谢 婷，郑桂贤，霍增榆，韦鑫燕，黄颜冰，陈小丽，白 晶

（广西医科大学第一附属医院呼吸与危重症学科，南宁 530021）

肺气肿是慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）主要的病理特征，是COPD 发病机制的研究重点，通过建立肺气肿动物模型是众多学者研究COPD 公认的有效方法[1]。吸烟是肺气肿发展主要的危险因素，香烟烟雾中含有焦油、尼古丁、氢氰酸等多种有害成分，这些有害物质可直接作用于呼吸道，长期吸烟可导致肺内异常炎症反应，损害支气管和肺泡上皮细胞，导致肺功能下降，从而使肺气肿发病率增加。调节性T 细胞（regulatory T cells，Treg）参与控制免疫与炎症反应，在自身免疫性疾病和慢性炎症性疾病中起重要作用[2]，叉头状转录因子p3（forkhead box P3，Foxp3）是控制Treg 细胞发育和功能的关键因子。有研究表明，组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase，HDAC）与调节性T细胞免疫抑制功能相关，HDAC9在此过程中起关键作用[3]。本研究构建HDAC9 基因缺失小鼠与野生型小鼠肺气肿模型，观察HDAC9 在香烟烟雾暴露所致肺气肿小鼠中的作用。

1 材料与方法

1.1 动物、主要试剂和仪器 HDAC9-/-C57BL/6 小鼠与野生型小鼠，鼠龄6 周，雄性，体重（20±2）g，购自上海南方模式生物科技股份有限公司，动物使用许可证号：SYXK（沪）2017-0012。真龙牌香烟（武汉烟草公司，焦油量10 mg，烟碱量1.0 mg）。CD4+CD25+Regulatory T Cell Isolation Kit、分选柱（Miltenyi，德国）；Foxp3 抗体（Novus，美国）；Percp-Cy5.5-anti-mouse-CD4 及PE-anti-mouse-CD25 (BD Pharmingen,美国)；逆转录试剂盒、荧光定量扩增试剂盒（Takara公司，日本）。BX51正置显微镜（Olympus 公司，日本）；BD FACSVerse 流式细胞仪（BD Pharmingen,美国）；Applied Biosystems 7500 型荧光定量PCR仪（ABI，美国）。

1.2 动物模型建立 自制两个玻璃舱，分别标为A、B 两舱，将野生型烟熏组与HDAC9-/-烟熏组置于A 舱中进行香烟烟雾暴露建立肺气肿模型，每次同时点燃5只香烟，40 min后开舱通气20 min，每天重复4次，每周烟熏5 d，连续24 周。……