钟伟兴，谌祖江，李俊桦，邝珊珊，王宁，张璇，李义凯，*

1.南方医科大学中医药学院，广州 510515； 2.南方医科大学第三附属医院，广州 510630

骨骼肌急性钝挫伤（acute skeletal muscle blunt trauma）指骨骼肌因外界突然直接的暴力作用造成肌纤维损害，出现局部肿胀瘀血，肌纤维断裂，肌细胞溶解崩塌等，从而导致骨骼肌功能和结构的不可逆损害。由于骨骼肌损伤及修复机制极其复杂，国内外学者对其进行了大量的研究，尚未得到统一观点和意见[1,2]。膏摩疗法（ointment massage therapy）[3]是将中药外用膏药与按摩手法相结合的治疗方法，是中医外治法的重要组成部分。本团队从事膏摩疗法对急慢性软组织疼痛的机制研究和临床研究，本实验在临床研究和动物实验基础上开展体外细胞实验，观察消炎止痛膏成分对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的C2C12 骨骼肌细胞炎症模型的影响，包括炎症反应和氧化应激状态，探讨膏摩疗法的膏药成分对骨骼肌钝挫伤的疗效。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞培养 C2C12 细胞系购自中国科学院昆明细胞所，培养于含DMEM/F12 培养基（含10%胎牛血清，1%青霉素-链霉素溶液）的培养瓶，置于37 ℃，体积分数5% CO2孵箱中，隔天换液，观察细胞形态和生长情况。

1.2 主要试剂 双氯芬酸钠（diclofenac sodium）购自ACMEC 公 司，DMEM/F12 培 养 基 购 自 美 国Gibco 公司，马血清购自美国Hyclone 公司，胎牛血清购自Biological Industries，胰酶细胞消化液（含0.25%胰酶、0.02% EDTA 和酚红）和青霉素-链霉素溶液购自Beyotime 公司，LPS 购自Solarbio 公司，小鼠IL-1β 和IL-6 的ELISA 检测试剂盒购自Multisciences 公司。CCK-8 试剂盒购自Fdbio science 公司，超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）试 剂 盒 和 丙 二 醛（malondialdehyde, MDA）试剂盒购自南京建成生物工程研究有限公司。……