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桔梗元参汤治疗过敏性鼻炎实验研究

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目的研究桔梗元参汤对过敏性鼻炎的治疗作用及作用机制。方法建立卵蛋白致小鼠过敏性鼻炎模型，通过观察过敏性鼻炎小鼠行为学、血液、嗜酸性粒细胞、IgE及分泌淋巴细胞因子含量，确定桔梗元参汤的治疗作用及作用机制。结果对过敏性鼻炎小鼠连续用药 21d，桔梗元参汤组症状好转率＞90%，鼻黏膜嗜酸性粒细胞增多，IgE抗体水平降低，ELISA实验结果示桔梗元参汤能够使OVA小鼠Th1淋巴细胞因子（IF-γ和IL-2）含量明显升高，使Th2淋巴因子（IL-4和IL-10）含量显著降低。结论桔梗元参汤对过敏性小鼠能够通过纠正Th1/Th2平衡失调，抑制IgE水平发挥其治疗过敏性鼻炎的作用。

桔梗元参汤；过敏性鼻炎；IgE；Th1/Th2

桔梗元参汤是清朝名医黄元御《四圣心源》中的名方，主要成分包括桔梗、元参、杏仁、橘皮、半夏、茯苓、甘草、生姜，具有宣肺平喘，和胃降逆的功效[1]。本研究通过建立卵蛋白致小鼠过敏性鼻炎模型，探讨桔梗元参汤对过敏性鼻炎的治疗作用及机制。

1 材料

1.1 动物清洁级7周龄BALB/c小鼠60只，雌性，体重20～25g。

1.2 药物与制剂取桔梗、元参、杏仁、橘皮、半夏、茯苓、甘草、生姜，加水煎煮3次，合并滤液，制成冻干粉于-80℃条件下储存。

2 方法

2.1 桔梗元参汤对卵蛋白致小鼠过敏性鼻炎的治疗作用

2.1.1 建立小鼠过敏性鼻炎模型采用 OVA混悬液腹腔注射及滴鼻造模法，参照文献并改进[2]。将60只小鼠随机分为六组，分别为对照组、模型组、阳性对照组、桔梗元参汤高、中、低剂量组。除OVA过敏性鼻炎模型制备外，其它各组在均于小鼠初次致敏第21天开始灌胃给药，每日1次，连续治疗21 d。

2.1.2 行为学观察观察小鼠喷嚏、抓搔、流涕。每7天观察一次，用积分迭加法评分[3]。

2.1.3 嗜酸性粒细胞含量检测通过检测各组小鼠血液血细胞，以确定桔梗元参汤对血液嗜酸性粒细胞的影响。

2.1.4 IgE抗体水平变化体内IgE水平增高是过敏性鼻炎的典型特征[4]。采用 ELISA法检测血清OVA特异性IgE，于酶标仪490nm处测量OD值。

2.1.5 分泌淋巴细胞因子功能检测眼球摘除法收集外周血，37℃静置30min，收集血清，采用ELISA检测试剂盒测定血清中 IL-4、IL-10、IFN-γ、IL-2浓度。

3 结果

3.1 桔梗元参汤显著改善小鼠过敏性鼻炎症状连续用药21d后，桔梗元参汤低、中、高剂量组均鼻炎症状均有改善，以中剂量组效果最佳，好转率在70%以上，确定桔梗元参汤中剂量组作用14d为最佳治疗浓度和时间（见图1和图2）。

图1 桔梗元参汤对OVA致小鼠过敏性鼻炎症状的影响

图2 过敏性鼻炎小鼠鼻炎症状组间好转率比较

3.2 桔梗元参汤对嗜酸性粒细胞影响实验结果显示，桔梗元参汤作用14天后能够显著降低过敏性鼻炎小鼠外周血EOS百分含量及绝对值（见表1）。

表1 外周血EOS百分比及EOS计数

3.3 sIgE抗体水平变化桔梗元参汤能够通过降低小鼠体内sIgE含量发挥其治疗作用（见图3）。

3.4 小鼠血清Th1/Th2细胞因子水平变化桔梗元参汤显著升高Th1淋巴细胞因子，降低Th2淋巴细胞因子，通过纠正Th1/Th2平衡失调发挥其治疗作用（见表2）。

图3 小鼠血清sIgE (OD值)

表2 小鼠血清Th1/Th2细胞因子含量(ng•L-1)

4 讨论

过敏性鼻炎属于中医学“鼻鼽”、“鼽嚏”的范畴。鼻黏膜嗜酸性粒细胞（EOS）浸润和 Th1/Th2平衡失调是过敏性鼻炎的重要病理学特征。西医治疗过敏性鼻炎以免疫疗法和药物治疗为主，均存在不足。因此，寻找天然、高效、低毒的药物为目前研究的热点。

本实验通过桔梗元参汤对过敏性鼻炎小鼠模型治疗作用研究表明，桔梗元参汤能够显著改善过敏性鼻炎小鼠的症状，使其血清sIgE水平降低，鼻黏膜EOS浸润减轻，并显著升高Th1（IF-γ、IL-2）淋巴细胞因子，降低Th2（IL-4、IL-10）淋巴细胞因子。提示桔梗元参汤能够通过调节机体免疫反应，纠正 Th1/Th2平衡失调发挥治疗过敏性鼻炎的作用，具有非常好的临床应用前景。

[1] 孙洽熙,黄元御医学全书·四圣心源[M].2版.北京：中国中医药出版社,2009：848.

[2] JunejaL, HS Parmar. Ovalbumin induced allergic rhinitis and development of prediabetes to rats： possible role of th2 cytokines[J]. Inflamm Allergy Drug Targets, 2013,12(3)：199-205.

[3] Shin JH, SW Kim, YS Park. Role of NOD1-mediated signals in a mouse model of allergic rhinitis[J]. Otolaryngol Head Neck Surg, 2013,147(6)：1020-1026.

[4] Nishimura T. Existence of antigen-specific immunoglobulin E is not sufficient for allergic nasal eosinophil infiltration in mice[J]. Int Arch Allergy Immunol, 2013,161(2)：125-128.

R242

A

1673-5846(2013)07-0294-02

山东万杰医学院医学系，山东淄博 255213