董艳 祝蕊 张鑫宇

DN 是糖尿病诱发的最难治疗的合并疾病, 可以引发一系列复杂的器官功能紊乱［1］。虽然通过及早干预后可以逆转, 但一旦其发展到后期阶段会成为终末期肾病［2］。DN 是欧洲、美洲和其他国家患者终末期肾病的主要原因, 也是中国肾小球肾炎后末期肾病的第2个主要原因［1］。DN 严重影响患者的日常生活及工作,并对家庭及国家产生极大的负担。近年来, DN 的发病率呈上升态势［3］。所以如何能早期预知和延缓此病显得格外重要。此次试验通过比较DN 患者与健康人群的血清蛋白电泳与24 h 尿蛋白定量水平, 分析其临床诊断价值。现将详细过程报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019 年6 月～2020 年6 月沈阳金域医学检验所有限公司收集的已明确诊断的50 例DN 患者作为观察组, 另选取50 例健康体检者作为对照组。观察组中男23 例, 女27 例；年龄30～68 岁,平 均 年 龄(47.5±6.9) 岁；病 程2～8 年, 平 均 病 程(5.42±2.46)年。对照组中男22 例, 女28 例；年龄29～67 岁, 平均年龄(46.6±6.8)岁。两组的一般资料比较, 差异无统计学意义(P＞0.05), 具有可比性。见表1。

表1 两组的一般资料比较(n,±s)

表1 两组的一般资料比较(n,±s)

注：两组比较, P＞0.05

组别 例数 性别 平均年龄(岁)男女观察组 50 23 27 47.5±6.9对照组 50 22 28 46.6±6.8 χ2/t 0.040 0.657 P＞0.05 ＞0.05

1.2 纳入标准 ①观察组患者满足DN 诊断标准；②患者及家属均知晓本研究的目的, 签署了知情同意书。

1.3 排除标准 ①合并肿瘤、结核等疾病；②合并免疫系统、内分泌系统及血液系统疾病；③患者未能按要求在指定日抽血检测及输血；④研究期间患者出现上呼吸道感染和发热；⑤重度贫血、恶病质状态者；⑥合并严重肝功能不全者。

1.4 检测方法 两组均进行血清蛋白电泳及24 h 尿蛋白定量检测。禁食12 h 后, 第2 天清晨静脉采血4 ml。常规分离治疗后的同一天, 使用QIAXELAD 先进的自动实时毛细管电泳系统结合rochecobasc501 生化分析仪测定两组血清γ-球蛋白、ALB、β1-球蛋白、β2-球蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白浓度, 其中总蛋白浓度通过缩二脲法测量。通过溴甲酚绿(BCG)法检测血清ALB 浓度。在同一天的清晨要求患者开始排尿, 但不留取此次的尿液, 只收集早7 点以后到第2 天早7 点前的24 h 尿液, 放置在清洁干燥的容器内。第一次留取尿液时要在尿液中混入10 ml 的甲醛防止尿液腐败, 等24 h 的尿液标本都采集完毕后, 提取其中的2 ml, 通过北京天根生化科技有限公司生产的尿蛋白定量试剂盒测量尿蛋白浓度。其中血清蛋白电泳成分与24 h 尿蛋白定量的正常参考区间如下：ALB：52.0%～62.8%；α1-球蛋白：3.1%～4.6%；α2-球蛋白：7.0%～11.1%；β1-球蛋白：5.3%～7.8%；β2-球蛋白：3.3%～6.4%；γ-球蛋白：13.1%～23.3%；24 h 尿蛋白定量：0～150.0 mg/24 h。

1.5 观察指标 比较两组的血清蛋白电泳(ALB、β1-球蛋白、β2-球蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白)水平及24 h 尿蛋白定量水平、阳性率。

1.6 统计学方法 采用SPSS20.0 统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差(±s)表示, 采用t 检验；计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组的血清蛋白电泳水平比较 观察组的α1-球蛋白、α2-球蛋白、β2-球蛋白均显著高于对照组,ALB 显著低于对照组, 差异有统计学意义(P＜0.05)；两组β1-球蛋白与γ-球蛋白比较, 差异无统计学意义(P＞0.05)。见表2。

表2 两组的血清蛋白电泳水平比较(±s, %)

表2 两组的血清蛋白电泳水平比较(±s, %)

