孙继云 马小艳 刘欢 王雅杰

临床常采用酶联免疫吸附试验法、胶体金免疫层析法检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)，但存在检测时间长、灵敏度不理想的问题。磁微粒化学发光法为近年来新兴的检测方法，具有简便、快速等优势[1]。但由于样品、操作、技术等各方面的原因，有可能出现假阳性、假阴性的问题，影响诊断的准确度。我国上市的HBsAg确认试剂盒相对较少，主要依靠进口，检测成本较高，加快我国HBsAg确认试剂盒的研发具有重要意义[2]。本研究对郑州安图生物工程股份有限公司生产的HBeAg确认试剂盒与已批准上市的同类产品Abbott Ireland Diagnostics Division生产的HBeAg确认试剂盒的性能进行对比，探讨国产 HBsAg确认试剂盒在HBV检测中的价值。

资料与方法

一、样品来源

选取2020年10月至11月在首都医科大学附属北京地坛医院进行检测的血清或血浆样本380份，-20℃储存，备用，使用前恢复至室温，轻轻摇动混匀，2周内快速完成检测及复测。

纳入标准：样本的相关信息完整，包括患者年龄、性别、临床诊断或就诊科室等；样本量不少于1 000 μL。

排除标准：严重脂血、溶血、浑浊，合并黄疸；微生物污染标本，临床基本信息不完整的样本；未按要求采集或处理的样本。

剔除标准：因仪器故障或操作原因，未进行正常检测的样本；对复测样本，以复测结果为准，并注明复测原因；未按试验方案收集、保存或检测的样本。

二、主要试剂

考核试剂：郑州安图生物工程股份有限公司生产的HBsAg确认试剂盒(中和实验法)，配套试剂为HBsAg检测试剂盒(磁微粒化学发光法)。

对比试剂：Abbott Ireland Diagnostics Division HBsAg确认试剂盒(化学发光微粒子免疫检测法) ，配套试剂为HBsAg测定试剂盒 (化学发光微粒子免疫检测法)。

第三方试剂：珠海丽珠试剂股份有限公司生产的HBsAg确认试剂盒(中和试验)，配套试剂为HBsAg诊断试剂盒(酶联免疫法)。

检测仪器：仪器为安图生物Autolumo A2000全自动化学发光测定仪。所有试剂盒均严格按照说明书进行操作。

三、方法

选择检测HBsAg剩余的血清/肝素抗凝血浆的共380份。分别使用配套试剂进行复孔检测，如临床研究机构使用对比配套试剂进行临床常规检测，则使用对比配套试剂进行单次检测。配套试剂2次检测结果均为阳性的为重复阳性，2次结果不一致的样本需进行第3次检测，用第三方试剂进行复核，3次结果中有2次检测结果为阳性的则判为重复阳性。然后对重复阳性的样本用考核试剂与对比试剂分别进行确认试验。

四、观察指标

观察并记录考核配套试剂及对比配套试剂的检测结果；观察并记录考核确认试剂与对比确认试剂的检测结果；对2种确认试剂盒的诊断效能进行对比分析。

五、统计学方法

采用SPSS26.0统计学软件进行数据处理。正态分布的计量资料以均数 ± 标准差表示，组间比较采用独立样本t检验，计数资料以例数(%)表示，组间比较采用卡方检验，P< 0.05为差异有统计学意义。一致性分析采用Kappa检验，结果为0～1，Kappa>0.75，则表示一致性良好。

结 果

一、HBsAg配套试剂检测结果

考核配套试剂检测结果的阳性符合率为100%、阴性符合率为100%，总符合率为100%，差异无统计学意义(P>0.05)，2种配套试剂具有一致性(Kappa>0.75)。见表1。

表1 HBsAg配套试剂的检测结果(份)

HBsAg考核试剂确认阳性符合率为100% 、未确认阳性符合率为0、总符合率为91.58%，差异无统计学意义(P>0.05)，2种确认试剂具有一致性(Kappa>0.75)。2份考核试剂未确认阳性的样品经第三方试剂检测后显示阳性。见表2。

表2 HBsAg考核试剂与对比试剂的检测结果(份)

二、HBsAg确认试剂盒的诊断效能

考核试剂灵敏度为99.43%，特异度为100，准确度为100% ，对比试剂的灵敏度、特异度及准确度均为100%。

讨 论

血液是HBV的主要传播途径，我国对于无偿献血者只进行HBsAg指标的检测，假阴性会导致输血过程中感染风险加大，因此检测结果的准确性具有重要意义[3]。

临床上多采用ELISA检测HBsAg，但存在酶标试剂易失活，检测过程繁琐，样本易污染，检测时间长等不足之处[4]。随着免疫检测技术的不断发展，磁微粒化学发光法得到应用，其具有操作简单、检测时间短等优点[5,6]。但由于原料、技术等差异，检测HBsAg时可能存在假阳性、假阴性的情况，HBsAg确认试剂盒是对HBsAg初测结果进行的进一步的补充和确定，通过HBsAg确认试剂盒对检测结果进行确认，从而辅助乙型肝炎的诊断，能够提升检测的准确率，降低医疗风险[7,8]。

目前HBsAg确认试剂盒上市的产品主要有Abbott Ireland Diagnostics Division的HBsAg确认试剂盒(化学发光微粒子免疫检测法)、珠海丽珠试剂股份有限公司的HBsAg确认试剂盒(中和试验)、Siemens Healthcare Diagnostics Inc的HBsAg确认试剂盒(化学发光法)等[9,10]。我国上市的HBsAg确认试剂盒厂家相对较少，难以满足临床需求。本研究对郑州安图生物工程股份有限公司生产的试剂盒的效能进行了考察，与已批准上市的同类产品Abbott Ireland Diagnostics Division生产的HBsAg确认试剂盒的性能进行对比，结果表明阳性预测率、阴性预测率、灵敏度、特异度及准确度均具有一致性，具有较高的诊断效能，可作为国外产品的替代品使用。

但各种检测试剂盒均有一定的优势及不足，检验人员应根据具体情况选择适宜的诊断方式。