，虑过，取续滤液，即得。

2.4 阴性对照溶液的制备按处方比例并以相同工艺制备缺陈皮和枳实的阴性样品，并按供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。

2.5 线性关系考察精密称取橙皮苷对照品 (含量95.3%)0.02088g，置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。再精密量取上述溶液3ml置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液(0.04776mg·ml－1)，精密吸取对照品溶液2，4，8，10，15，20μl注入色谱仪中，记录色谱图，以对照品的进样量(μg)为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程:Y=1.15×106X－52002.3 r=099999结果表明橙皮苷在0.09551～0.95513μg范围内呈良好的线性关系。

2.6 精密度试验取同一批号 (1212204)香砂养胃丸供试品溶液，连续进样6次，测定橙皮苷色谱峰面积，平均面积为519978，RSD为0.6%。

2.7 重复性试验取同一批号 (1212204)香砂养胃丸供试品溶液6份，进行测定含量，结果橙皮苷的平均含量为11.55mg·g－1，RSD为0.5%。表明本试验重复性良好。

2.8 稳定性试验取同一批号 (1212204)香砂养胃丸供试品溶液，分别于第0，2，5，10，15，24h进样测定，记录峰面积，结果峰面积的RSD为1.1%。表明供试品溶液在24h内稳定。

2.9 回收率试验取已知含量的样品 (批号:1212204，含量11.55mg·g－1:)6份，每份约0.1g，精密称定，分别精密加入橙皮苷对照品适量，按供试品溶液制备方法测定含量，并计算回收率。结果见表1。