周永林 申小磊 周立帅 林巧霞 王朝露 陈静 冯慧捷 张振文 陈晓婷, 3, * 鲁国东

正调控水稻对稻瘟病和白叶枯病的抗性

周永林1, 2申小磊1, 2周立帅1, 2林巧霞1, 2王朝露1, 2陈静1, 2冯慧捷1张振文1陈晓婷1, 2, 3, *鲁国东2

（1福建农林大学 生命科学学院，福州 350002；2福建农林大学 生物农药与化学生物学教育部重点实验室，福州 350002；3福建省作物有害生物监测与治理重点实验室，福州 350013；*通信联系人，E-mail：xiaotingchen@fafu.edu.cn）

【目的】由稻瘟病菌（）引起的稻瘟病和由水稻黄单胞菌（pv，）引起的白叶枯病严重影响水稻的产量和品质。创制转基因水稻材料，进行稻瘟菌和白叶枯菌的抗病性分析，有助于揭示其调控水稻对稻瘟病和白叶枯病的抗性机制。【方法】采用CRISPR/Cas9系统构建的敲除载体，利用限制性内切酶Ⅰ线性化pCXUN-HA，TA连接构建的过表达载体，遗传转化获得转基因水稻，筛选过表达株系和纯合敲除株系进行真菌和细菌的抗病性分析。在稻瘟菌（Guy11）侵染水稻后，对水杨酸（salicylic acid，SA）、茉莉酸（jasmonic acid，JA）途径的标志基因进行qRT-PCR分析；在几丁质（chitin）和flg22诱导下，观测水稻活性氧（reactive oxygen species，ROS）的暴发情况。【结果】 qRT-PCR分析表明，接种稻瘟菌和白叶枯菌24 h后，表达量上调；的纯合敲除和过表达水稻转基因株系接种稻瘟病菌Guy11孢子悬浮液，与野生型（日本晴）相比，敲除株系更易感病，过表达株系则无典型的病斑症状；接种 6、12、24和36 h时，3个病程相关蛋白基因、、和SA通路基因，以及JA合成通路上的2个基因、的转录水平在敲除转基因株系中显著下调，而在过表达转基因株系中显著上调。对转基因水稻接种白叶枯菌（），发现敲除的转基因水稻对白叶枯菌更易感病。……