李静 马俊远 何雄文 郑梦晓 胡晓凤 牛美兰

(1黄河科技学院医学院,河南 郑州 450000;2河南省中医药研究院附属医院)

缺血性脑卒中是血管狭窄或闭塞造成脑供血不足而引发的一种常见病,发病率高,死亡率高。除低糖和低氧外,组织酸化也是诱发缺血性脑损伤的重要病理因素之一〔1〕。葡萄糖转运蛋白(GLUTs)是葡萄糖跨膜转运的重要载体,缺血性脑损伤会改变其表达及功能,导致葡萄糖转运障碍,三磷酸腺苷(ATP)供应不足,蛋白质合成减少,血脑屏障通透性改变引发中枢神经损伤。1型Na+/H+交换蛋白(NHE1)可通过排出H+、移入Na+调控细胞内pH(pHi)和细胞容量〔2〕。文献报道,缺血性脑损伤时NHE1被过度激活,加剧神经毒性和细胞水肿〔3,4〕。薯蓣皂苷是薯蓣科植物的主要活性成分之一,具有抗肿瘤、抗血小板聚集、减少心脑肾的缺血再灌注损伤等多种作用。文献报道,薯蓣皂苷对大脑中动脉缺血(MCAO)大鼠具有高效的神经保护作用〔5〕。本研究旨在探索薯蓣皂苷对MCAO大鼠环腺苷酸(cAMP)/蛋白激酶(PK)A通路及NHE1、GLUTs蛋白的调控作用,为其临床应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1实验动物 60只SD大鼠,SPF级,雄性,体质量280～350 g,购自河南省实验动物中心,许可证号SCXK(豫)2017-0001,合格证号(NO201720584),饲养于标准实验动物房。实验均由郑州大学伦理委员会批准进行。

1.2主要药物、试剂及仪器 薯蓣皂苷(质量分数≥98%)由四川省维克奇生物科技有限公司提供;兔抗 NHE1 抗体、兔抗GLUTs抗体、小鼠抗GLUTs抗体、cAMP酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒、大鼠PKA-α ELISA试剂盒均购自武汉三鹰生物技术有限公司;其余试剂由sigma-aldrich公司提供。……