武海江，张雅姣，袁舒妍，徐 华*，谢剑炜

（1．军事医学研究院毒物药物研究所，抗毒药物与毒理学国家重点实验室，北京 100850；2．沈阳药科大学 无涯创新学院，辽宁 沈阳 110016）

生理条件下，DNA会自发断裂N-糖苷键脱去碱基（Apurinic/apyrimidinic，AP）形成AP位点损伤［1-7］（图1A），据报道，平均每天每个哺乳细胞至少会产生10 000个内源性AP位点［2，8］。当DNA暴露于外源性物质如酸、烷化剂、电离离子或紫外线后［9-12］均会使DNA脱去碱基并生成AP位点［13］（图1B）。另外AP位点也是碱基切除修复（Base excision repair，BER）途径的关键中间体［14］，如活性氧引起DNA氧化损伤的标志物8-羟基-2′-脱氧鸟嘌呤核苷（8-OHdG）经BER中特殊糖基化酶的切除而形成AP位点［13，15］（图1C）。若AP位点未有效修复，可能会导致DNA聚合酶停滞和DNA链断裂，产生突变和细胞毒性［1-2，13，16］，因此对AP的检测有助于细胞损伤程度评估和化合物毒性评价［17-19］。近年来，由于交联损伤的严重性，AP位点形成的DNA链间交联（Interstrand crosslink，ICL）［20-27］和蛋白质交联［28-32］（DNAprotein crosslink，DPC）亦引起人们的重点关注。本课题组在前期工作中建立了细胞、血液、尿液及脏器中DNA加合物的质谱定量方法，实现了各脏器中DNA损伤的定量评价［33-35］；构建了组蛋白H2AX和H3磷酸化生物标志物的稳定同位素稀释液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）方法，实现对化合物基因毒性的快速发现和定量检测，并初步证明了该方法具有体外评价化学品致癌性的应用潜力［36-37］。课题组近期还开展了脱碱基位点交联加合物（AP-base）的高灵敏LC-MS/MS分析，在细胞中首次鉴定3种新型AP-base，对不同类型细胞中AP-base本底值进行了定量评价及相关毒物暴露研究［38］。

图1 AP位点的形成机制：DNA自发脱碱基形成AP位点（A）；……