林秋月，林秀香

福建省莆田市第一医院病理科，福建莆田 351100

胸腔积液是一种常见的临床炎性疾病，循环障碍、恶性肿瘤均可引起，以病理性积液在胸膜腔内积聚为特征，其发生和胸部损伤和胸膜通透性增加、静水压在胸膜脑细血管内增高和壁层胸膜淋巴回流障碍等因素相关，发病后患者容易出现咳痰、发热和呼吸困难等症状[1]。由于该疾病初期无显著症状表现易被患者忽略，发病后病情往往已发展至中晚期，错过手术治疗最佳时期，部分患者因胸腔积液入院检查，所以对胸腔积液细胞学结果准确检测，对临床疾病的鉴定有重要意义。以往传统涂片技术是主要检测手段，该方法存在制片不均匀、阳性率低下，缺乏组织形态结构或明显増生的间皮细胞等局限性，导致诊断效果不理想，易出现漏诊[2]。因此，为避免上述情况发生，利用胸腔积液制作细胞块不仅可以做常规HE染色,显示组织结构,利用其可以反复、连续切片的特点，结合免疫组化,分子病理鉴别肿瘤细胞来源,为分子靶向药物的选择提供临床依据显得尤为重要。该研究以2019年6月—2021年4月时段该院接收的84例胸腔积液患者为研究对象，以传统涂片技术作为参照，对开展细胞蜡块技术的效果情况做进一步分析。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

1.2 纳入与排除标准

1.2.1 纳入标准 研究所选病例均伴呼吸异常、发热和胸腔积液过多现象；研究所选病例年龄均≥19岁，但≤74岁；选取患者均知晓同意研究进行。

1.2.2 排除标准 伴恶性肿瘤者；伴严重精神功能异常者；对研究进行不配合者。

1.3 方法

采集研究所选对象的胸腔积液标本。对照组患者采取传统涂片技术，观察组患者采取细胞蜡块技术，具体操作开展如下。

1.3.1 对照组①把采集的标本置于常温环境下30 min左右(送检量一般需要50~200 mL)，如果长时间延长送检,则应该放入4℃冰箱保存或加入固定剂，然后轻轻地把送检液体上部倒掉,取下层液体，20 mL离心管4管或50 mL离心管2管,放入离心机内。转速2 000 r/min,离心10 min,随机取20 mL 2管或50 mL 1管。

②用移液管小心吸去上清液，轻轻向下斜置试管(注意沉淀物必须是凝聚在底部不会流动的)，用吸水纸或棉签吸去管口多余的液体。

③用吸管吸取沉淀物上层细胞（吸取沉淀物时，将试管口向下倾斜45℃），防止试管壁上的液体流入管底，造成细胞稀释，这是离心细胞块制片的关键。

④涂片要求涂片均匀，平整，不能太厚。

1.3.2 观察组 ①取剩余的20 mL 2管或50 mL 1管（如果是血性液体时，可加入冰醋酸乙醇液体处理后离心沉淀）。

②加入10%中性甲醛溶液，将沉淀物打匀（如果沉淀物量较少，应放至1 mL的尖头离心管内）。

娘子关泉域岩溶地下水主要接受降雨入渗及河流、水库等地表水渗漏补给。城市及工矿企业主要分布于阳泉市内各河流的中上游地区，大量污染物随地表水一起进入地下含水层，产生了对地下水的污染[1]。近年来，阳泉市政府在环境治理方面做了大量扎实有效的工作，开展了泉域保护、污水处理厂建设、垃圾电厂建设、黑臭水体治理等工作，娘子关泉域水环境得到有效改善。

③以转速2 000 r/min，离心10 min。吸干上清液，轻轻地沿管壁加入95%乙醇，静置1~2 h。用尖头的硬签轻轻地将沉淀物挑出,放在包埋纸上，可用伊红染色标记，包好放入包埋框内盖好,再放入常规脱水机程序内处理。待充分进行常规脱水，浸蜡，石蜡包埋，切片染色和镜检等操作,待标本镜验完成后，通过结合免疫组织化学技术，对涂片及细胞块的效果进行诊断鉴别。

1.4 观察指标

①观察分析两组经检测方法后的诊断效果情况。

②观察分析免疫组织化学技术联合细胞蜡块的分型诊断情况。

1.5 统计方法

采用SPSS 25.0统计学软件进行数据分析，计数资料以频数和百分比（%）表示，采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 患者临床特征分析

在研究选取的84例患者中，男占63.10%，女占36.90%；年龄＜65岁者占54.76%，年龄≥65岁者占45.24%；发病部位：右侧占52.38%，左侧占47.62%；血性胸腔积液占21.43%，非血性胸腔积液占78.57%；浑浊胸腔积液占82.14%，透明胸腔积液占17.86%。见表1。

表1 患者临床特征分析Table 1 Analysis of clinical characteristics of patients

2.2 两组诊断结果比较

对照组、观察组疑似恶性肿瘤细胞检出率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；对照组恶性肿瘤细胞检出率是19.05%，明显低于观察组的54.76%，差异有统计学意义（P＜0.05）；对照组未检出肿瘤细胞所占比是50.00%，明显高于观察组的19.05%，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 两组诊断结果比较[n（%）]Table 2 Comparison of diagnosis results between the two groups[n(%)]

2.3 免疫组织化学技术联合细胞蜡块的分型诊断情况分析

对细胞蜡块诊断阳性标本34例，通过与免疫组织化学方法相结合，经采取Syn和TTF-1、CgA和CK7、WT-1和P63、CK5/6和Calretinin等标记开展组织学分型。其中，腺癌（64.71%）的所占比最高，其次分别是无法确定 （14.71%）、其他类型肿瘤（8.82%）、鳞癌（2.94%）、小细胞癌（2.94%）、恶性间皮瘤（2.94%）、恶性淋巴瘤（2.94%），见表3。

