李 雪,孙婷婷,魏彤竹,王伟杰,刁文丽

副溶血性弧菌可引发人类与海产品相关的肠胃炎,是一种嗜盐性革兰氏阴性细菌。近5年来,由副溶血性弧菌引起的食物中毒病例增多,甚至出现死亡病例,已引起相关部门的重视[1]。

副溶血性弧菌由藤野在1950年首次分离,菌种鉴定主要依据血清分型、生化反应、噬盐性试验、神奈川现象、动物实验等。鉴定项目多,培养基消耗大,实验操作繁琐,检验耗时长,给实际工作带来不便。

血清分型是副溶血性弧菌分型的常用方法,副溶血性弧菌一般有13个血清O群和71个K型抗原,但很多VP分离株不能用现有的抗原分型,当出现新的血清型时就可能给食源性疾病流行病学调查和溯源带来困难,因此作为流行病学研究工具,血清分型是很受限制的[2-3]。血清分型于副溶血性弧菌亚型的区分和流行病学调查相对不敏感。这就需要更具辨别能力的分子分型方法对副溶血性弧菌进行亚型分析和溯源。细致的分子分型研究及副溶血性弧菌菌株间亲缘关系的探讨可为副溶血性弧菌的预防、控制、流行病学调查、协助追踪感染源等工作提供重要理论依据[4-7]。

脉冲场凝胶电泳(PFGE)具有分辨力高、重复性好的优点,已经应用在很多食源性致病菌的分子分型研究中。PFGE的原理在于凝胶中应用交错电场,使DNA的运动方向变化,从而使大分子量DNA可以被更好的分离,研究者根据条带来进行鉴定与溯源等工作。

REP-PCR和ERIC-PCR技术是利用细菌基因组中广泛分布的短重复序列为引物的靶序列进行PCR扩增,通过对PCR产物电泳结果的比较,即可分析菌株间基因组存在的差异。……