边振远, 王鑫宇, 张 成

北部战区总医院 普通外科,辽宁 沈阳 110016

结直肠癌是一种高度恶性肿瘤,其发病率和病死率分别排在肿瘤的第3位和第4位[1-2]。目前,针对结直肠癌的药物治疗手段比较缺乏,有待进一步开发。有研究报道,组胺作为一种内源性胺类物质,结合相应的组胺受体可以作用于肿瘤细胞的增殖,目前,已经发现的组胺受体包括H1、H2、H3、H4型组胺受体4种,组胺通过与这些不同的受体结合会发挥不同的作用[3]。人HRH3基因定位于第20号染色体,编码的蛋白由446个氨基酸组成[4]。有学者发现,H3型组胺受体(H3 histamine receptor,H3HR)具有调控肿瘤细胞增殖和迁移的作用[5]。有研究证实,肝细胞肝癌、胆管细胞癌、黑色素瘤、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌等恶性肿瘤组织中的H3HR表达水平显著增高[6-11]。本研究旨在探讨H3HR在结直肠癌中的作用。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 实验材料 人结直肠癌组织和癌旁组织样本来自于北部战区总医院普通外科。胎牛血清购自Gibco公司;RPMI1640培养基及0.25%胰酶由课题组专业技术人员配置;二甲基亚矾购自SIGMA公司;酒精(无水乙醇、75%乙醇)购自天津市富宇精细化工有限公司;光学显微镜购自OLYMPUS,全自动酶标仪(BIO-RAD550)购自美国bio-rad公司,离心机购自Thermo;EDU试剂购自广州锐博生物科技有限公司;H3HR干涉片段由吉玛基因公司合成。

1.2 实验方法

1.2.1 实验分组及干涉片段转染 (1)组织样本按照结直肠癌和癌旁组织分为10对。(2)将传代好的人结肠癌细胞HCT-116细胞分入siCtrl组和siH3HR组。siH3HR组接种细胞于6孔板中。用无血清培养基配制lip2000混合液,室温静置5 min;再用无血清培养基配制干涉片段混合液。……