表3 免疫组织化学技术联合细胞蜡块的分型诊断情况分析Table 3 Analysis of the typing and diagnosis of immunohistochemistry combined with cell wax block

3 讨论

近年来，由于病理制片技术质控的加强和细胞块制作新技术的推广，使疾病的阳性检出率大大提高。

胸腔积液是一种受多原因影响而引发胸膜内部液体过多，且影响该病因的因素较多，判断该病难度较大，如炎性胸腔积液的中间皮细胞受炎性刺激，易出现不典型增生，且间皮细胞以轻度异型性为主，其核轻度增大，容易产生假桑葚立体结构[3]；另外，经放疗后间皮细胞受放射线刺激影响，会出现不典型增生，腺癌细胞等恶性肿瘤细胞容易和这些细胞形态混淆[4-5]。

对于传统的细胞涂片检测技术，通常在制作时易使涂片制作厚薄程度出现差异，细胞退变、重叠、黏液覆盖率较高而且易发生掉片情况，发生肿瘤细胞丢失情况，不仅会增加炎性细胞，而且还会提高血细胞假阴性率[6-7]。所以，在检测胸腔积液细胞中，传统涂片检测技术的实施往往会产生敏感度低下问题，通常在50%~78%之间[8-9]。该检测方法的应用可靠性低，难以令人信服，无法有效满足临床需求。相比之下，细胞蜡块制片技术的应用，通过开展离心固定切片方式对肿瘤细胞聚集，能有效保证肿瘤细胞结构的清晰性，从而能保持其组织结构和其排列方式的一致性，能防止发生细胞人为重叠情况，提高诊断胸腔积液细胞的准确性[10-11]。细胞蜡块制片技术在血性胸腔积液中，对红细胞溶解的方式能有效清除对红细胞产生的制片干扰，而且还能使其制片背景更具干净性与整洁性，可保留核的特异性及肿瘤细胞的完整性，使检测阳性率有效提高[12-13]。有报道指出，予以患者采取细胞蜡块制片技术检测，能有效提高诊断细胞病理的准确性，而且此检测方法也具有一定有效性[14-15]。细胞蜡块制片技术不仅具备可重复性，同时还能提供较多的类似于细胞和组织学的形态特征，与传统涂片制片技术相比，有效性更好，而且对于原发灶不明确和无法取得组织标本的患者，该技术经细胞蜡块采取免疫组织化学染色，能标记相应抗体，对细胞学诊断准确性的提高有重要意义，同时还能有效判断恶性肿瘤细胞的来源，从而能更好地开展临床指导[16]。有研究指出，以非小细胞癌为例，在细胞蜡块中，大部分患者均能通过形态学准确诊断鳞癌、腺癌病情，随后利用免疫组织化学标记物Syn和P63、CK7和CgA及WT-1等标记后，能准确获取分型信息[17]。在该次研究中，以该院接收的84例胸腔积液患者为对象，经对上述阐述总结可知，对照组恶性肿瘤细胞检出率是19.05%，明显低于观察组的54.76%（P＜0.05）；对照组未检出肿瘤细胞所占比是50.00%，明显高于观察组的19.05%（P＜0.05），说明，在胸腔积液病理诊断中实施细胞蜡块技术能准确进行诊断，并通过结合免疫化学技术，可使诊断价值进一步提升，为临床对治疗方案的制订提供借鉴与参考，有较好的临床应用价值。另外，在上述研究结果中还可知，经采取Syn和TTF-1、CgA和CK7、WT-1和P63、CK5/6和Calretinin等标记开展组织学分型发现，腺癌22例、鳞癌1例、小细胞癌1例、恶性间皮瘤1例、恶性淋巴瘤1例、其他类型肿瘤3例、无法确定5例。对于无法确定分型的5例患者，其原因是，由于胸腔积液外观相对透明清洗，且有较少纤维成分，所以离心沉淀物获取较少；有些细胞异型性无显著，易被看作为退变间皮细胞。

在喻鑫等[17]研究中，以胸腔积液患者500例为研究对象，分别实施传统涂片技术和细胞蜡块技术开展病理诊断。从上述研究结果中可知，行细胞蜡块技术后患者恶性检出率为69.00%，明显高于行传统涂片技术检查的42.00%；行细胞蜡块技术后疑似恶性检出率为16.00%，低于传统涂片技术的22.00%；细胞蜡块技术检出率为15.00%，低于传统涂片技术的36.00%（P＜0.05）。相比传统涂片技术，细胞蜡块技术的应用其诊断准确性更高。由此说明，病理诊断胸腔积液患者时，实施细胞蜡块技术，能使阳性检出率有效提高，确保病理诊断准确性。

在胡琼[18]学者的研究中，选取120例胸腔积液者为对象，根据诊断方法实施的不同进行分组，即对照组（开展传统涂片技术诊断）、研究组（开展细胞蜡块技术诊断）。其结果显示，研究组恶性肿瘤率为41.7%，恶性肿瘤细胞率为45.0%，均高于对照组的23.3%、31.7%（P＜0.05）。由此说明，细胞蜡块技术可准确诊断胸腔积液病理结果，且相比传统涂片技术，诊断准确率更好，可为临床治疗方案的制订提供借鉴及参考。上述内容与该次研究报道相符。

综上所述，在病理诊断胸腔积液中细胞蜡块技术的应用能有效提高诊断准确率，使诊断治疗疗效提升，同时还能提高胸腔积液细胞学诊断检出率及准确性，应用价值高。