雷 毅，张 晨，李思瑶，陈 艳

（1新疆医科大学公共卫生学院卫生毒理学教研室，乌鲁木齐 830011；2嘉兴学院医学院，浙江 嘉兴 314000）

食管癌(Esophageal cancer，EC)是全球八大常见恶性肿瘤之一，我国食管癌发病率居各类肿瘤第5位，病死率居第4 位[1]。幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,HP）是一种厌氧型革兰氏阴性菌，主要定居于胃黏膜细胞中并与消化系统相关疾病密切相关。细胞毒性相关因子（CagA）是幽门螺杆菌中特有的毒力因子，Li等[2]发现，在食管癌患者中CagA检出率增高，在食管癌高发地区，食管癌患者中CagA 阳性率高达79.5%，幽门螺杆菌感染可以促进细菌的过度生长和内源性亚硝胺物质的生成，从而促进食管鳞状细胞癌的产生[3]。尽管HP 与胃内相关性疾病的关系已被证实，但其与食管的病变及癌症的关系尚不明确。亚硝胺是一大类具有强致癌性的化学物质，广泛分布于生活中。单功能烷化剂N-甲基-N'-硝基-N-亚硝 基 胍 (N-Methyl-N'-Nitro-N-Nitrosoguanidine，MNNG)是一种常用来诱导细胞癌变的亚硝胺类物质，常被用于食管癌、胃癌等细胞模型和动物模型[4-6]的建立。目前普遍认为癌症是多种因素共同作用的结果，因此采用HP 联合MNNG 染毒人食管上皮细胞，观察多种外界不良因素对细胞增殖及周期的影响，为探索食管癌病因及预防提供依据。

1 材料、仪器及方法

1.1 材料及仪器人食管上皮细胞（HEEC）来自ATCC，幽门螺杆菌标准菌株（ATCC26695）来源于广东省微生物菌种保藏中心。MNNG(上海罗恩)、RPMI 1640(Gibco)、胎牛血清(Gibco)、PBS(Gibco)、胰蛋白酶(Gibco)、巧克力血琼脂平板（郑州安图生物）、细胞增殖试剂盒(MCE)、细胞周期试剂盒（联科生物）、抗体Cyclin B1（CST）、抗体GAPDH（ABclonal）等。……