注：与对照组比较, aP＜0.05

组别 例数 ALB α1-球蛋白 α2-球蛋白 β1-球蛋白 β2-球蛋白 γ-球蛋白观察组 50 46.1±10.7a 6.0±1.9a 13.1±3.7a 5.9±1.0 6.5±1.5a 14.8±3.8对照组 50 60.0±2.2 3.9±0.6 9.3±2.0 5.8±0.7 4.6±1.0 14.5±2.6 t 8.998 7.453 6.389 0.579 7.452 0.461 P＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＞0.05

2.2 两组的24 h 尿蛋白定量水平及阳性率比较观察组的24 h 尿蛋白定量水平及阳性率分别为(223.8±66.2)mg/24 h、94.0%, 均高于对照组的(42.3±15.7)mg/24 h、10.0%, 差异有统计学意义(P＜0.05)。见表3。

表3 两组的24 h 尿蛋白定量水平及阳性率比较［±s, n(%)］

表3 两组的24 h 尿蛋白定量水平及阳性率比较［±s, n(%)］

注：与对照组比较, aP＜0.05

组别 例数 24 h 尿蛋白定量(mg/24 h) 24 h 尿蛋白定量阳性观察组 50 223.8±66.2a 47(94.0)a对照组 50 42.3±15.7 5(10.0)t 18.863 70.673 P＜0.05 ＜0.05

3 讨论

DN 作为一种临床常见病, 目前严重影响着患者的身心健康。肾脏作为一个重要的排泄和内分泌器官,在维持身体新陈代谢的稳定性方面发挥着关键功能［4］。由于肾脏的损害和DN 患者的葡萄糖代谢紊乱, 血清中各种分子组分和排出的尿液通常超过正常值范围［5］。这种分子标记方法可以辅助诊断DN, 并可以预测其治疗效果的优劣。血清蛋白电泳是常用的血清蛋白测量方式, 用于检测患者血清中很多蛋白浓度, 包括α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白、β1-球蛋白、β2-球蛋白和ALB［6］。陈灿锋等［7］通过血清蛋白电泳检测原发性肝癌患者的血清蛋白, 结果提示球蛋白浓度明显大于二次肝癌患者和健康受试者。24 h 尿蛋白定量可以检测蛋白质的损失, 可以有效反映患者是否具有肾病或其他一些全身疾病。此次试验中, 观察组的α1-球蛋白、α2-球蛋白、β2-球蛋白均显著高于对照组, ALB 显著低于对照组, 差异有统计学意义(P＜0.05)；两组β1-球蛋白与γ-球蛋白比较, 差异无统计学意义(P＞0.05)。观察组的24 h 尿蛋白定量水平及阳性率分别为(223.8±66.2)mg/24 h、94.0%, 均高于对照组的(42.3±15.7)mg/24 h、10.0%, 差异有统计学意义(P＜0.05)。根据相关试验发现［8］, ALB 的浓度根据DN 发展的各个阶段, 其排序由高至低依次为Ⅲ期＞Ⅳ期＞Ⅴ期, 同 时α1- 球 蛋 白、α2- 球 蛋 白、β2-球蛋白浓度根据DN 发展的各个阶段, 其排序由高至低依次为Ⅴ期＞Ⅳ期＞Ⅲ期。这可能是由于肾脏受损的过程也会随着DN 而变化；慢性的血糖浓度增加, 糖代谢紊乱加剧, 诱使二次蛋白质酵解；肾小管上皮细胞的结构遭到破坏, 肾小管的结构被改变、肾小球过滤能力下降, 最后出现患者尿液中的α-球蛋白、β2-球蛋白和24 h 尿蛋白定量浓度上升, 这一数据也和袁瑞丽等［9］研究结果高度统一。段晋燕等［10］研究也证实, 随着肾脏受损的不断进展, 患者尿液中的蛋白浓度也会上升, 尤其是β2-球蛋白、α-球蛋白。通过计算ALB、α-球蛋白、β2-球蛋白和24 h 尿蛋白定量在DN 疾病不同阶段的水平, 其受试者工作曲线(ROC)面积也都明显高过标准值, 证明了血清蛋白电泳在判断DN 和发展的各个阶段有很优良的应用意义。翟春清等［11］研究也证实, 检测患者的总尿蛋白浓度和各种蛋白浓度, 可以评估患者肾脏的受损强度和预后,其应用价值重大。

综上所述, 血清蛋白成分与24 h 尿蛋白定量的改变能够辅助诊断DN, 可以有效评估DN 患者的治疗效果, 并对预测远期效果意义重大, 而且此方法简单可靠, 可以在临床中广泛应用。