魏凌， 孙丽， 王倩倩， 朱伟

（1.江苏大学医学院， 江苏 镇江 212013； 2.江苏大学附属昆山医院 检验科，江苏 昆山 215300）

近年来，程序性死亡受体1（programmed death-1, PD-1）/程序性死亡配体1（programmed deathligand 1, PD-L1）是导致肿瘤免疫逃逸的重要免疫检查点之一。PD-L1 在多种肿瘤中表达，通过与活化T 细胞上的PD-1 结合导致T 细胞功能受损，从而抑制T 细胞的激活，还能与其他免疫抑制信号协同作用，促进免疫抑制微环境的形成[1]。有研究表明，阻断多发性骨髓瘤细胞PD-L1 的表达后，T 细胞对骨髓瘤细胞的细胞毒性明显增强[2]。在非小细胞肺癌中，PD-L1 可通过作用于巨噬细胞，诱导CD4+T细胞向Treg 细胞分化，促进肿瘤进展[3]。间充质干细胞作为肿瘤微环境中重要的基质细胞之一，具有自我更新及多向分化的潜能[4]。近年来研究发现，间充质干细胞通过细胞间相互作用和旁分泌功能在固有免疫和适应性免疫中发挥重要的免疫调节作用[5]。研究表明，胃癌来源的间充质干细胞（gastric cancer mesenchymal stem cell, GCMSC）通过分泌白细胞介素-8（Interleukin-8, IL-8），上调胃癌细胞PD-L1 的表达，促进肿瘤免疫逃逸和耐药[6-7]。然而，GCMSC 促进胃癌细胞PD-L1 表达的具体特征不明确。本研究观察GCMSC 对胃癌细胞PD-L1表达的促进作用，并探究胃癌细胞PD-L1 表达对GCMSC 的反应性和异质性，为进一步研究GCMSC调控肿瘤细胞PD-L1 的表达机制提供依据。

1 材料与方法

1.1 细胞株

1.1.1 GCMSC分离与胃癌细胞株的培养 GCMSC 的分离获得江苏大学伦理委员会的批准。将江苏大学附属昆山医院收治的胃癌患者手术取得的新鲜胃癌组织置于75%乙醇中30 s，冲洗表面的血液等杂质后转移至含有10 000 u/mL 链霉素和青霉素的磷酸盐缓冲液（phosphate buffer saline, PBS）中15 min备用。……