陈琰 张建华 陈坚 杨扬

原发性肝癌是临床常见的恶性肿瘤之一,该病的发病和致死率在恶性肿瘤均位居前列,预后较差[1-2]。肝癌根治性切除术目前仍是该病的主要治疗手段,可有效清除病灶,但由于多种因素,如病情进展、术中搬动和挤压、肿瘤细胞微转移等,术后仍存在一定复发风险[3-4]。因此探究HCC术后复发的机制,寻找能够预测HCC术后复发的标志物对于临床评估患者预后仍有指导价值.过去微小RNA-148a(miR-148a)已经在多种恶性肿瘤如卵巢癌、乳腺癌、胃癌中有所报道,均显示其miR-148a mRNA具有抑癌基因作用[5-7]。但miR-148a在原发性肝癌中的报道较少,其表达与肝癌术后复发的关系尚不明确。本研究通过观察肝癌根治术后复发患者的miR-148a表达变化,旨在为临床预测肝癌根治术后复发提供参考指标。

资料与方法

一、一般资料

纳入2018年3月—2021年6月淮安市淮安医院肿瘤内科收治的115例原发性肝癌患者,其中男性73例、女性42例;年龄45～65岁,平均(54.29±6.71)岁;高血压32例、高血脂27例、糖尿病23例;肿瘤部位:左半肝22例、右半肝93例;肿瘤数目:单发89例,多发26例;肿瘤直径≥5 cm的患者56例,<5 cm的患者59例,平均(4.39±1.18)cm;肝功能child分级A级97例,B级18例;有血管侵犯53例,肿瘤包膜不完整55例。纳入标准:①原发性肝癌符合相关诊断标准[8],接受肝癌根治术治疗;②年龄45～65岁。排除标准:①术前已接受化疗、放疗、射频消融术及其他抗肿瘤治疗;②临床资料不全;③肝功能child分级C级。随访时间为12个月,依据预后将其分为复发组(24例)和未复发组(91例)。研究类型为回顾性研究,无知情同意书签署。

二、方法

(一)一般资料 收集性别、年龄、合并症(高血压、高血脂、糖尿病)、肿瘤情况(部位、数量、直径)、肝功能child分级、手术时间、术中出血量、有无血管侵犯、肿瘤包膜是否完整等资料。

(二)实验室指标 于术前24 h采集静脉血4 mL于无菌EDTA试管中,离心处理后取上层清液,使用ELISA法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平。采用qRT-PCR法检测肝癌组织miR-148a mRNA相对表达量。

三、统计学方法

结 果

一、肝癌患者肝癌根治术后复发的单因素分析

复发组与未复发组多发肿瘤分别有10例(41.67%)、16例(17.58%),血管侵犯分别有17例(70.83%)、36例(39.56%),肿瘤包膜不完整分别有16例(66.67%)、39例(42.86%),两组miR-148a mRNA相对表达量分别为0.23±0.05、0.52±0.11,肿瘤数目、血管侵犯、肿瘤包膜情况及miR-148a mRNA相对表达量差异有统计学意义(P<0.05);两组其他资料差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

二、肝组织miR-148a mRNA相对表达量预测肝癌患者肝癌根治术后复发的ROC分析

经ROC分析,miR-148a mRNA预测肝癌患者肝癌根治术后复发的最佳截断值为0.329,曲线下面积为0.821(95%CI:0.732～0.910),敏感度和特异度分别为0.742、0.707,P<0.05;肝组织miR-148a mRNA相对表达量预测肝癌患者肝癌根治术后复发的ROC曲线见图1。

