谢 富，李丽娟

（1.青岛蔚蓝生物股份有限公司，青岛 266100；2.大名县农业农村局，河北 大名 056900）

在现代养殖过程中，疾病频发、混合感染严重，抗生素的滥用、抗生素的残留已造成耐药菌株的出现和社会食品安全问题[1]。随着国家禁抗政策法规的出台，寻找新的养殖模式势在必行。目前微生态制剂作为替抗产品的首选，可以提高动物生产性能和改善动物肠道问题，肠道又是动物机体最大的免疫器官。国外在很早就研究表明，益生菌能改善动物的生长性能[2-3]，我国最近几年对微生态制剂的研究也比较多。微生态制剂是将已知的有益微生物经现代生物工程技术进行培育而得。微生态制剂的使用效果与菌种的来源、菌种的组成、生产工艺都有直接关系。好的菌种生产的微生态制剂能有效补充畜禽消化道的有益微生物，具有改善消化道菌群结构、提高机体抗病力、促进机体代谢、提高饲料吸收利用的作用，从而达到防治消化道疾病和促进生长等多重作用。微生态制剂与抗生素相比，具有无残留、无毒副作用、不产生耐药性等优点，符合绿色环保饲料添加剂的要求，可预防禽类疾病和保障畜禽产品安全，是抗生素的替代途径之一[4]，所以筛选好的微生态菌种、经过工艺优化，生产出优质的微生态制剂可有效地减少抗生素的使用。本试验通过在肉鸡饲养的不同时段添加微生态制剂，观察微生态制剂对肉鸡生产性能的影响，以期为肉鸡生产中应用微生态制剂替代抗生素提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物

试验选用1 日龄、体重为（40.02±1.16）g 的科宝肉鸡240 只，随机分为4 个处理，每个处理5 个重复，每个重复12 只。各处理间科宝肉鸡初始体重经方差分析差异不显著（P＞0.05）。

1.2 复合微生态制剂、疫苗及试剂

复合微生态制剂，由青岛某生物微生态研发中心提供，主要由丁酸梭菌、枯草芽孢杆菌、乳酸菌代谢产物组成，活菌数为100亿·g-1。

新城疫传-染性支气管炎灭活疫苗，由青岛某生物疫苗研发中心提供。疫苗于7日龄首免、21日龄二免。

免疫球蛋白IgG、IgA和IgM试剂盒，由南京建成生物工程研究所有限公司提供。

1.3 试验场地和时间

试验于2021年5月1日—6月11日在青岛蔚蓝生物集团有限公司动物试验基地进行。

1.4 试验日粮及营养水平

试验前测定各种饲料原料的营养成分，按科宝肉鸡营养需要配制杂粕型基础日粮。试验基础日粮组成及营养水平见表1。基础日粮中添加复合微生态制剂，维生素预混料中不添微生态制剂。试验共分4个处理组，第Ⅰ组在21日龄～上市阶段日粮中添加复合微生态制剂1 kg·t-1，第Ⅱ组分别在1～5日龄、10～18 日龄、25 日龄～上市三个不同阶段日粮中添加复合微生态制剂1 kg·t-1，第Ⅲ组在1～42 日龄（全程）日粮中添加复合微生态制剂1 kg·t-1，第Ⅳ组日粮中不添加任何添加剂，作为对照组。

表1 基础日粮组成及营养水平（风干基础）

1.5 试验期与饲养管理

整个试验期为42 d，试验肉鸡于平层网上饲养，每个网格饲养12 只肉鸡，鸡舍通风良好。试验期温度控制要求：1～7日龄为33～35 ℃，8～14日龄为29～32 ℃，15～21日龄为28～25 ℃，22～28日龄为21～24 ℃。免疫按肉鸡正常免疫程序进行，1 日龄和21 日龄免疫，试验鸡采用人工喂料，自由采食，供给充足清洁的饮水，建立稳定的饲养管理制度，避免试验肉鸡受到惊吓和干扰。

1.6 指标测定

1.6.1 生产性能

试验肉鸡从1 日龄开始饲养到42 日龄时试验结束，在1 日龄和42 日龄时对所有肉鸡进行空腹称重，并计算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）及饲料效率（G/F）。

1.6.2 血样采集及血液中新城疫抗体效价、免疫球蛋白水平

在试验第7、21、35、42天从各处理的每个重复中随机选取2只试验肉鸡，进行翅静脉采血，分别在37 ℃水浴锅里倾斜放置30 min，然后3 000 r·min-1离心15 min，分离出血清。-20 ℃冰柜中保存，用于血液免疫指标和新城疫抗体效价的测定。新城疫抗体效价测定根据GB/T 16550—2020《新城疫诊断技术》方法进行。

1.7 数据分析

所得数据采用SAS 8.0 软件的ANOVA 法进行方差分析，采用用Duncan's法进行多重比较。

2 结果与分析

2.1 不同阶段添加复合微生态制剂对肉鸡生产性能的影响

测定各组鸡生产性能指标，结果见表2。

从表2中可以看出，第Ⅱ组、第Ⅲ组肉鸡末重显著提高（P＜0.05）、饲料效率及死亡率显著降低（P＜0.05），平均日增重、平均日采食量没有显著性变化（P＞0.05）；第Ⅰ组和第Ⅳ组的各指标均差异不显著（P＞0.05）；第Ⅱ组和Ⅲ组平均日增重、末重、平均日采食量、饲料效率及死亡率均差异不显著（P＞0.05）。

