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草鱼呼肠孤病毒VP7蛋白单克隆抗体的制备与应用

2022-09-13郭家鸿王俊亚李耀国肖调义

水生生物学报 2022年9期
关键词:检测

季 宁 魏 伟 郭家鸿 王俊亚 李耀国 肖调义 邹 钧,

(1. 上海海洋大学水产与生命学院,上海 201306;2. 湖南农业大学,湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心,长沙 410128)

草鱼病毒性出血病是草鱼(Ctenopharyngodon idella)常见病中危害最大的传染病,草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)是导致该病的主要病原[1]。草鱼出血病流行广、致死率高、发病季节长,造成巨大的养殖损失,严重威胁渔业生产[2,3]。

GCRV是一种双链RNA(Double-stranded RNA,dsRNA)病毒,属于水生呼肠孤病毒属(Aquareovirus),是水生呼肠孤病毒中毒性最强的病毒[4]。根据基因组差异,我国流行的GCRV可以分为3种基因型[5],其中GCRV-873[6]、GCRV-HZ08[7]和GCRV-104[8]毒株分别为基因Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型的代表株。在报道的40多株GCRV毒株中[9],GCRV 873株是第一株完成全基因组序列分析的草鱼呼肠孤病毒[10]。GCRV粒子为正二十面体对称的球形颗粒,不具囊膜,直径约为75 nm,其双层衣壳主要保护核酸免受外界的影响和破坏。GCRV-I是水生动物呼肠孤病毒的模式毒株,其基因组由11条分节段dsRNA构成,病毒编码的7个结构蛋白根据分子量大小依次定义为VP1—VP7[11],其中VP5和VP7是主要的外衣壳蛋白,病毒外衣壳含有2 0 0个由VP5/VP7异二聚体组成的三聚体[12]。

VP7蛋白是GCRV-I特有的外衣壳蛋白,由S10片段编码,在GCRV感染及致病过程中发挥重要作用[13]。VP7可以结合dsRNA,与病毒的细胞吸附有关[14],尤其在病毒与宿主互作及病毒入胞过程中发挥关键作用,外衣壳上的三聚体作为受体识别位点存在[15],故推测VP7蛋白参与GCRV入侵草鱼细胞过程[16]。Chen等[17]的研究发现感染GCRV草鱼产生的抗血清只能识别GCRV-I的外衣壳蛋白VP7,表明VP7是GCRV-I的主要抗原蛋白,可较其他结构蛋白诱导更强的免疫应答,提示VP7蛋白可以作为疫苗设计的首选免疫原。……

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