张炎 李睿 李利军

摘 要：利用C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）的巯基化适配体修饰金壳磁性颗粒制备了磁性捕获基底Fe3O4@PEI@Au@Aptamer-SH;以拉曼报告分子对巯基苯甲酸（4-MBA）修饰银纳米粒子，并通过酰胺键偶联CRP的氨基化适配体，制备了信号探针Ag@4-MBA@Aptamer-NH2。磁性捕获基底、抗原CRP以及SERS探针形成三明治夹心复合物，磁分离富集后，实现对CRP的SERS检测。在0.1 ng/mL～100 μg/mL浓度范围，SERS信号强度（ISERS）与CRP浓度的对数值呈良好的线性关系。对人血清样品进行加标试验，回收率为93.1% ～109.6%，相对标准偏差（RSD）为2.71%～4.68%（n = 3）。该SERS-磁性生物传感器具有制备相对简单、线性范围宽、特异性强、重现性和稳定性好等特点，在临床检测诊断方面具有一定的应用价值。

关键词：C反应蛋白（CRP）;适配体;SERS;生物传感器

中图分类号：TP212.3          DOI：10.16375/j.cnki.cn45-1395/t.2022.03.012

0    引言

Tillet和Francis于1930年在部分急性病患者的血清中發现C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）。人体血清中CRP是细菌感染、组织坏死、动脉粥样硬化等疾病的重要标志物，是急性炎症病人血清中可结合肺炎链球菌的荚膜C-多糖蛋白质。正常人血清中CRP含量一般不超过8 μg/mL[1]，在感染细菌、组织严重坏死、动脉粥样硬化后的6～8 h，CRP的浓度开始升高，在24～48 h达到高峰，高峰值可达正常值的数倍或数百倍[2]，在消除感染后，其含量急剧下降，一周内可恢复正常。目前，CRP已经作为医院急诊常规检测项目[3]，和血常规同时进行检测，是诊断全身细菌性感染的重要标志物[4]。动态观察CRP有助于在细菌感染时合理使用抗生素[5]、对疗效进行判断。

目前，有关CRP的检测方法主要有化学发光法[6]、荧光免疫分析法[7-8]、酶联免疫分析法[9-10]和电化学分析法[11]等，这些检测方法具有良好的准确性和重现性，已应用于临床诊断和治疗，但存在操作繁琐、耗时、成本较高等问题。……