官 鑫，涂 敏，蔡海滨，王云月，曾 霞，胡彦师

（1.中国热带农业科学院橡胶研究所，海南 海口 571101；2.云南农业大学植物保护学院，云南 昆明 650201）

【研究意义】白粉病是橡胶树生产上最重要的叶部病害，其病原菌鉴定为Erysiphe quercicola［1-2］，为专性寄生菌。该病自1918 年在印尼瓜哇被发现，目前已遍及亚非各国植胶园，主要为害橡胶树嫩叶（古铜期及变色期叶片）、嫩芽、嫩梢和花序，条件适合时其分生孢子可全年重复侵染，降低橡胶树光合作用，导致橡胶树生长迟缓、胶乳产量降低，最高可造成橡胶树减产45%［3-4］。因此，通过对橡胶树叶片上白粉病菌活菌量的快速检测，能及时开展橡胶树白粉病预测预报及防控，将其对生产的损失降至最低。【前人研究进展】qPCR 是利用荧光信号积累实时监测PCR 进程中每个反应循环扩增产物量的变化，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法［5］。qPCR 技术能够定量检测病菌［6-7］，但不能区分病菌的死活，易出现假阳性结果。研究表明，细胞死亡后DNA 仍然能够保留数天时间。PMA 是一种光敏感、与DNA 高亲和力结合的染料，其光解后能穿过死菌的细胞膜与死菌DNA结合形成稳定的共价键，从而抑制死菌DNA 扩增。活菌因其具有完整的细胞膜，可将PMA 排除在细胞膜外［8］。因此，利用PMA 对死活细胞的选择性，结合qPCR 技术，可以实现准确定量检测活菌的目的。目前该技术已广泛应用于食源性致病菌［9-10］、医学病原微生物［11］、水环境病原微生物［12］等，对植物病原菌检测也有越来越多的报道，已在玉米细……