鲍维廉 尤科渊 冯桂泽 曹心悦 沈晓燕

（复旦大学药学院药理学教研室 上海 201203）

实验和临床证据表明，肠黏膜屏障功能受损是炎症性肠病（inflammatory bowel disease，IBD）的驱动因素［1-3］。研究已将黏膜愈合作为IBD治疗的关键目标，意味着患者肠黏膜结构和功能可完全修复，预示着患者临床症状持续缓解和手术风险降低［4］。目前治疗IBD的药物［5-6］主要用于控制免疫炎症，对于黏膜损伤的修复非常有限，在以黏膜愈合为主要终点的临床试验中，药效仍不能令人满意［7-9］。因此，寻找既能控制炎症又能促进黏膜愈合的新靶标，并在此基础上开发治疗IBD的新药物成为迫切需要解决的医学问题。

在肠隐窝底部的Lgr5+细胞群具有成体干细胞潜能的肠干细胞（intestinal stem cell，ISC），可以在黏膜受损的情况下完成上皮系统的更新。在IBD患者中，Lgr5+ISCs的减少与疾病活动相关［10-13］。ISCs的丢失和功能异常是IBD慢性、反复发作性炎症的重要因素［14］。而将ISCs移植到实验性结肠炎动物的黏膜损伤部位，可以加速黏膜愈合［15-17］。Lgr5-EGFP-IRES-creERT2小鼠可以完成对ISCs的示踪和分选。该小鼠携带Lgr5-EGFP-IRESCreERT2基因敲入型等位基因，破坏了内源Lgr5（Gpr49）基因功能，并表达来自Lgr5启动子/增强子驱动的EGFP和CreERT2融合蛋白。该转基因小鼠纯合子不能存活，但是Lgr5-EGFP-IRESCreERT2杂合小鼠可存活且可繁育。在该种小鼠的肠隐窝基底柱状细胞（即ISCs）中可观察到EGFP荧光。Cre-ERT2融合蛋白由Cre重组酶和三重突变形式的人雌激素受体组成，该受体可与热休克蛋白90（heat shock protein 90，HSP90）结合。由于HSP90的阻挡，雌激素受体结合的融合蛋白无法进入细胞核。雌激素和雌激素受体结合使融合蛋白摆脱HSP90，进入细胞核内发挥Cre酶活性。……