袁 霞，邱少红，余 蓉

(石首市人民医院检验科， 湖北 石首 434400)

新型隐球菌血液感染1例

袁 霞，邱少红，余 蓉

(石首市人民医院检验科， 湖北 石首 434400)

目的：探讨新型隐球菌感染的检验学诊断。方法：革兰氏染色镜检，观察形态、染色特点并行墨汁负染色，生化反应进一步证实。结果：35℃ 24h形成典型湿润的、黏液样、不透明的白色至奶油色菌落,1周后转淡黄或棕黄，湿润黏稠，状似胶汁。取菌落涂片革兰染色，为圆形和卵圆形，菌体直径一般在2～15um，大者直径可达20um，革兰染色阳性。墨汁负染色：取菌落涂片与1滴墨汁混合，加盖玻片后镜检，可见圆周形或者卵圆形芽生孢子，但无真、假菌丝。菌体外有宽厚荚膜，荚膜比菌体大1～3倍，可见圆形菌体，外绕有一宽阔的空白带(荚膜)。生化反应商品API20C AUX板条 (梅里埃) 鉴定，推荐性鉴定结果：新生隐球酵母菌鉴定百分率99.9%，典型指数0.84。结论：新型隐球菌侵犯人体以中枢神经系统最易受累，并常在脑室及大脑导水管周围的灰质处呈占位性病变。确诊要靠病原学证据，脑脊液墨汁染色或培养找到隐球菌，多次检查后可提高阳性率。

新型隐球菌； 墨汁负染色

新型隐球菌(Crytococcus Neofonmans )又名溶组织酵母菌(Torula Histolytica )，广泛分布于自然界，是土壤、鸽类、牛乳、水果等的腐生菌，尤以鸽粪中含量较多，也存在于正常人体体表、口腔、肠道，可侵犯人和动物，近年来由于诱使免疫功能低下的因素增多,其发病率有所上升。该病是真菌性疾病中较严重的一种,其死亡率占18%～30%。因此,新型隐球菌的研究越来越受到人们的重视。我院于2011年收治1例患者，经过血培养、形态分析、生化分析诊断为新型隐球菌感染。现报道如下。

1 病 例

1.1一般资料

患者男，45岁。2011年11月19日因咳嗽伴发热半月来我院就诊，临床表现咳嗽，有时咳少许白粘痰，偶痰中带血，2个月前确诊患AIDS ，服用抗病毒药物1个月。体温38.6℃，脉搏106次/min，呼吸20次/min，血压120/65mmHg。神清，青色面，皮肤可见散在小红丘疹，疱疹，部分脓苔。双肺呼吸音稍粗，均未闻及啰音，心律齐，无杂音，腹部平软，无压痛。胸部CT：右肺感染性病变，并空洞形成，纵膈及腋窝淋巴结肿大。

1.2实验室检查

①血常规：WBC 1.33×109/L ，RBC 2.73×1012/L，HGB 87g/L。②TBAb阳性，痰涂片抗酸染色镜检，未找到抗酸杆菌。肺炎支原体抗体阴性，肺炎衣原体抗体阴性，血沉53mm/h，甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒抗体阴性，肥大反应试验阴性。

1.3微生物学检验

血培养48h有细菌生长，直接涂片革兰染色阳性。接种哥伦比亚血琼脂、巧克力琼脂、沙保罗培养基，放置35℃含5%的二氧化碳培养箱培养，SDA培养基放35℃培养箱培养。35℃ 24h形成典型湿润的、黏液样、不透明的白色至奶油色菌落,1周后转淡黄或棕黄，湿润黏稠，状似胶汁。

图1 革兰染色 (×100) 图2 墨汁负染色(×40)

取菌落涂片革兰染色，为圆形和卵圆形，菌体直径一般在2～15μm，大者直径可达20μm，革兰染色阳性,见图1。墨汁负染色：取菌落涂片与1滴墨汁混合，加盖玻片后镜检，可见圆周形或者卵圆形芽生孢子，但无真、假菌丝。菌体外有宽厚荚膜，荚膜是菌体的1～3倍，可见圆形菌体，外绕有一宽阔的空白带(荚膜)，见图2。

1.4生化反应

脲酶试验阳性、氧化酶试验阳性、硝酸盐还原试验阴性，可使石蕊牛乳碱化，可同化葡萄糖、麦芽糖、果糖、甘露醇、蔗糖、肌醇，不同化乳糖，不发酵葡萄糖、麦芽糖、乳糖，不能利用硝酸钾。商品API20C AUX板条 (梅里埃) 鉴定(见表1)。

表1 API20C AUX生化试验

推荐性鉴定结果 ：新生隐球酵母菌鉴定百分率99.9%，典型指数0.84。

2 讨 论

新型隐球菌侵犯人体以中枢神经系统最易受累，并常在脑室及大脑导水管周围的灰质处呈占位性病变[1]。确诊要靠病原学证据，脑脊液墨汁染色或培养找到隐球菌，多次检查后可提高阳性率。新型隐球菌一般为外源性感染，但也可致内源性感染，对人类而言，它通常是条件致病菌。该病的发生与宿主的免疫状况、隐球菌菌株的毒力等有关。机体感染途径以吸入空气中的孢子为主，隐球菌孢子到达肺部，可引起肺部感染，但常为无症状感染，此时隐球菌可被机体清除，也可能隐藏在肉芽肿中。根据机体的免疫状况，由肺经血液播散时可侵犯所有脏器组织，主要侵犯肺、脑及脑膜，引起慢性脑膜炎，也可侵犯皮肤、骨、关节和心脏等部位。该病好发于细胞免疫功能低下者，如艾滋病(AIDS)、糖尿病、恶性肿瘤患者、器官移植及大剂量使用糖皮质激素者。临床最常见的为亚急性或慢性脑膜炎，肺部感染其症状类似肺结核,应用墨汁染色可以帮助鉴别诊断。一般临床上比较重视从CSF标本中查找新型隐球菌，从血液中发现者较少。本例从血培养中发现新型隐球菌也是因药敏实验对所有青霉素类甚至万古霉素均耐药，才考虑到是否为真菌感染，于是重新进行革兰氏染色镜检，并行墨汁负染色，无论从形态、染色特点、生化特性还是临床表现，结合此病人是确诊AIDS患者，都符合新型隐球菌感染的诊断。本病一经确诊，需立即抗真菌治疗，用药途径和疗程需要个体化，联合用药具有明显的治疗效果。目前在临床上二性霉素B使用较多，也是药效最好的抗真菌类药物。它能选择性地与真菌细胞膜上的麦角甾醇发生作用，增加细胞膜的通透性，使菌体内物质向外渗出，最终造成真菌死亡。停药指征为临床症状及体征基本消失、脑脊液常规检查正常、每周1次墨汁染色找隐球菌连续3～4周阴性。对于部分颅内压增高患者可采用甘露醇及呋塞米降颅压，严重脑积水患者可行脑脊液分流术，并加强营养支持[2]。

[1]张利成，林亚明.新型隐球菌性脑膜炎的诊治进展[J].云南医药，2009,30(6)：683-687.

[2]张齐龙.持续腰池脑脊液引流治疗隐球菌性脑膜炎的临床探讨[J].第四军医大学学报,2005,26(13):1247-1248.

[编辑] 何 勇

10.3969/j.issn.1673-1409(R).2012.11.030

2012-06-26

袁霞(1977-)，女，湖北石首人，主管技师，主要从事临床检验工作。

R379.5;R446.5

A

1673-1409(2012)11-R062-02