周钰婷,张 勇,杨 建,李 飞

（1新疆医科大学药学院，乌鲁木齐 830011，2桂林医学院附属医院广西肝脏损伤与修复分子医学重点实验室，3桂林医学院附属医院广西神经鞘脂代谢相关疾病基础研究重点实验室，广西 桂林 541001）

cGAS-STING 信号通路是一个可以识别细胞内异常DNA 的天然免疫信号通路[1]。此信号通路在机体对抗病原微生物感染及抗肿瘤免疫反应中起到了重要作用，同时该信号通路的异常激活也可导致多种自身免疫性疾病的发生[2]。研究表明，cGASSTING 信号通路普遍表达于肝脏等各组织细胞，且在固有免疫细胞中呈高表达[3]。肝脏分为肝实质细胞和非实质细胞，肝实质细胞的比例约为60%～80%，其余20%～40%为肝脏非实质细胞包括肝窦内皮细胞（Liver sinusoidal endothelial cells,LSECs)、巨噬细胞（又称库普弗细胞，Kupffer Cell，KCs）、树突状细胞、星状细胞等[4]。LSECs是肝脏内数目最多的肝脏非实质细胞，约占肝脏非实质细胞总数的50%[5]。肝巨噬细胞对于维持肝脏本身以及整个身体的体内平衡具有不可或缺的作用[6]。本研究采用LSEC、Raw264.7、Hepa1-63 种细胞分别模拟肝窦内皮细胞、巨噬细胞、肝实质细胞，探讨经典cGAS-STING 激活剂poly(dA:dT)、DMXAA 以及乙型肝炎病毒对3 种细胞cGAS-STING信号通路相关基因表达的影响。

1 材料与方法

1.1 细胞小鼠肝窦内皮细胞（LSEC）、小鼠肝癌细胞系（Hepa1-6）、人肝癌细胞（HepG2.2.15）均由广西肝脏损伤与修复分子医学重点实验室赠送并保存，小鼠巨噬细胞（Raw264.7）购自中科院细胞库。

1.2 试药胎牛血清（美国Gibco 公司）；DMEM 高糖培养基（美国Gibco 公司）;0.25%胰酶、青链霉素（中国Solarbio 公司）；Lipofectamine3000（中国Invitrogen公司）；EZ-press RNA Purification Kit（美国EZBioscience 公司，批号：B0004D）、2×SYBR Green qPCR Master Mix (ROX2 plus)（美国EZBioscience 公司，批号：A0001-R2）；逆转录试剂盒（中国诺唯赞公司）；……