【摘要】目的：探究藿香正气丸的含量测量方法。方法：对藿香正气丸中的厚朴、白芷及陈皮、广藿香等成分进行鉴别，并使用 HPLC 法对制剂中的厚朴酚及橙皮苷等进行测定，获得相关的结果。结果： TLC 法及 HPLC 法检测藿香正气丸的质量标准准确度较高，数据具有可靠性。结论：藿香正气丸在质量标准检验过程中，TLC 法及 HPLC 法检测具有重要意义，检测方法快捷，检测结果准确，可作为藿香正气丸质量控制标准。

【关键词】藿香正气丸;质量标准;HPLC 法;TLC 法

[中图分类号]R282 [文献标识码]A[文章编号]2096-5249（2022）01-0188-03

藿香正气丸包括水丸及浓缩丸，其中含有紫苏、广藿香、白术、陈皮、厚朴、大枣及生姜等，药物联合制剂具有理气和中及解表化湿功效[1]。在头痛昏重及外感风寒等症状具有显著效果，治疗荨麻疹及酸中毒等疾病同样具有效果。该方剂制剂简单、效果显著，在临床广泛应用，质量标准往往局限在微观研究及常规检查上，为有效控制质量标准，还需对藿香正气丸进行综合研究，与藿香正气水及藿香正气滴丸进行对比等，本研究中，对藿香正气丸水丸及浓缩丸成分进行 TLC 鉴别，对藿香正气丸含量进行分析，从而更为全面的控制药物质量。

1 材料与设备

1.1设备使用 Waters e2695型高效液相色谱仪及 AS1512560型超声波清洗机、四号药筛等。

1.2材料选择橙皮苷对照品（质量分数为96.1%，批号为110721-201617）及厚朴酚对照品（质量分数为99.3%，批号为110730-201614），均在药品检定研究院采购，藿香正气丸（水丸，批号为160501，山西香菊药业、陕西汉王药业）藿香正气丸（浓缩丸，批号为160504，南京同仁堂药业，批号20150807，马鞍山天福康药业，批号14C30，兰州佛慈制药），选择超纯水及色谱纯等。

2 方法及结果

2.1 TLC 鉴别厚朴及广藿香选择浓缩丸2.5 g及水丸6 g，研磨后，加入20 mL 乙醚，经超声处理15 min，参数设置为150 W，45 Hz，经过滤后将滤液挥发，残留物质添加1 mL 乙酸乙酯溶解，将其作为供试品溶液[2]。选择厚朴酚及百秋李醇，加入乙酸乙酯转变为两种质量浓度为1 mg/mL 对照品溶液。将上述溶液吸取10 μL后，将5 μL对照品放在硅胶 G 板上。展开剂选择乙酸乙酯-石油醚，对温度进行调整，加热至60℃～90℃，取出及晾干后，喷涂50 mL/L 香草醛硫酸溶液，加热到斑点显色清晰，对结果进行观察，供试品与对照品在色谱对应的位置上，显现出相同的斑点。

2.2 TLC 鉴别陈皮选择2.5 g 浓缩丸及6 g 水丸，其中加入20 mL 水，经超声处理5min 后使其溶解，加入20 mL 环乙烷混合均匀，分取水层，并利用乙酸乙酯混合及提取3次，每次加入20 mL，融合乙酸乙酯液备用，将干溶剂挥发，加甲醇2 mL，将其中的残渣溶解，将其作为供试品溶液[3]。称量0.5 g 陈皮作为对照材料，其中加入甲醇20 mL，经超声处理30 min，对样品进行过滤及挥干，加入1 mL 甲醇使残渣溶解，将其作为对照药材溶液。将上述供试品溶液吸取5 μL，对照品溶液及药材溶液各为2 μL，在同一硅胶 G 薄层板上点5 μL溶液。展开剂是甲醇-乙酸乙酯-水，比例为17：100：10，将样品取出及晾干，喷洒50 mL/L 三氯化铝溶液，放置在紫外光灯365nm 处检验，研究结果显示，供试品色谱中陈皮对照品及橙皮苷对照普处于对应的色谱位置，显现出一致的荧光斑点。

2.3 TLC 鉴别甘草以上述水层为标准，加入正丁醇混合摇匀3次，10 mL/次，其中融合丁醇液，清水洗涤两次，10 mL/次，合并正丁醇液，直到干燥，并加入2 mL 甲醇使其中的残渣溶解，将其作为供试品。选择合适计量的甘草酸铵作为对照品，加入甲醇制作成质量浓度为2 mg/mL 的溶液，将其作为对照品溶液。吸取两种溶液，每種为3μL[4]。放在同意硅胶 GF254板上，使用的展开剂为正丁醇、甲醇、氨溶液，比例为10：3：4，将其展开及晾干，放置在紫外光灯254nm 处进行检验，供试品色谱中，与甘草酸铵对照品色谱位置上，均显现出相同的斑点。

2.4 TLC 鉴别白术选择2.5 g 浓缩丸及6 g 水丸，

经过研磨后，加入正己烷20 mL，经过超声处理后，过滤挥发溶剂，残渣融合正己烷1 mL 溶解，将其作为供试品溶液。选择1 g 白术，通过上述方法转变为溶液，吸取供试品溶液及对照药材溶液，放在同一硅胶 G 板上，展示剂为乙酸乙酯、石油醚，比例为1： 5，温度控制在60℃～90℃，经取出后晾干，放置在紫外光等365nm 检验，相关结果显示，供试品色谱中白术对照组色谱处于同一位置，显现出荧光斑点。

