梁志洪

肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)是由M和B亚基构成的杂化型二聚体，主要存在于心肌细胞的外浆层，是心肌酶谱中最有特异性的酶，从80年代起公认为心肌酶学诊断的“金标准”，应用于急性心肌梗塞(AMI)的早期诊断［1，2］1979 年Gerhardt等人首次报道用免疫抑制原理测定CK同工酶，免疫抑制法以其快速、灵敏、定量且可进行自动分析等优点适合常规检测，随着方法与试剂不断改进与完善。用免疫抑制法测定血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)在国内各实验室已广泛使用，然而由于方法学的不完善以及其他可引起脑型肌酸激酶同工酶(CK-BB)升高的因素，临床上常出现所检测的CK-MB活性假性增高的现象，甚至还会出现CK-MB活性高于或相当于总CK活性的情况［3］。我科为了进一步了解免疫抑制法检测CK-MB是否受标本溶血的影响，用三组不同溶血标本进行分析比较，同时进行游离血红蛋白测定与CKMB的相关关系。

1 材料与方法

1.1 标本选择 本文资料根据我院2009年2月住院患者及健康体检人员血清标本90份。其中CK-MB活性高于总活性的30例患者血清、30例心肌梗死患者血清、30例健康体检者血清。30例患者CK-MB活性高于总活性患者中男性21例，女性9例，平均48±15岁(6～80岁)。30例心肌梗死患者血清中男19例，女11例，平均47±14岁(6～78岁);对照血清标本30份，均为本院健康体检者(非孕)，平均45±11岁(20～76岁)。三组病例的年龄、性别经统计学处理差别无统计学意义，具有可比性。

1.2 仪器和试剂 仪器美国贝克曼CX7，试剂为中生公司提供试剂盒，游离血红蛋白按《全国临床检验操作规程》自配试剂。

1.3 方法 CK-MB速率法双试剂，主波长340 mm，副波长410 mm，样品量 10 μl，试剂量 A 液 200 μl，B 液 50 μl，反应时间180 s，终点读数为120 s，温度37℃。游离血红蛋白按《临床检验操作规程》［1］操作。

2 结果

三组病例检查结果见表1。

表1 三组病例检查结果比较

3 讨论

CK由M和B两个亚单位组成，组合成CK-BB，CK-MM，CK-MB三种同工酶，在细胞线粒体内还有另一种同工酶，称之为CK-Mt。CK-BB主要存在于脑、前列腺等器官，CK-MM主要存在于骨骼和心肌，CK-MB则主要存在于心肌，正常人血液中大部分是CK-MM，少量CK-MB，而CK-BB极少。

在急性脑外伤、癫痫时BB明显增高，恶性肿瘤(如恶性组织细胞病)因胚胎化细胞产生BB增加，这些患者的血清在应用M亚基的抗体封闭法测定CK-MB活性时，也可见所谓的“CK-MB”增高，但实际是BB增高。CK-BB、巨CK、线粒体CK以及某些CK的变异体都不会被M亚基的抗体封闭，这些均致CK-MB结果偏高。

免疫抑制法测定CK-MB活性的原理是，通过抗CK-M抗体抑制M亚基的活性，测定B亚基的活性，正常血清中CK-BB含量极微［3］，用一般的方法检测不出，故将结果乘以2便可大致代表CK-MB的活性。显然凡是可使CK-BB升高的疾病均可影响CK-MB的测定，使其假性增高。

由于免疫抑制法测得CK-MB/CK＞50%的患者血清CK总活性均＜200 IU/L，而电泳结果显示CK-MB含量并不高，CK-BB含量明显增高，说明这些患者并无心肌损伤，而是存在心外器官损伤。所以在CK总活性不高，而免疫抑制法测得CK-MB明显增高时有必要对CK同工酶进行分析，以判断CK-MB是否假性增高，排除非心肌来源的可能［4］。

本试验在免疫抑制法测得CK-MB/CK＞50%的标本中，经CK同工酶电泳进一步分离后均出现CK-BB水平不同程度的升高，同时在30份对照血清中未出现CK-BB含量增高。由于所选标本患者年龄均＞6岁排除了胚胎期肝脏合成CKBB增高的影响，说明肿瘤患者血清中检出CK-BB的概率远大于正常人，差别具有统计学意义(P＜0.01)，符合肿瘤患者血清CK-BB升高可导致免疫抑制法测定CK-MB活性假性升高的说法。

［1］潘柏中.美国临床生化科学关于冠心病时心肌标志物的应用建议.上海医学检验杂志，2000，15(1):5.

［2］黄忠耀，朱洪生，赵函芳.缺血-再灌注心肌诱导型一氧化氮合酶基因表达及其活性的变化和卡托普利的影响.福建医科大学学报，2006，40(3):207-210.

［3］张秀明，李健斋，侯振江，等.现代临床生化检验学.人民军医出版社，2001:135-140.

［4］马骢，李艳君，王海东，等.血清CK-MB/CK大于30%的病因分析.临床检验杂志，2003，18(3):167-181.