孙梦梅，王瑞生，张振凌, 3, 4，陈祎甜，李德华

基于指纹图谱及化学计量学研究不同发酵程度建曲中成分变化

孙梦梅1, 2，王瑞生1, 2*，张振凌1, 2, 3, 4*，陈祎甜5，李德华1, 2

1. 河南中医药大学药学院，河南 郑州 450008 2. 河南省中药特色炮制技术工程研究中心，河南 郑州 450008 3. 呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心，河南 郑州 450008 4. 河南省中药饮片炮制中医药重点实验室，河南 郑州 450008 5. 焦作工贸职业学院，河南 焦作 454550

采用指纹图谱技术结合化学计量学分析方法，探究不同发酵程度建曲中化学成分的差异性，筛选差异性标志物，为规范建曲炮制工艺、建立饮片质量标准提供参考。采用Waters SunFire C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以乙腈-0.1%乙酸水溶液为流动相梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，检测波长280 nm，柱温30 ℃，进样体积10 μL，建立不同发酵时间建曲HPLC指纹图谱，采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件（2004A版）进行相似度评价，标定共有峰并进行指认及归属；以共有峰峰面积为指标，利用层次聚类分析法（hierarchical cluster analysis，HCA）对不同发酵时间建曲进行区分，再借助正交偏最小二乘-判别分析法（orthogonal partial least square-discriminant analysis，OPLS-DA）筛选出不同发酵程度建曲间差异性标志物；建立多指标成分含量测定方法，对多个差异性标志物进行定量分析。不同发酵时间建曲指纹图谱相似度大于0.900，共标定46个共有峰，指认并归属21个成分；HCA结果显示9个不同发酵时间建曲可聚类为4个发酵阶段；OPLS-DA结果表明不同发酵阶段建曲间差异性标志物略有不同，芹菜素、新橙皮苷、峰28、柚皮苷、橙皮苷和木犀草素为不同发酵程度建曲的主要差异性标志物；……