■ 王凯 （江门市澳保生物科技有限公司 广东 江门 52900）

肝脏既是鱼体代谢器官，也是重要的免疫器官，不仅具有解毒、代谢脂肪和糖类的功能，而且在氧化防御方面具有重要作用。当外界环境发生变化时，肝脏中一系列的抗氧化酶类将被激活，快速清除体内多余的自由基，以此抵御外界胁迫所产生的侵害，维持鱼体内环境稳态。

近年来，在高产高效益的驱使下，我国每年都有由于投喂、管理不当造成的白肝、花肝、黄肝等肝脏问题，最终导致鱼吃料少、长速慢、免疫力低下。长期的低免疫状态使得鱼体难以克服多变的外部环境，易造成鱼病的爆发和鱼类的大规模死亡，从而增加养殖风险，影响养殖利润。

中草药是一种天然的饲料添加剂，具有提高鱼体免疫力、增加鱼类食欲、保肝护肠等功效，加之其低成本、低残留、低耐药性等特点，近年来，应用中草药防治鱼病受到了越来越多的关注。

因此，针对现有鱼类肝脏问题，对具有护肝功效的中草药进行探究，不仅有利于鱼类的健康养殖，维护“餐桌上的安全”，也对于水资源环境的保护具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 实验动物

养殖江门市澳保生物科技有限公司种苗厂实验网箱中的加州鲈，体质量为50～100g/条，无病毒性、细菌性和寄生虫性疾病。实验期间养殖水体水质良好，水温21～27℃，氨氮0～0.2mg.L-1，亚盐0～0.007mg.L-1，pH值7.4～7.8，溶氧5.6～7.6mg.L-1。每天投喂2次。

1.2 实验材料

江门市澳保生物科技有限公司自主研发的复方中草药护肝产品A。

图1 不同肝脏损伤程度分级

1.3 实验设计

1.3.1 肝脏损伤检查和肝脏分级

正式实验前对现有养殖的15个网箱加州鲈鱼肝脏进行检查，每个网箱随机取5条鱼，选择肝脏损伤较为严重的网箱进行实验，并对不同的肝脏损伤程度进行分级。

1.3.2 肝脏修复实验一：产品A护肝效果初步检验对肝损伤的网箱F中的加州鲈（200条）拌喂中草药护肝产品A进行治疗，每天拌喂2次，连续拌喂14d。分别于第0d、第7d和第14d进行取样，每次随机取样6条鱼，5条用于肝脏观察，1条用于切片。

实验二：产品A护肝效果对比实验 将肝损伤的15、16号网箱中的加州鲈（200条/网箱）分为两组，一组为对照组，投喂普通饲料，另一组为实验组，投喂拌有中草药护肝产品A的药饵，每天拌喂2次，连续拌喂7d，于第0d、第7d进行取样，每次随机取样10条鱼，观察肝脏情况。记录每日吃料量，采样前鱼体总重，采样后每条鱼体重、肝脏重，计算增重、增重率、吃料量、饵料系数。

增重=鱼体末重-鱼体初重

增重率=（鱼体末重-鱼体初重）/鱼体初重×100%

吃料量=每日吃料量×吃料天数

饵料系数=每日吃料量×吃料天数/增重×100%

2 结果

2.1. 肝脏分级

根据养殖经验，对鱼体不同状态下的肝脏进行分级，为后续实验的分析提供判断依据。1级肝脏：肝脏为猪肝红，肝脏状态最好，不需调理；2级肝脏：肝脏颜色较猪肝红淡，呈现为粉红色，肝脏状态尚可，可调理也可不调理；3级肝脏：肝脏红润或粉红带白斑或黄斑，肝脏状态较差，需要调理；4级肝脏：肝脏完全转变为白色或黄色，肝脏状态很差，急需调理。

2.2 产品A护肝效果初步检验

2.2.1 肝脏外观观察

实验第0d，加州鲈鱼肝脏发黄，均为4级肝脏；拌喂产品A 7d后，加州鲈鱼肝脏好转，4条肝脏为略微粉红，2级肝脏，1条肝脏为发黄，4级肝脏；拌喂产品A 14d后，加州鲈鱼肝脏基本修复完全，3条红润，1级肝脏，2条粉红，2级肝脏（图2），表明随着时间的增加，在产品A的作用下，加州鲈肝脏逐步修复。

图2 网箱拌喂产品A后肝脏修复情况

图3 网箱拌喂产品A后肝脏修复切片

图4 拌喂产品A后增重、增重率、吃料量、饵料系数比较

肝脏切片结果表明，加州鲈胰腺埋于肝脏中，围绕血管分布。在使用产品A前，肝脏发黄，血管周围的胰腺组织完全消失；使用产品A 7d后，肝脏粉红，血管周围的胰腺部分修复，部分出现病变，胰腺部分肿大、出现大量嗜酸性小体和空泡；使用产品A 14d后，肝脏红润，胰腺组织恢复正常，围绕血管均匀分布。

