张志辉 王宗福 穆玉恕 高松 纪波

1 材料和方法

1.1 一般资料 杂种犬12只，雌雄不分，体重13.5～25 kg。静注戊巴比妥钠(30 mg/kg)麻醉后，气管内插管接麻醉呼吸机，取左侧第7肋间后外侧切口进胸，切开纵隔胸膜游离下段食管，切开膈肌游离胃，距贲门4 cm处切断食管，应用国产吻合器(上海25 mm)将近端食管与胃后壁行端侧吻合，(除第一例外)余者11例均在吻合术后用胃壁浆肌层环行包埋吻合口6针;胃前壁造瘘置入16#胃管，缝合膈肌。抽外周血备检。采灌注前标本(胃壁、胸膜、肺组织)固定备检。置灌注管、排液引流管于胸腔内，外接无菌的体外循环专用塑料管道，在体外循环泵驱动下将胸腔内灌注液引入体外恒温水浴温箱进行热交换后再泵入胸腔内。温热盐水加顺铂(100 mg/m2)循环灌注1 h，监测胸腔内温度，通过调节体外循环泵流量保持胸内温度(43℃ ±0.5℃)。采集热灌注后外周血备检。采灌注后标本(胃壁、胸膜、肺组织)固定备检。术毕关闭胸腔，置胸腔闭式引流管一根，送动物室静脉营养(能量330 kj/kg日液量60 ml/kg日)7 d，抗生素预防感染治疗7 d。热灌注期间监测心率、肛温变化。测定灌注前后肝功、肾功、心脏功能(肌钙蛋白)变化。取灌注前后胸膜、肺组织，胃壁组织行大体标本，光镜、电镜观察，观察组织形态学变化。术后7 d处死动物观察吻合口愈合情况(大体、光镜)。

2 结果

2.1 热灌注前后肝功(ALT)、肾功(BUN CR)、心肌肌钙蛋白(cTnI)变化差别无统计学意义(P＞0.05)。

表1 热灌注前后肝功、肾功、心肌肌钙蛋白的变化

表2 热灌注过程中犬的心率、体温的变化

2.2 犬的生命体征变化 灌注化疗过程中犬的心率，体温都有一定程度的升高，但1 h后渐恢复正常。

2.3 灌注前后形态学变化 大体观察:灌注前胸膜及肺组织表面淡红色，无充血水肿，胃壁无充血;灌注后胸膜及肺组织表面轻度充血水肿，胃壁充血较轻。光镜观察:灌注前肺组织无充血;灌注后肺组织充血水肿，细胞间渗出液增加，并见灶性出血。胃壁浆膜层炎细胞浸润。扫描电镜观察:灌注前，胃浆膜间皮细胞大小均一，排列规整。胸膜间皮细胞梭形交织，排列规整，绒毛丰富。而灌注后，胃浆膜间皮细胞大小不一，排列不规则，有细胞缺失，间质细胞肿胀。胸膜组织细胞间隙加大，排列不规则，大小不一，绒毛较少，部分细胞缺失。

透射电镜观察:肺组织热灌注前，细胞呈立方形，基底部附着基膜;游离面，基底面接触面有短微绒毛存在;胞质丰富;板层小体较多，有成熟的板层小体;细胞核大而圆，核明显。相邻细胞之间有紧密连接。很少查见细胞调亡。热灌注后，核膜有间隙，核周池肿胀;板层小体空泡化，微绒毛脱落，细胞器减少;糖原颗粒增多，线粒体肿胀，嵴模糊。核变性有切迹，异染色质边聚，常染色质呈团块状;核溶解。核膜模糊。

2.4 动物存活情况 1例术后第1天突然死亡，死于麻醉过深。1例术后7 d死于吻合口瘘，此例实验动物应用国产吻合器(上海25 mm)将近端食管与胃后壁端侧吻合，未在吻合后用胃壁浆肌层环行包埋吻合口。余实验动物存活均在术后7 d处死。大体观，胸腔内粘连形成。胸腔内少许积液，无感染征象。吻合口与后胸壁及肺粘连形成，吻合口愈合较好，部分吻合钉或线结周围有炎性反应区。镜下观:胃食管胃吻合口处纤维结缔组织连接，愈合。部分线结或吻合钉附近有少许坏死细胞侵润。

3 讨论

体腔内热灌注化疗能最大限度地提高生物疗效尽量减少化疗药物的全身毒性作用，胸腔内热灌注化疗已成功用于临床治疗癌性胸水及恶性胸膜间皮瘤和恶性间腹肿瘤等疾病［1，2］。本实验通过控制灌注药液温度的办法来实现热疗与化疗的结合。实验犬心率、体温等生命学的影响是一过性的。胸腔内热灌注化疗对胸膜、肺组织有一定的损伤，对正常细胞产生一定的破坏，但不影响肺功能。

本实验采用术后7 d的吻合口的愈合情况作为观察指标。本实验中1例发生吻合口瘘，第7天死亡，瘘形成原因可能为热灌注损伤到吻合口组织。此例实验动物应用国产吻合器(上海25 mm)将近端食管与胃后壁端侧吻合，未在吻合后用胃壁浆肌层环行包埋吻合口。而后来实验犬均在吻合后用胃壁浆肌层环行包埋吻合口6针。静脉营养(能量330kj/kg日液量60 ml/kg)7 d，抗生素预防感染治疗7 d而未发生吻合口瘘，预定时间处死实验犬发现吻合口愈合好。从而说明:只要严密吻合胃食管吻合口后，再行胸腔内热灌注化疗1 h，对实验犬吻合口的影响是轻微的，也是安全的。

［1］康明强，等.循环胸腔热灌注治疗肺癌胸水及其机制探讨.中华医学杂志，2001，81(19):1176-1179

［2］Giovanni-B.Pleukal space perfusion with cisplantin in the multimoality treatment of malignant mesotherlioma:Afeasibility and pharmacokinetic study.J-Thora Cardiovasc-Surg，1999，117(4):759-765.