王红宁

宫颈癌患者外周血T淋巴细胞及NK细胞检测的临床意义

王红宁

目的探讨宫颈癌患者外周血T淋巴细胞及NK细胞的检测的临床意义。方法2009年1月至2011年1月收治的宫颈癌患者214例，选取同期进行健康体检200例(体检组)，进行外周血T淋巴细胞及NK细胞检测并比较。结果宫颈癌组与体检组比较P＜0.01差异有统计学意义。宫颈癌组Ⅰ期、Ⅲ期与Ⅲ期、IV期比较P＜0.05差异有统计学意义。结论外周血T淋巴细胞及NK细胞的检测对宫颈癌患者恶性程度、患者的预后有着良好的指导作用，外周血细胞免疫功能越低下，肿瘤分级越严重。

宫颈癌;外周血T淋巴细胞;NK细胞检测;临床意义

T细胞亚群是反映细胞免疫功能的重要指标之一，肿瘤的发生、发展及预后与机体的免疫功能，特别是与T淋巴细胞功能有密切的关系，在肿瘤免疫监测中起着重要的作用［1］。而肿瘤患者以T细胞介导的细胞免疫存在不同程度的紊乱与缺陷。宫颈癌是女性最常见的生殖道恶性肿瘤之一，严重威胁妇女的健康，近年来其发病率有明显上升趋势，我们对宫颈癌患者外周血T淋巴细胞及NK细胞进行检测，了解其临床意义，具体汇报如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2009年1月至2011年1月收治的宫颈癌患者214例，年龄38～71岁，平均65.8岁。所有病例检测前均未经放疗或化疗。依据《新编常见恶性肿瘤诊治规范》对214例宫颈癌患者(宫颈癌组)进行肿瘤分期，Ⅰ期102例，Ⅲ期68例，Ⅲ期30例，IV期14例。选取同期进行健康体检200例(体检组)，进行外周血T淋巴细胞及NK细胞检测两组在年龄上比较，差异无统计学意义，具有可比性。

1.2 检测方法仪器和试剂荧光标记单克隆抗体:鼠抗人CD3-PC5/CD4-FITC/CD8-PE三色标记和同型对照鼠抗人IgG1-PC5/IgGl-FITC/IgG-PE均购自法国Immunotech公司。BeckmanCouIter EPICS XL型流式细胞仪购自美国Beckm-CruIter公司。采集晨起空腹新鲜抗凝静脉血2 ml，肝素抗凝;取外周血100 μl，加入上述单抗20 μl，混匀，室温避光20 rain染色;加入1.5 ml红细胞裂解液，混匀后室温避光放置10 min，破坏红细胞;1 500 r/min离心5 min，弃上清;每管加入2 ml 0.1%叠氮钠的磷酸盐缓冲液混匀，1 000 r/rain离心5 min，弃上清;加PBS 1 ml，混匀，2 h内上机检测。FCM激光为冷亚激光，波长488 nm，采用flow-check调整光路，用同型对照调电压，以SSC为横座标，FSC为纵座标，构建散点图，在散点图上采用设门技术分析淋巴细胞群中CD，CDCD和CDCD抗原表达情况，每份标本计数1×105细胞。

1.3 统计学方法使用SPSS 13.0统计学软件进行统计学分析，因数据不符合正态分布，故采用秩和检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

对两组病例进行外周血T淋巴细胞及NK细胞的检测，观察体检组、宫颈癌组(Ⅰ期、Ⅲ期、Ⅲ期、IV期)变化并比较，具体见表1．

表1 两组病例检测(±s)

表1 两组病例检测(±s)

注:经统计学分析，宫颈癌组与体检组比较，P＜0.01有统计学意义;宫颈癌组Ⅰ期、Ⅲ期与Ⅲ期、IV期比较，P＜0.05差异有统计学意义。

3 讨论

机体的免疫系统是在生物进化中逐步建立起来的，其存在与功能的正常建立在机体稳定性的基础上。在正常情况下，机体的自身免疫功能可以防御病原微生物的侵袭，消除体内损伤或变老的自身细胞，处理体内出现的少量异常细胞。在抗肿瘤免疫中，细胞免疫占据着重要的地位。细胞免疫应答主要是T细胞介导的特异性细胞免疫，已证明T细胞具有有效的抗肿瘤作用［2］。对于T淋巴细胞和NK细胞等细胞免疫的主要效应细胞的研究已经成为现代肿瘤免疫学研究的重点。