实验第0d，对照组和产品A组1～2级肝脏的占有率分别为40%和20%，3～4级肝脏的占有率分别为60%和80%，实验第7d，对照组1～2级肝脏和3～4级肝脏占有率相比于第0d没有变化，而产品A组1～2级肝脏占有率显著上升，为80%，3～4级肝脏的占有率显著下降，为20%（表1），说明产品A对肝损伤的加州鲈肝脏修复效果明显。

表1 网箱拌喂产品A后肝脏修复效果

实验结果表明，投喂产品A组增重、增重率、吃料量、饵料系数均明显优于对照组，说明鱼体肝脏的修复有利于鱼体的生长。

3 讨论

肝脏是鱼体维持内环境稳态最核心的器官之一，当机体出现代谢紊乱和病变时，肝脏状态也随之发生变化，如肝脏由光滑有弹性转变为豆腐状、易脆等，颜色由猪肝红转变为黄肝、花肝、白肝、绿肝等（黄春红等，2019；汪开毓等，2001）。在加州鲈养殖过程中，肝脏的颜色是否红润通常是评价鱼体是否健康的依据之一。在本研究中，我们选择肝脏条件很差的鱼类进行了两组不同维度的肝脏修复实验，一组是纵向比较实验，另一组是横向比较实验，两组实验均发现损伤的肝脏在使用产品A后明显变得红润，说明产品A对加州鲈的肝脏有明显的修复效果。同时，我们注意到两组肝脏修复实验的修复时间明显不同，一组14d完全修复，另一组7d完全修复，说明用药后，肝脏修复的时间并非是固定不变的。这可能与肝脏的损伤程度、天气的变化以及水质等有关，在多次的养殖实验中，我们发现当肝脏损伤程度越轻，修复的时间越短，反之越长。同时，好的天气条件好和水质条件也会加速肝脏的修复。

同肝脏一样，胰腺也是鱼体重要的消化腺和内分泌腺，在鱼类的消化和吸收、血糖调节方面发挥着重要的作用，其分布在硬骨鱼体内非常复杂，大致分为4种类型：紧凑型、散布致密型、弥散型和弥漫混合型（熊洪林和王志坚，2009）。本研究中，切片结果表明胰腺埋于肝脏中，与肝脏交替分布，依据熊洪林等（2009）的分类，加州鲈胰腺属于迷漫混合型，与虾蟹的胰腺的分布类似，这一结果为加州鲈肝胰脏的研究奠定了基础。此外，据了解，嗜酸性小体与细胞的凋亡有关。本研究中，红润的肝脏中胰腺细胞分布均均；粉红色的肝脏中胰腺出现部分肿大，肿大部位发现大量嗜酸性小体；在发黄的肝脏中，胰腺完全消失；而肝脏组织中并未发现明显异常。由此，我们推测在加州鲈营养性的肝损伤过程中，首先损伤的可能是埋藏于肝组织中的胰腺组织，胰腺组织的损伤影响鱼体对脂质、糖类的吸收和代谢，增加肝脏的负担，从而造成肝脏代谢紊乱，引发肝脏颜色发生改变。黄春红等（2019）发现不同肝脏等级的平均脂肪质量分数不同，且随着肝脏等级的增加（颜色的改变）平均脂肪质量分数显著增加，与本研究结果一致。

长期的鱼类养殖经验发现肝脏与肠道之间存在一种“铁”关系，鱼体肝脏分泌的胆汁会随胰腺分泌的胰液一起流到肠道里，帮助肠道消化食物、维护肠道菌群的组成和肠道屏障的完整性，食物消化后的各种产物包括内毒素通过肠道粘膜上皮细胞进入血液，通过门静脉流进肝脏进行解毒。肝脏与肠道之间形成一个循环，互相影响，研究者们称之为“肝肠轴”。本研究发现，肝脏修复组的增重、增重率、吃料量、饵料系数均优于未修复组，说明肝脏的修复可能促进了“肝肠轴”的良性循环，进而有利于鱼体生长。

4 结论

随着养殖集约化的不断加强，鱼类肝脏问题已经成为养殖成功的限制因素之一。本研究对中草药产品A的护肝效果进行两种不同维度的检验，均发现产品A对加州鲈鱼的肝脏修复有明显效果，并发现肝脏的修复时间可能与肝脏的损伤情况、水质和天气条件有关。肝脏切片结果表明加州鲈鱼胰脏分布属于迷漫混合型，与虾蟹胰脏分布类似，同时我们推测营养性肝损伤可能最先损伤的是埋藏于肝脏中的胰脏。此外肝脏的修复可能有利于促进“肝肠轴”的良性循环。