罗永富

P53基因与食管癌的相关性分析

罗永富

目的通过检测食管鳞癌组织的P53蛋白表达情况，并分析P53基因与食管癌的相关性。方法收集2007年1月至2010年6月在我院进行治疗的食管癌患者66例，用免疫组织化学方法对患者癌组织的P53蛋白表达进行检测，并分析其表达阴性与阳性与患者生存率的关系。结果P53基因阳性患者的5年生存率为25.0%，阴性的生存率为47.1%。结论食管鳞癌组织P53蛋白的表达可能对该类患者预后有影响。

食管癌;组织;P53;预后

食道癌又叫食管癌，是发生在食管上皮组织的恶性肿瘤，占所有恶性肿瘤的2%［1］。本研究检测65例食管鳞癌组织P53蛋白的表达，并分析其与食管癌的相关性，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料2007年1月至2010年6月在湖南省肿瘤医院进行治疗的食管癌患者66例，其中男45例，女21例;年龄33～76岁，平均57.5岁。患者手术前后经病理检查证实为鳞癌，组织切缘病理检查示阴性，术前均未进行放化疗等辅助治疗;收住院后手术经左侧入胸进行切除，进行左颈部吻合并清扫胸内及腹腔内淋巴结;患者术后病理分期:Ⅰ期7例，Ⅱ期21例，Ⅲ期38例;胸中段癌41例;胸下段癌25例。

1.2 实验材料和方法

1.2.1 实验材料P53(D07)单克隆抗体购自SantaCruz公司，LSAB试剂盒(K0681通用型)购自Dako公司。

1.2.2 实验方法①烤片，68℃，20 min。②常规二甲苯脱蜡，梯度酒精脱水;二甲苯Ⅰ20 min-二甲苯Ⅲ20 min～100%酒精Ⅰ10 min～100%Ⅲ10 min～95%5 min～80%5 min～70%5 min。③阻断灭活内源性过氧化物酶:3%H2O237℃孵育10 min，PBS冲洗3×5 min。④抗原修复:置0.01 m枸橼酸缓冲液(PH 6.0)中用煮沸(95℃，15～20 min)，自然冷却20 min以上，再用冷水冲洗缸子，加快冷却至室温，PBS冲洗3×5 min。⑤正常羊血清工作液封闭，37℃10 min，倾去勿洗。⑥滴加一抗4℃冰箱孵育过夜，PBS冲洗3×5 min(用 PBS缓冲液代替一抗作阴性对照);滴加生物素标记二抗，37℃孵育30 min，PBS冲洗3×5 min。⑦滴加辣根过氧化物酶标记的链霉素卵白素工作液，37℃孵育30 min，PBS冲洗3 ×5 min。⑧DAB/H2O2反应染色，自来水充分冲洗后，苏木素复染，常规脱水，透明，干燥，封片。

1.2.3 P53 蛋白阳性标准:细胞核着色呈棕黄色为阳性细胞(+)，否则为阴性细胞(-)。

1.3 统计学方法采用χ2检验。

2 结果

P53基因阳性患者的5年生存率为25.0%，阴性的生存率为47.1%。

表1 P53基因多态性与食管癌的相关性分析

3 讨论

食管癌恶性程度高、病程进展迅速、易复发和转移、预后极差，中晚期患者5年生存率仅10%左右［2］。尽管早期食管癌5年生存率可达90%以上，但由于早期食管癌患者无明显特异临床症状，缺乏高危人群(无症状)预警和早期发现的特异指标和有效手段。临床上首次被确诊的食管癌患者中，95%以上均为中晚期。因此，阐明食管癌癌变的分子机制，建立适用于大规模高危人群预警和早期诊断的简便、经济和特异的分子指标和手段，对于降低食管癌的发病率和死亡率、提高诊治水平具有重要意义，已成为食管癌研究领域的重大课题［3］。

P53基因是因编码一种分子质量为53 kDa的蛋白质而得名，是一种抗癌基因。其表达产物为基因调节蛋白(P53蛋白)，当DNA受到损伤时表达产物急剧增加，可抑制细胞周期进一步运转。一旦P53基因发生突变，P53蛋白失活，细胞分裂失去节制，发生癌变，人类癌症中约有一半是由于该基因发生突变失活。

但是事物必然有它的两个方面，P53是一个重要的抗癌基因使癌细胞自杀，防止癌变;还具有帮助细胞基因修复缺陷的功能。这种功能对于受化疗药物作用而受伤的癌细胞，则起修复作用，而不是使癌细胞自杀。造成被修复的癌细胞在治疗后成为新的肿瘤。研究表明，P53基因阳性患者的5年生存率为25.0%，阴性的生存率为47.1%。食管鳞癌组织P53蛋白的表达可能对该类患者预后有影响。

［1］吕宗舜，黄象谦.食管癌的诊断进展.世界华人消化杂志，2010，8:1017-1019．

［2］王东旭，李伟.食管癌病因学进展.世界华人消化杂志，2010，8:1029-1030．

［3］李健，赵治国，冯常炜，等.中国河南林州市食管鳞状细胞癌组织中Ras蛋白的表达.世界华人消化杂志，1999，7:714．

412012湖南省株洲市中医药高等专科学校