赵静，郭蕊，孟芝君，刘彩红，谢耀丽，刘晶，曹济民，王亚静

（1.山西医科大学 基础医学院，山西 太原 030000；2.山西医科大学附属人民医院 检验科，山西 太原 030012；3.山西医科大学第二医院 内分泌科，山西 太原 030001）

糖尿病心肌病（diabetic cardiomyopathy,DCM）是糖尿病患者的一种特殊心脏表现，其特征是早期的左心室肥大和舒张功能障碍，晚期出现明显的心力衰竭和收缩功能降低[1]。吸烟是心血管疾病和2 型糖尿病的独立危险因素[2-3]。尼古丁是香烟烟雾的主要成分，是最具药理活性的成分之一[4]。有研究已证明长期暴露于高水平尼古丁是诱发和促发包括心肌病和周围血管疾病在内的心血管疾病的致病因素[5]。目前尼古丁促进DCM 的机制还有待探究。有研究显示，细胞色素酶P4501A1（Cyp1a1）和神经元乙酰胆碱受体β4 亚基（Chrnb4）的表达与突变与吸烟密切相关[6-7]，但这2 个基因是否促进DCM进展，目前尚未报道。本研究拟制备高糖/高脂细胞模型（糖尿病模型）进行细胞实验，旨在探讨尼古丁对DCM 的影响及Cyp1a1 和Chrnb4 在其中的作用机制，为吸烟人群中DCM 患者的治疗提供新的思路。

1 材料与方法

1.1 主要材料和仪器

H9C2 细胞（BNCC353655，商城北纳创联生物科技有限公司），DMEM 完全高糖培养基（KGM12800S，江苏凯基生物技术有限公司），胰蛋白酶消化液（T1300，北京索莱宝科技有限公司），1×磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline,PBS）（0.01 moL，pH 7.4）（KGB5001，江苏凯基生物技术有限公司），葡萄糖（G116307，上海阿拉丁生化科技股份有限公司），棕榈酸酯（HY-N2341，美国MCE 公司），尼古丁（54-11-5，成都德思特生物技术有限公司），AMPK 抑制剂（P5499-5MG，美国Sigma-Aldrich 公司），DCFHDA（HY-D0940，美国MedChemExpress 公司），Cyp1a1和Chrnb4 干扰质粒（上海吉凯基……