张光洁，全秀振，李小敏，谭 军

1.湖南省衡阳市畜牧水产事务中心，湖南衡阳 421001；2.湖北省黄石市佳兴生物科技有限公司，湖北黄石 435100；3.湖南省衡阳市病害猪无害化处理中心，湖南衡阳421001

蛋鸭是我国的主要养殖产业之一，为满足人民群众的生活需求，养鸭规模加大，鸭病的发生率也显著升高[1]。在众多鸭病中，鸭坦布苏病毒（DTMUV）和鸭疫里默氏杆菌（RA）这2 种病原体引起的疾病对蛋鸭和肉鸭经济造成了严重危害[2]，其中DTMUV会使产蛋量急剧下降，最严重的可导致绝产，RA 是目前养鸭业中最严重的致病菌之一，发病率高，疫苗交叉保护有限，二者影响了养鸭行业的健康发展[3]。在临床实际情况中，鸭病的发生少见单个病原体感染，常为混合感染或继发感染，为鸭病的诊断和防治带来了很大的困难[4]。本研究运用病理剖检、细菌分离鉴定、病毒PCR 检测等方法，对湖南省某鸭场患病鸭进行疾病诊断，为这2 种病原体混合感染的诊断提供依据。

1 材料与方法

1.1 主要设备及试剂

无支原体胎牛血清（浙江天杭生物科技有限公司）；0.25%胰酶溶液（吉诺生物医药技术有限公司）；Taq DNA 聚合酶、Eastap Buffer、1dNTP（北京全式金生物技术有限公司）；Omega 胶回收试剂盒（北京Solarbio 科技有限公司）；琼脂糖凝胶回收试剂盒（Gel Extraction Kit(200)，OMEGA 公司，货号D2500-02）；反转录试剂盒（TaKaRa 公司，货号RR047A）；TRIzol试剂（Invitrogen 公司，货号15596-026）；Tris-Hcl、Maleic acid Mo375（Sigma 公司）；DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit Ⅰ（Roche公司，货号14761221）；全自动脱水机、自动染色封片一体机（德国莱卡公司），Nikon80i 生物光学显微镜为上海横桥仪器有限公司产品。

1.2 病料的来源及处理

本研究中病鸭来源于湖南某鸭场发病的80 日龄蛋鸭，首先对病鸭的发病情况和临床症状进行了解，随后对送检发病蛋鸭进行剖检，观察并记录各组织器官的病理变化。……