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调控γδT细胞受体对脑缺血再灌注小鼠Treg及细胞因子的影响①

2022-08-30刘宏为李冶秋朱宏飞天门市第一人民医院神经内科天门431700

中国免疫学杂志 2022年13期
关键词:小鼠

刘宏为 李冶秋 王 勇 朱宏飞 (天门市第一人民医院神经内科,天门 431700)

心脏骤停(cardiac arrest,CA)是严重危害人类生命健康的疾病之一,虽然快速有效的心肺脑复苏(cardiopulmonary-cerebral resuscitation,CPCR)可减轻CA 的危害,但其病死率仍然很高,主要原因为器官缺氧缺血后再灌注损伤[1-4]。研究表明,大脑对缺血缺氧非常敏感,其损伤是CA 患者的主要死亡原因,67.7%院外和22.9%院内CA 患者死亡由脑损伤所致,仅12.3%CA 患者在CPCR 后具有良好的神经功能预后[5]。因此脑功能恢复是CPCR的关键。

近年T 细胞在心肌缺血/再灌注损伤中的作用逐渐被揭示,其缺失可减轻全脑缺血再灌注损伤[6]。γδT 细胞是一种作用介于固有免疫和适应性免疫的T 细胞,其分泌的细胞因子IL-17A 可增加心肌梗死面积,但其在CPCR 后全脑缺血再灌注损伤发病机制中的作用研究较少[7]。本研究建立小鼠CPCR 模型,探究γδT 细胞受体拮抗剂对Treg 及相关细胞因子的影响,旨在为研究γδT 细胞受体在CPCR 后全脑缺血再灌注损伤发病机制中的作用提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 100 只SPF 级健康成年雄性C57BL/6 小鼠,7~9 周龄、体质量 20~25 g(合格证号:11400700257295),购于北京维通利华实验动物技术有限公司[SCXK(京)2016-0006]。置于12 h 光/12 h暗(光照时间7:00~19:00)、(22±2)℃、(52±2)%湿度环境饲养,自由饮食和饮水。本研究所有动物实验均按照国家相关法律及动物伦理学要求在武汉大学动物实验中心进行。

1.1.2 主要试剂及仪器 ELISA 试剂盒、TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)、RIPA(强)组织细胞快速裂解液、BCA 蛋白浓度测定试剂盒(增强型)、PBS磷酸盐缓冲液购自武汉贝茵莱生物科技有限公司;甲醛、无水乙醇购自国药集团化学试剂有限公司;……

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