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尿素试剂对葡萄糖测定有携带污染

2011-04-13付柳平

实验与检验医学 2011年6期
关键词:缓冲液分析仪江西

付柳平

(刘公庙镇卫生院,江西 樟树 331212)

笔者使用TC6060全自动生化分析仪检测同一标本的肾功能常规和葡萄糖的过程中,发现尿素试剂对葡萄糖测定有携带污染,当改变测定项目的分析顺序,可有效避免尿素试剂对葡萄糖测定带来的携带污染。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 仪器 TC6060全自动生化分析仪,江西特康科技有限公司生产。

1.2 试剂

1.2.1 尿素试剂 江西特康科技有限公司生产。单液体试剂,为酶联速率法。试剂组成:Tris缓冲液115mmol/L,谷氨酸脱氢酶>800U/L,NADH0.35mmol/L,二磷酸腺苷1.5mmol/L,α-酮戊二酸7.5mmol/L,尿素酶>40000U/L,非反应性填充物及稳定剂适量。

1.2.2 葡萄糖试剂 江西特康科技有限公司生产。双液体试剂,为GOD-POD法。试剂组成Ⅰ:磷酸盐缓冲液110mmol/L,葡萄糖氧化酶250U/L,4-羟基苯甲酸10mmol/L,4-氨基安替比林0.3mmol/L。试剂Ⅱ:磷酸盐缓冲液110mmol/L,过氧化物酶250U/L,非反应性填充物及稳定剂适量。

1.2.3 葡萄糖标准液 江西特康科技有限公司生产。批号:542716443,靶值:5.05mmol/L。

1.3 方法

1.3.1 葡萄糖测定参数 方法:终点法;温度:37℃;波长:510nm;样本用量;4.0μl;试剂Ⅰ用量:240μl,反应时间:120s;试剂Ⅱ用量:60μl,反应时间:400s;检测点数:3。

1.3.2 尿素测定参数 检测方法:两点法;温度:37℃;主波长:340nm;样本用量:3.0μl;试剂用量:300μl;反应时间:60s;检测点数:15。

2 结果

2.1 取葡萄糖标准液,单独测定GLU10次,测得其均值为4.92mmol/L。

2.2 用尿素试剂当作病人标本,测定葡萄糖10次,测得其均值为22.83mmol/L。

2.3 携带污染试验 按先测定尿素,再测定葡萄糖的分析程序,测定葡萄糖10次,测得其均值为9.20mmol/L,平均偏差值为:9.20-4.92=4.28,偏差率为:4.28/4.92=87%。

2.4 改变项目分析顺序,具体为:由原来尿素→葡萄糖,改变为尿素→总胆固醇→葡萄糖。用多份混合血清单独测定葡萄糖10次,测得其均值为5.47mmol/L,然后按上述改变后的分析顺序测定葡萄糖10次,测得其均值为5.56mmol/L,平均偏差率为:(5.56~5.47)/5.47=1.65%。实验表明:通过改变项目分析顺序,可以避免尿素试剂对葡萄糖测定带来的携带污染。

3 讨论

任何品牌的全自动生化分析仪的自净率都是有限的[1],检测试剂排序不当就会出现不可逆转的误差[2],直接影响检测结果的可靠性[3],很容易给临床造成无效数据,影响临床诊疗水平。尿素试剂对葡萄糖测定有携带污染,通过用尿素试剂当作病人标本进行葡萄糖测定,其均值高达22.83mmol/L,而尿素试剂作为标本分别与葡萄糖试剂Ⅰ,Ⅱ进行葡萄糖测定,二者测定值均几乎为零。具体原因,江西特康科技有限公司的工程师确认为尿素试剂成分中的葡萄糖直接参加了葡萄糖氧化酶—过氧化物酶的反应。因此我们在工作过程中,既要有敏锐的观察力,又要对所用试剂的成分有足够了解,设计最佳的项目分析顺序,防止试剂针的携带污染。

[1]郭 杰.全自动生化分析仪的精密度和交叉污染率的评价[J].现代检验医学杂志,2004,19(2):140-142.

[2]韩来新.总胆固醇试剂对总胆汁酸测定有携带误差[J].现代检验医学杂志,2004,19(1):51-53.

[3]郑家齐.编.医学检验质量控制[M].第1版,北京:人民卫生出版社,1997:269-271.

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