三、肝癌患者肝癌根治术后复发的多因素logistic回归性分析

将肿瘤数目、血管侵犯、肿瘤包膜情况及miR-148a mRNA相对表达量等因素纳入logistic多因素回归模型,进行量化赋值,因变量为肝癌患者肝癌根治术后是否复发(复发=1,未复发=0),自变量为肿瘤数目(多发=1,单发=0)、血管侵犯(有=1,无=0)、肿瘤包膜情况(不完整=1,完整=0)、miR-148a mRNA(≤0.329=1,>0.329=0),经多因素logistic回归性分析,肿瘤数目、血管侵犯、肿瘤包膜情况、miR-148a mRNA是肝癌患者肝癌根治术后复发的危险因素(P<0.05)。见表2。

表2 肝癌患者肝癌根治术后复发的多因素logistic回归性分析

讨 论

过去由于诊断技术的限制,早期通常难以发现并确诊原发性肝癌,患者预后通常较差,虽然近些年其诊断和治疗方法不断发展,但5年生存率依然不尽人意[9-10]。当前有关原发性肝癌术后复发与病理参数的关系尚未完全阐明,尤其分子生物学方面报道仍不多见,临床仍缺乏预测肝癌根治术后早期复发的分子生物学标志物[11]。本研究旨在研究肝癌患者肝癌根治术后早期复发的危险因素及miR-148a mRNA相对表达量预测术后早期复发的价值。

本研究结果显示,与未复发组相比,复发组肿瘤数目为多发、有血管侵犯、肿瘤包膜不完整的患者比例较高,提示肿瘤数目、血管侵犯、肿瘤包膜情况可能是肝癌患者肝癌根治术后复发的危险因素。多发肿瘤提示其肿瘤病变程度高,病情相对较严重,患者接受手术切除治疗导致其免疫功能削弱,而肿瘤细胞的黏附性、侵袭性等提高,因而术后复发的风险提高[12-13]。肿瘤包膜不完整的患者通常也存在血管侵犯情况,可引起肝癌根治术后隐匿性病灶在肝内播散,从而增加术后复发风险[14-15]。

本研究结果显示,术后12个月复发组miR-148a mRNA相对表达量明显低于未复发组,提示miR-148a mRNA表达降低可能与肿瘤进展和肝癌术后早期肿瘤复发有关。既往有关miR-148a mRNA的报道指出,在多种恶性肿瘤组织中,miR-148a的表达均出现明显下调,并且其表达对于肿瘤细胞的增殖、迁移等生理病理过程均有影响。非小细胞肺癌组织中,miR-148a表达明显下降,miR-148a可能是通过抑制高迁移率族蛋白抑制肿瘤细胞的迁移和侵袭,另外有利于强化药物的抗癌效果[16-17]。研究显示,miR-148a mRNA在原发性肝癌中相对表达量明显较低,miR-148a mRNA过表达则有利于阻滞细胞周期,对于原发性肝癌细胞增殖具有抑制作用[18-19]。本研究通过ROC分析miR-148a mRNA相对表达量预测肝癌患者肝癌根治术后复发的最佳截断值为0.329,与周兴芹等[20]研究中的0.31接近,另外ROC分析miR-148a mRNA相对表达量预测的曲线下面积为0.821(95%CI:0.732～0.910),预测价值较好,可作为肝癌根治术后早期复发的参考指标。

本研究表明,肿瘤数目、血管侵犯、肿瘤包膜情况、miR-148a mRNA是肝癌患者肝癌根治术后复发的危险因素,临床可据此对肝癌根治术后复发风险较高的患者进行筛查,对符合以上条件的患者密切监测,制定个性化的治疗策略,改善患者预后。

综上,肿瘤数目、血管侵犯、肿瘤包膜情况、miR-148a mRNA是肝癌患者肝癌根治术后复发的危险因素,并且术后早期复发患者肝癌组织中miR-148a mRNA相对表达量较低,可作为预测术后早期肝癌复发的参考指标。本研究尚存在部分不足,如随访时间为12个月,仅讨论了miR-148a mRNA与术后早期复发的关系,对于患者中远期预后是否仍有较好的预测价值有待验证,需扩大样本、延长随访时间进一步深入研究。

利益冲突声明：所有作者均声明不存在利益冲突。