苑园园

（衡水学院生命科学学院，河北 衡水 053000）

血管紧张素转化酶（angiotensin-converting enzyme，ACE）在血压调节方面具有极其重要的作用[1]。血管紧张素I（angiotensin I，Ang I）不能使血压升高，但它能被ACE酶转变为有强升压活性的血管紧张素II（angiotensin II，Ang II），同时能阻止降压物质缓激肽的释放，最终促使血压升高[2]。

目前，制备ACE抑制肽的方法有酶水解法、化学合成法、基因重组法等。因为操作简便、反应条件易控[3-5]，酶解法得到普遍使用。不同的酶存在不同的切割位点[6]，因而会产生不同功能活性的肽，所以筛选最适合产生高活性的ACE抑制肽的酶非常重要。然而传统的酶解方法效率低、水解产物ACE抑制率低。制备ACE抑制肽仅用单一方法的效果是非常有限的，已有不少研究发现通过复合方法[7-8]，可明显提高提取率并降低成本。

检测ACE抑制肽活性的体内法主要是动物实验，体外法采用紫外分光光度法、荧光测定法[9]、液相色谱串联质谱（liquid chromatography-tandem mass spectrometry，LC-MS/MS）[10]、酶偶联法[11]等。最常用的是 Cushman等[12]建立的紫外分光光度法，该方法以马尿酰组氨酰亮氨酸（Hip-His-Leu，HHL）为底物，按照一定的顺序先后加入ACE酶和ACE抑制肽发生反应，然后用乙酸乙酯萃取生成的马尿酸（hippuric acid，Hip），在228 nm波长下测定Hip的吸光度。

脱脂豆粕中的蛋白质含量高[13]，作为大豆油加工的副产品[14]，是生产食源性ACE抑制肽的优质原料。传统制备ACE抑制肽的方法是蛋白酶水解法，加入超声波预处理辅助酶解，利用超声波的空化效应及机械剪切对原料的破碎作用[15-16]，可缩短酶解时间、提高效率。超声波辅助酶解法制备豆粕ACE抑制肽的研究鲜见报道。……