赵鹰 胡长军 王鹏 马斌林 刘虎

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤，严重威胁女性的身体健康，新疆是乳腺癌高发区，近年来，虽然在早期诊断和治疗方面取得了一定的进展，但其死亡率仍无明显下降，本研究通过检测Ki67、Her-2和nm23蛋白在乳腺癌中的表达，探讨其临床意义，为临床提供参考指标。

1 材料和方法

1.1 一般资料 收集新疆医科大学附属肿瘤医院2007年10月～2008年6月经病理证实的原发性乳腺癌手术切除的标本104例，术前均未作过化疗、放疗和内分泌治疗，无其他合并恶性肿瘤和家族、遗传性疾病病史，患者年龄27～80岁，中位年龄44岁;临床Ⅰ期10例，Ⅱ期72例，Ⅲ期20例，Ⅳ期2例;腋窝淋巴结转移66例，未转移38例。

1.2 实验材料及方法 所有标本均经常规甲醛固定，石蜡包埋。进行连续切片，PV9000通用型两步法免疫组化方法检测乳腺癌组织中Ki67、HER-2和nm23蛋白的表达。以上试剂均购自北京中杉金桥生物技术有限公司，以各抗体的乳腺癌阳性染色切片作为阳性对照，用磷酸盐缓冲液PBS代替一抗作阴性对照。细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性，观察10个具有代表性的高倍视野，参照许良中等［1］采用着色强度积分与数量积分相加的方法判定结果:阳性细胞数计分:无阳性细胞数为0分，小于等于25%为1分，26% ～50%为2分，51% ～75%为3分，大于75%为4分;染色强度计分:无色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分;着色强度积分与数量积分相加:0分为(-)，2～3分为(±)，4～5分为(+)，6～7分为(++)，其中(+)和(++)判为阳性。

1.3 统计学处理 采用统计软件SPSS 13.0软件包。比较Ki67、HER-2及nm23蛋白和乳腺癌各临床指标，进行相关性分析。

2 结果

2.1 Ki67、Her-2和nm23蛋白的表达 Ki67基因在有淋巴结转移组中阳性表达者52例，占78.79%(52/66);在无淋巴结转移组中阳性表达者22例，占57.89%(22/38)。HER-2基因在有淋巴结转移组中阳性表达者23例，占34.85%(23/66);在无淋巴结转移组中阳性表达者5例，占13.16%(5/38)。nm23基因在有淋巴结转移组中阳性表达者46例，占69.70%(46/66);在无淋巴结转移组中阳性表达者35例，占92.10%(35/38)。见表1。

表1 乳腺癌组织中Ki67、Her-2和nm23的表达与淋巴结转移之间的关系

2.2 影响乳腺癌预后结果分析 对本组104例病例进行术后分析，发现Ki67蛋白表达阳性的病例共74例，其中有淋巴结转移组中有52例，占78.79%;明显高于Ki67蛋白在无淋巴结转移组中阳性表达的22例，占57.89%，差异具有统计学意义(P＜0.05)。HER-2蛋白表达阳性的病例共有28例，其中有淋巴结转移组中有23例，占34.85%;显著高于HER-2抗原表达在无淋巴结转移组中阳性的5例，占13.16%，差异有统计学意义(P＜0.05)。nm23蛋白表达阳性的病例共81例，其中有淋巴结转移组中只有46例，占69.70%;明显低于nm23蛋白在无淋巴结转移组中阳性表达的35例，占92.10%，差异有统计学意义(P＜0.05)。

3 讨论

Ki67蛋白是与增殖细胞相关的核抗原，分布于核内，其功能被认为与染色质相连及与细胞的有丝分裂密切相关，多个研究均发现，乳腺癌中Ki67的阳性率与乳腺癌的淋巴结转移有显著关系，而Ki67表达水平与乳腺癌患者生存率的直接关系国内外罕见报道。本组资料显示，Ki67蛋白表达水平与乳腺癌淋巴结转移密切相关。肿瘤淋巴结转移是与肿瘤细胞的增殖活性密切相关的，Ki67是与增殖细胞相关的核抗原，故Ki67表达水平高者易出现乳腺癌淋巴结转移。Ki67蛋白的表达，可反映肿瘤细胞活性，与恶性肿瘤的发展、转移和预后高度相关［2］。

HER-2又称 neu、C-erbB-2、NGL，位于人类第17号染色体长臂(17q21)，编码细胞膜磷酸糖蛋白，分子量为185×103u。近年来有关HER-2在乳腺癌中的表达与一些临床病理特征及预后的关系报道不少，但结论并不完全一致。Sauer［3］等证明非倍数染色体乳腺癌细胞中HER-2表达增高，间接证明了C-erbB-2表达阳性乳腺癌预后不良;Mittrz［4］等认为HER-2不仅与淋巴结转移显著相关，而且与多数学者通过对乳腺癌患者的随访研究认为HER-2的过度表达预示患者生存期较短，易复发，是判断乳腺癌预后的独立指标［5］。

本实验HER-2的阳性率为28%，与文献报道一致［6］。HER-2的表达与腋窝淋巴结转移有关，HER-2的高表达，腋窝淋巴结转移率明显增高。表达C-erbB-2的癌组织常具有较高的增殖活性，肿瘤生长活跃，其恶性程度高，转移率也较高，间接预示着表达HER-2的浸润性导管癌预后不良。众多研究表明，HER-2蛋白的表达水平与乳腺癌的淋巴结转移以及预后等有显著关系。本组资料显示，HER-2蛋白表达水平与乳腺癌淋巴结转移密切相关，故它可作为乳腺癌预后的一项重要参数。

nm23又称为抗转移癌基因，是一种抑癌基因，是一种公认的肿瘤转移抑制基因nm23蛋白表达水平与乳腺癌患者腋淋巴结转移状况和癌细胞分化程度呈显著相关，对腋淋巴结转移及远处转移起抑制作用。本研究显示nm23在癌组织中的阳性表达率为77.9%，nm23的表达在淋巴结无转移组明显高于有淋巴结转移组(P＜0.05)，因此nm23基因可以作为判断转移的标志物，对评估乳腺癌的预后有重要意义［7］。

近年研究表明，nm23与恶性肿瘤的发生、发展及侵袭转移有密切关系;nm23过度表达的恶性肿瘤更易出现淋巴结转移，预后较差［8，9］。

文献［10］报道，人类乳腺癌 nm23表达阳性率为63%-77%，且发现nm23阳性表达与乳腺癌的进展程度有关。淋巴结转移是乳腺癌转移的主要途径。本组研究结果显示，有淋巴结转移的乳腺癌组织中nm23表达水平低于无转移组(P＜0.05)，这提示nm23对乳腺癌淋巴结转移起抑制作用，高表达者抑制了肿瘤的转移。对乳腺癌的发生、发展有重要意义［11］。

本组资料显示，肿瘤细胞恶变后，包括HER-2在内的众多抑癌基因失活及癌基因激活，从而引起一系列改变，肿瘤组织代谢旺盛，合成DNA和RNA聚合酶活性增高，细胞增殖旺盛，Ki67、HER-2出现高表达。nm23则出现低表达。这说明联合检测Ki67、HER-2和nm23蛋白更有助于乳腺癌患者的预后判断，如联合检测Ki67、HER-2和nm23蛋白，发现前两种指标任1项阳性者都应加强术后的综合治疗及随访力度。

总之，乳腺浸润性导管癌患者nm23过度表达者预后好，C-erbB-2、Ki67过度表达者预后不良，三者联合检测可作为判断乳腺浸润性导管癌患者预后的有效指标。

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