表2 不同阶段添加复合微生态制剂对肉鸡生产性能的影响

2.2 复合微生态制剂对肉鸡新城疫抗体效价的影响

测定各试验组鸡血液中新城疫抗体效价，结果见表3。

从表3可以看出7日龄和21日龄免疫后，新城疫抗体效价水平都大幅度提升，都能起到免疫保护作用，饲粮添加复合微生态制剂对抗体有增加作用但均无显著差异（P＞0.05），第Ⅱ组和第Ⅲ组抗体水平高于其他2组，但差异不显著（P＞0.05）。

表3 不同阶段试验鸡新城疫抗体效价lb

2.3 复合微生态制剂对肉鸡免疫球蛋白水平的影响

测定试验鸡免疫球蛋白水平，结果见表4。

从表4可以看出，添加复合微生态制剂对1～42日龄肉鸡IgA影响比较小，各个处理组均无显著差异（P＞0.05），但无论是阶段性添加还是全程添加都提高了IgA 的浓度。1～21 日龄肉鸡免疫指标IgG，添加微生态处理组（第Ⅱ组、第Ⅲ组）显著高于没有添加微生态制剂组的第Ⅳ组（P＜0.05）。1～42日龄期间添加微生态组的肉鸡IgG各处理组均差异不显著（P＞0.05）；全程添加比阶段性添加机体IgG含量高，但差异不显著（P＞0.05）。

表4 不同阶段试验鸡免疫球蛋白水平 mg·mL-1

3 讨 论

3.1 微生态制剂对肉鸡生产性能的影响

我国多采用欧洲效益指数，即通过对鸡群的体重、成活率、料重比、生产管理等指标进行综合性评价，欧洲效益指数数值越大表明养殖效益越高[5]。本试验使用的复合微生态制剂由丁酸梭菌、枯草芽孢杆菌、乳酸菌及其代谢产物组成，微生态制剂在动物体内产生丰富的有益活性代谢产物，其产生的纤维素酶和蛋白酶等酶类可补充肠道内源酶的不足，有效分解饲料中非淀粉多糖，促进饲料的消化吸收。丁酸梭菌和乳酸菌产生大量细菌素可以抑制病原菌的生长，乳酸菌和丁酸梭菌属于厌氧菌，在肠道内代谢形成厌氧环境，给有益菌提供厌氧和酸性环境[6]。产生的细菌素可以抑制病原菌的生长，减少动物的发病率，提高成活率，最终提高生产性能。孙全友等[7]研究发现，在饲料中添加微生态制剂也能显著提高肉鸡的生长性能。郝生宏等[8]研究发现，微生态制剂能改善雏鸡的生产性能。本试验中，在1～42 日龄肉鸡不同阶段添加复合微生态制剂均能提高肉鸡的生产性能，全程添加和分三个阶段添加对生产性能影响不显著，但均高于单独一个阶段添加。

3.2 复合微生态制剂对机体免疫球蛋白水平的影响

枯草芽孢杆菌的表面抗原或代谢产物能够通过刺激粒细胞的吞噬活动来充当免疫原，通过产生抗体和提高嗜菌作用等刺激免疫，增强机体特异性和非特异性免疫反应，促进巨噬细胞的吞噬活性，使动物免疫力增强[9]。由B淋巴细胞生成的免疫球蛋白是人体免疫系统的主要组成部分，可通过对特异性抗原及外来抗原起到排除作用而发挥免疫作用，可提高动物机体的抗病力。其中IgA对病原体入侵机体起到防护作用，是机体最重要的初级免疫应答，起到抗感染作用；IgG 通常为机体感染的指标，可中和游离毒素，是机体免疫的重要抗体；IgM在机体感染后最早产生，在早期免疫防御中起到关键作用[10]。

大量研究表明，在日粮中添加微生态制剂对肉鸡的中枢器官和组织细胞发育及免疫功能都有很好的促进功能[11]，对抗体也有促进功能[12-14]，芽孢杆菌进入肠道后作用于肠系膜淋巴结的淋巴组织，可以提高IgG和分泌型免疫球蛋白A（sIgA）的水平。

从本试验数据也能够看出，添加复合微生态制剂无论是新城疫抗体水平还是IgA、IgM、IgG含量都有提高，IgG的提高水平较大，这一点也很好地说明了微生态制剂的作用效果，全程添加和多阶段添加效果较好。

4 结 论

在本试验条件下有以下结论：

①在日粮中添加复合微生态制剂，无论是分阶段添加还是全程添加对肉鸡日增重、成活率及免疫性能都有提高。

②在日粮中全程添加复合微生态制剂和分三个阶段添加在肉鸡生产性能和免疫指标上没有显著差异，但与没有添加复合微生态制剂组在生产性能和免疫指标上都有显著提高。

③在饲养后期添加复合微生态制剂较没有添加微生态组生产性能和免疫指标有所提高，但差异不显著，根据肉鸡的生理结构特点，早期肠道菌群没有健全的基础上，在日粮中越早添加复合微生态制剂对肉鸡的生产性能和免疫力的提高越有帮助。