小麦粉中过氧化苯甲酰测定方法验证

2022-12-13李鹏李峰马宏伟蒋梅峰

食品工程 2022年1期

李鹏李峰马宏伟蒋梅峰

（山西省粮油科学研究所有限公司，山西太原 030024）

过氧化苯甲酰，俗名引发剂BPO，分子式为C14H10O4，常温下为白色结晶性粉末，微有苦杏仁气味，能溶于苯、氯仿、乙醚，微溶于乙醇及水。过氧化苯甲酰常用作聚氯乙烯、不饱和聚酯类、聚丙烯酸酯等的单体聚合引发剂，也可作聚乙烯交联剂、橡胶硫化剂，还可在化工生产中作为漂白剂、氧化剂使用。过氧化苯甲酰对小麦粉有增白效果，2011年2 月11 日我国卫生部等六部委发布通告，自2011年5 月1 日起，禁止在面粉生产中添加过氧化苯甲酰、过氧化钙；食品添加剂生产企业不得生产、销售过氧化钙和过氧化苯甲酰。

过氧化苯甲酰是一种强氧化剂，易燃烧，性质极不稳定，遇到摩擦、撞击、明光、高温、硫及还原剂等均有引起着火爆炸的危险，加入硫酸时也能引发生燃烧。为防止爆炸，一般用碳酸钙、磷酸钙、硫酸钙等不溶性盐或滑石粉、皂土等将其稀释至20%左右使用，或储存时注入25%～30%的水。过氧化苯甲酰低毒，误服有害，对眼睛、皮肤和黏膜有刺激作用，应避免直接接触。本试验主要采用液相色谱法对小麦粉中的过氧化苯甲酰进行测定，其原理是用甲醇提取过氧化苯甲酰，用碘化钾将其还原为苯甲酸，高效液相色谱法分离，在230 nm处测定。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

L2000 高效液相色谱仪，（日立）天美有限公司，附L-2420 紫外检测器；QL-866 旋涡混合器，海门市其林贝尔仪器有限公司；MS204S 天平，感量0.1 mg，梅特勒-托利多国际有限公司。

乙酸铵，优级纯，天津光复科技发展有限公司；甲醇，DiKMA 色谱级；苯甲酸标准品，质量浓度1.00 mg/mL，中国计量科学研究院；孔径0.22μm滤膜等。

1.2 色谱条件

色谱柱：Hypersil ODS2（5μm,4.6×250 mm）；紫外检测器波长：230 nm；流动相：甲醇∶水（含0.02 mol/mL 乙酸胺）=10∶90；流速：1 mL/min；柱温：40 ℃；进样体积：10μL。

1.3 标准溶液配制及校准曲线

分别称取8 份5 g 不含苯甲酸的小麦粉于8 支50 mL具塞比色管中，加10 mL 甲醇，在漩涡混合器上混匀1 min，静置5 min，加入5 mL50%碘化钾水溶液，然后充分振摇1 min，放置10 min，加水至50 mL，混匀静置待样液分层后，取上清液用孔径0.22μm 滤膜过滤后备用。将标准品（1 000μg/ml）用过膜滤液稀释配制成0μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL、100μg/mL、200μg/mL 的标准工作液，并按照本方法的仪器条件进行测定，以苯甲酸峰面积为纵坐标，以苯甲酸质量浓度为横坐标绘制标准曲线。

1.4 样品前处理

称取小麦粉样品5 g（准确至0.1mg）于50 mL具塞比色管中，加10 mL 甲醇，在漩涡混合器上混匀1 min，静置5 min，加入5 mL50%碘化钾水溶液，然后充分振摇1 min，放置10 min，加水至50 mL，混匀静置待样品液分层后，取上清液用孔径0.22μm滤膜过滤，取滤液注入液相色谱仪进行分析。

2 结果与分析

2.1 校准曲线范围

以苯甲酸峰面积为Y轴，苯甲酸质量浓度为X轴绘制标准曲线（如图1），得到一次线性回归方程如下：Y=33 591X+24 384，相关系数R2=0.999。

图1 苯甲酸标准曲线

按照GB/T 27404—2008 附录F 的要求，本标准溶液系列由8 个点（≥5 个）组成，其质量浓度范围0μg/mL～200μg/mL，线性回归方程的相关系数为0.999（＞0.99），满足方法要求。

2.2 精密度

在3 份小麦粉空白基质中添加苯甲酸标准溶液，使其苯甲酸含量分别为0.5 mg/kg、1.0 mg/kg、2.0 mg/kg，每份样品进行6 次平行测定，试验结果见表1。

表1 苯甲酸精密度

按照GB/T 27404—2008 附录F 的要求，当被测含量≤10 mg/kg 时，实验室内变异系数≤7.5%，当被测含量≤1 mg/kg 时，实验室内变异系数≤11%。由表1 可知，该方法测试结果满足方法精密度要求。

2.3 方法测定低限

方法的检测限即为方法的测定低限，由于基质空白信号值过低，通过对小麦粉加标使其苯甲酸的含量为1.0 mg/kg，对其进行20 次测定，根据公式CL=3Sb/b计算结果，其中Sb为20 组空白值标准偏差，b 为方法校准曲线的斜率，结果见表2。由表2 结果分析可知，按照GB/T 27404-2008附录F 的要求，该方法测定低限符合标准要求。