胸腺依赖性淋巴细胞即T淋巴细胞又是细胞免疫系统的关键组成部分。机体内的T淋巴细胞能识别肿瘤细胞，在接受肿瘤细胞刺激后，转化为能攻击和杀伤肿瘤细胞的致敏淋巴细胞，有着免疫监视机能。一旦这种监视机能遭到破坏，患肿瘤的危险就将增加。

宫颈癌患者的T细胞亚群与正常人相比，当具有免疫反应活性的CD细胞减少，而具有免疫抑制功能的CD细胞升高时，可能引起机体的免疫平衡失调，造成恶性肿瘤患者的免疫功能减退或受到肿瘤细胞产生大量的免疫抑制因子(TDSF)，可广泛抑制杀伤细胞的活性，同时在肿瘤抗原的刺激下，脾细胞免疫抑制细胞前体被激活，分泌免疫抑制因子，造成宫颈癌患者免疫功能低下［4］。NK细胞在杀伤肿瘤细胞的过程中消耗了大量的NK细胞，以及TDSF使NK活性降低，NK细胞在血液循环中再分布等原因导致宫颈癌患者NK细胞降低［5］。

通过对两组进行观察宫颈癌患者的T细胞亚群与正常人相比差异有统计学意义，CD细胞减少、CD细胞升高。并且随着宫颈癌患者病情的发展，Ⅰ期、Ⅲ期与Ⅲ期、IV期外周血T淋巴细胞及NK细胞的检测比较差异有统计学意义(P＜0.05)，宫颈癌患者免疫状态与TNM分期有直接关系，越是晚期患者，其外周血细胞免疫功能越为低下。总之，外周血T淋巴细胞及NK细胞的检测对宫颈癌患者恶性程度、患者的预后有着良好的指导作用，外周血细胞免疫功能越低下，肿瘤分级越严重。

［1］李明，陈健，刘国福，等.胃癌患者外周血T淋巴细胞亚群的测定及临床意义．现代肿瘤医学，2004，12(6):534-535．

［2］杨萍，程爱明，李程.恶性肿瘤患者T细胞亚群和NK活性及slL-2R检测分析．肿瘤防治杂志，2004，11(1):79-81．

［3］纪爱芳，苏丽萍，郭晓军，等.慢性淋巴细胞白血病患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞亚群分析及临床意义．现代肿瘤医学，2005，13(4):485-486．

［4］孙林，温江涛，刘海红.乳腺癌患者外周血淋巴细胞及NK细胞的检测及其临床意义．现代肿瘤医学，2006，14(9):1069-1071．

［5］毛咏秋.姜愚，李梅，等.289例中晚期肿瘤病人外周血T淋巴细胞表型分析．华西医学，2004，19(2):185-186．

The Clinical significane of peripheral blood T lymphocytes and NK cells in cervical cancer patients

WANG Hong-ning．Zongnan Women's Hospital，Chengdu 610041，China

ObjectiveTo investigate peripheral blood T lymphocytes in patients with cervical cancer and NK cells and its clinical significance.MethodsFrom Jan．2009 to Jan．2011，214 cases of cervical cancer patients were admitted，selected over the same period 200 cases of physical examination(medical group)，peripheral blood T lymphocytes and NK cells were detected and compared.ResultsThe cervical cancer group and medical group significant difference(P＜0.01).Cervical cancer group I，ⅢandⅢof the period，IV Comparison significant difference(P＜0.05).ConclusionPeripheral blood T lymphocytes and NK cells in patients with malignant cervical cancer，have a good prognosis guidance，the more peripheral blood cell immune function is low，the more serious the tumor grade．

Cervical cancer;Peripheral blood T lymphocytes;NK cell detection;Clinical significance

610041四川省成都棕南妇科医院