李杰 祝珊珊 秦飞 王雪颖

(厦门医学院药学系,福建 厦门 361023)

大枣为鼠李科植物枣ZiziphusjujubaMill.的干燥成熟果实[1],别名红枣、干枣、枣子等,味甘,性平,具有补中益气、养血安神功效,既是常用的中药材,又是一种营养极其丰富的食品,即药食同源。大枣中含有环磷腺苷、黄酮类、多糖、三萜类、酚类等多种生物活性物质[2]。高效液相色谱法具有快速、高效、灵敏等特点,在中药质量控制中得到广泛的应用,已成为中药质量评价研究中重要方法之一[3]。作者通过查阅整理近年的文献,总结归纳高效液相色谱法在大枣质量控制中的应用现状,旨在为大枣质量控制深入研究提供参考。

1 枣中成分的含量测定

1.1有机酸 有机酸作为枣果中重要的风味指标之一,对果实的营养价值有着重要的作用[4]。大枣中的酸类物质可以起到免疫调节作用,提高大鼠的免疫应答,降低自身体内的低抗体应答[5]。马倩倩等[6]采用高效液相色谱-二极管阵列检测器法,经水浴超声、离心、膜过滤提取枣果实中的有机酸,可以准确、高效的测得草酸、酒石酸、奎宁酸、苹果酸、柠檬酸、富马酸的含量。

1.2糖类 枣中糖分含量占干物质的60%～80%,按聚合度不同可分为多糖、低聚糖和单糖。枣多糖具有增强免疫力、镇静、补气养血及抗肿瘤等多种生物学活性[7]。王向红等[8]建立了柱前衍生高效液相色谱法对金丝小枣、大荔龙枣等8种枣中水溶性多糖的单糖组成及其比例进行分析比较,结果显示8种枣多糖均由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖6种单糖组成,其单糖组成比例存在很大差异。

1.3维生素类 维生素C又称 L-抗坏血酸,广泛存在于新鲜的水果及蔬菜中,是人体新陈代谢所必需的营养物质。李玉明等[9]采用高效液相色谱法对鲜枣中维生素C进行了分析研究,以纯水为流动相,检测波长267 nm,温度30℃为色谱条件,此方法简单、快速、准确度高,适用于鲜枣中维生素C含量的测定。β—胡萝卜素是类胡萝卜素之一,在进入人体后可以转变为维生素A。袁瑾等[10]采用反相HPLC法,以甲醇-四氢呋喃为流动相,在5.7 min内就能完成滇刺枣中β-胡萝卜素的分析测定。

1.4萜类 五环三萜酸是大枣的主要活性成分之一,主要包括齐墩果酸、熊果酸、桦木酸等。现代药理究发现,枣中桦木酸、齐墩果酸和熊果酸对多种疾病有治疗作用。崔毅轩等[11]建立了分散液液微萃取结合高效液相色谱法(DLLME-HPLC)同时对大枣中的白桦脂酸(BA)、齐墩果酸(OA)及熊果酸(UA)含量进行测定。

1.5酚类 酚类物质是果实生长代谢过程中的次生产物,它对植物的生长发育和调节、基因的诱导表达、信号转导、果蔬产品的褐变、生物固氮有一定的影响[12]。念红丽等[13]利用高效液相色谱法分别对全绿、绿白、半红和全红4个成熟期的冬枣果皮中游离态、酯化态和结合态多酚进行了定性定量检测分析。

1.6黄酮类 红枣中黄酮类化合物的生物活性主要表现为清除自由基能力、抗氧化和抗疲劳作用等。李喜悦等[14]采用HPLC方法对14个品种大枣中所含的槲皮素-3-O-洋槐糖苷、芦丁、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素-3-O-α-L-阿拉伯糖-(1→2)-α-L-鼠李糖苷5种黄酮苷同时检测。

1.7环核苷酸类 环磷酸腺苷(cAMP),是核苷酸的衍生物,作为“第二信使”的环磷酸腺苷是有机体中广泛存在的一种重要的生理活性物质,参与多种生理生化过程的调节[15]。李辉等[16]采用高效液相色谱(HPLC)法准确测定环磷酸腺苷(cAMP)含量。

1.8内源性激素 植物激素是由植物自身代谢产生可调节植物生理反应的活性物质,也被称为植物天然激素或植物内源激素[17]。刘英翠[18]以枣果、枣叶片为实验材料,建立了高效液相色谱法同时测定枣果、叶片中4种内源激素赤霉素(GA3)、吲哚乙酸(IAA)、玉米素(ZT)、脱落酸(ABA)含量的测定方法。

1.9真菌类 链格孢菌是在自然界中广泛分布的一种常见植物病原真菌和腐生真菌,能引发红枣缩果、黑斑病等病害,影响红枣的品质和产量[19]。邹良君等[20]采用超高效液相色谱-串联质谱法,建立了一种用于农产品检测的快速样品前处理技术(QuEChERS)方法检测红枣中腾毒素(Ten)、链格孢霉素(ALT)、链格孢酚甲基乙醚(AME)和链格孢酚(AOH)4种链格孢霉毒素(ATs)的含量。

2 枣中添加剂的测定

2.1矫味剂 甜蜜素、糖精钠和安赛蜜均为非营养型甜味剂,具有甜度高、用量少等特点。GB/T 2760-2014标准明文规定这些甜味剂使用的范围和限量,并不允许在鲜果中添加[21]。祝平等[22]建立一种快速、高效、准确的测定冬枣和红枣中甜蜜素、安赛蜜和糖精钠的超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱联用法(UPLC-MS/MS)。

2.2防腐剂 苯甲酸是一种使用较为广泛的食品添加剂,常用于食品防腐。但过量食用可诱发癌症,长期使用可诱发哮喘、荨麻疹及血管性水肿等变态反应,对人体健康造成不利影响[23]。国家标准对于苯甲酸在食品中的添加有严格限制,而且在部分食品中禁止使用。郑晓冬等[24]采用剪切-均质-超声相结合的方式提取红枣中的苯甲酸,选择了液相色谱流动相类型与配比,建立了一种水溶液直接浸提结合高效液相色谱法检测红枣中苯甲酸的方法。

3 枣中农药残留的测定

为了防治害虫的侵袭,红枣在种植过程中都会喷洒农药,如果喷洒不当或者过量,会影响人们的身体健康,有必要对其含量控制。沈慧慧等[25]建立QuECHERS-超高效液相色谱-串联质谱法快速检测红枣中29种农药残留量。

4 小结与展望

大枣做为药食两用的中药材,受到越来越多的关注,对它的质量要求也是越来越规范。本文通过总结高效液相色谱法在大枣质量控制方面的应用,旨在为大枣质量控制的深入研究,为建立简单、快速、准确的质控方法提供理论参考。目前高效液相色谱法已经用于测定枣中有机酸、糖类、维生素类、黄酮类、萜类、酚类、环核苷酸类、内源性激素及作用于植物的真菌类,此外还有外源性的如矫味剂、防腐剂以及农药残留。但对于大枣的研究,横向宽度和纵向深度有待进一步拓展,一方面利用高效液相色谱法通过选取部分有效成分指标开展指纹图谱和一致性评价研究,相对系统地评价红枣的质量;另一方面可以在质量评价的基础上,建立有效成分和生物活性相关的谱效关系,进一步探明作用机理,以期待将大枣更好地开发应用。