李兴晓 彭会丽 陈祖涛

随着饮食结构和环境因素变化,我国结直肠癌的发病率呈逐年上升趋势,具有较高的死亡率,严重威胁着人类健康[1]。缺氧微环境是维持癌细胞干性的外在环境,由于肿瘤细胞的快速生长,使得血液供应难以为继,使得肿瘤部分区域氧浓度低于正常组织。而缺氧微环境是导致肿瘤发生耐药性、血管再生、抑癌基因丢失等的重要因素,同时也是癌细胞发生转移以及严重不良预后的重要原因[2-3]。研究发现,缺氧环境下,乳腺癌细胞上皮间质转化进程加快[4]。此外,缺氧环境诱导肝细胞癌血管形成,促进肝癌的进展[5]。缺氧微环境下,缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)表达增加,可促进VEGF表达影响肿瘤血管生成[6]。有研究指出,右美托咪定对结直肠癌大鼠具有抗癌作用[7]。但是,目前右美托咪定是否对缺氧环境下结直肠癌细胞发挥抗癌作用仍有待研究,因此本研究探讨右美托咪定对缺氧环境中结直肠癌Caco2细胞增殖和侵袭的影响以及对HIF-1α信号通路的调节作用。

1 材料与方法

1.1 细胞系

人结肠腺癌Caco2细胞购自上海中国科学研究院细胞研究所。

1.2 试剂和仪器

右美托咪定购自山东辰熙医药科技有限公司;胎牛血清和培养基购自Gibco公司;Transwell小室和Matrigel基质胶购自美国Coring公司;HIF-1α引物序列由广州锐博生物科技有限公司合成;逆转录以及PCR试剂盒购自Promega公司;兔抗人HIF-1α抗体和HRP标记的山羊抗兔IgG二抗购自美国Abcam公司;CCK8试剂盒购自上海碧云天生物科技有限公司;Herocell 180二氧化碳恒温培养箱购自上海润度生物科技有限公司;XBL-01低氧培养箱购自杭州艾普仪设备有限公司;STM6光学显微镜购自奥林巴斯。……