2.5 TLC 鉴别白芷选择环乙烷液20 mL，低温回收到溶解，加入1 mL 乙酸乙酯溶解残渣，将其作为供试品溶液。选择白芷作为对照药材0.5 g，加入乙醚10 mL，经过混合摇匀1 h，经过过滤后滤干，加入1 mL 乙酸乙酯，将其作为溶液[5]。选择欧前胡素及异欧前胡素作为对照品，加入乙酸乙酯质量浓度控制在1mg/mL，形成两种对照溶液。吸取供试品溶液及白芷溶液5 μL，对照品溶液均为3 μL，放在同一硅胶 G 板上，展开剂为乙醚-石油醚，比例为2：3，温度控制在60℃～90℃，经过展开后晾干，放在紫外光灯365nm 处检验，研究结果显示，供试品色谱中，白芷对照药材及欧前胡素、异欧前胡素处于对应的位置上，显现出相同的荧光斑点。

2.6 HPLC 测定在保持色谱条件确定的情况下，展开系统性实验，填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相 A 是乙腈，流动相 B 为水，梯度处理，经过0～30 min 25%及 75%A，30～40 min 为75%～ 80%A，流动速度为1 mL/min，波长控制在283nm，柱温保持在25℃，根据厚朴酚、橙皮苷等进行计算，指标不低于3000，供试品溶液在制作过程中，选择供试品20 μL，注入液相色谱仪，橙皮苷及厚朴酚理论塔板数值均大于3000，分离度在1.5以上，满足要求。对对照品溶液进行制备，精密称取水丸及浓缩丸2.18 g 及0.85 g，分别放置在250 mL 锥形瓶，最终获得的体积分数为70%的甲醇溶液25 mL，混合均匀后进行质量称量，通过超声处理30 min，冷却后将失去的质量补足，持续获得滤液，最终获得供试品溶液[6]。

在上述制备条件下对获得混合对照溶液，进样分别为2、5、10、15、20μL，对峰值面积进行检测，获得进样量及横坐标、峰值面积及纵坐标，最终获得线性回归返程，橙皮苷=78455+29571，r=0.9990。厚朴酚=21084+16511，r=1.0000，研究结果显示厚朴酚及橙皮苷分别处于0.94～9.44 μg、0.89～8.58 μg范围，表现出良好的线性关系，详见表1。

在稳定性实验中，称取水丸及浓缩丸2.18 g 及0.85 g 相关实验供试品，计量为20μL，分别在0、2、4、8、12、18及 24 h 进行测定，对峰值面积进行分析，获得橙皮苷及厚朴酚两种成分的 RSD 值为1.52%、1.71%，指标均在2%以下，数据满足实验要求。在家样回收率实验中，称取0.83 g 浓缩丸及2.17 g 水丸，分别加入4.0081 mg 及1.8879 mg 橙皮苷进行对照，1.9264厚朴酚对照品及2.5124厚朴酚对照品根据上述研究方法制备供试品液，进样为20 μL，对峰值面积进行测定，对 RSD 及回收率进行计算。最终获得水丸加样平均回收率为100.65%、102.45%、100.15%，RSD 值分别为0.86%及 1.25%、0.48%，浓缩丸平均加样回收率为100.85%及 101.64%、100.51%，RSD 值分别为1.26%、1.14%、1.22%，实验研究显示，供试品制备溶液的整体准确性较高，数据具有可靠性。

3 讨论

藿香正气丸最早出现在宋朝，我国制定的方剂中，对其进行记录及介绍，其中包括紫苏叶及大腹皮、法半夏、白术及桔梗、广藿香、陈皮等成分，该药物的功能在于芳香化湿、解表和中。在药理上进行分析，藿香正气丸对图立体十二指肠具有抑制效果，可以解决抗胆碱药物导致的肠痉挛，对抗胆碱导致的狗及兔在体肠内痉挛中具有良好的抑制功能。抗肠痉挛作用类似于阿司匹林，对离体长平滑肌积极与抑制功能，对康氯化钡导致的肠痉挛具有良好的抑制功能。藿香正气丸对十二指肠及立体豚鼠自动收缩乙酰胆碱具有良好的解痉效果。藿香正气胶囊具有解痉作用，浓度到达一定的标准后，对离体兔肠具有抑制反应，抑制率在73.28%，对乙酰胆碱及氯化钡导致的肠痉挛具有抑制反应，抑制率在61%及 68.87%。针对浓度较低的藿香正气丸具有双向调节功能，浓度值较高的情况下，呈现出完全抑制功能。方剂中单味半夏及茯苓、陈皮经过煎煮后，对患者机体功能产生影响，在临床使用过程中，治疗慢性胃炎及急性胃炎效果显著。相关数据调查显示，藿香正气水对醋酸痉挛刺激导致的内脏躯体反射疼痛具有镇痛功能。在临床应用过程中，主要针对感冒及荨麻疹等疾病。藿香正气丸在腹痛治療中效果显著，在荨麻疹患者治疗中，部分患者口服 3剂可治疗疾病，临床酸中毒患者治疗中，患者口服藿香正气散剂治疗，治疗有效率高达87.8%，对失水性中毒患者治疗效果更为显著。失眠患者在治疗中，每天口服9 g，口服2次，或者将藿香正气丸水煎服，经过2个月治疗后，患者的疾病症状有明显改善，在患者口服藿香正气丸的同时，联合天王补心丸治疗效果进一步提升，睡眠质量明显改善。在气滞胃痛疾病治疗中，该疾病与患者情绪不调相关，患者常见的症状是胃脘痛，患者出现恶心呕吐症状，临床常规治疗中常见逍遥丸，治疗效果一般，使用藿香正气丸治疗，效果优于传统治疗方法，在浅表性胃炎及萎缩性胃炎患者治疗中，患者口服藿香正气丸，疾病症状明显改善，有效率高达92.5%。在寒哮疾病治疗中，患者口服藿香正气丸治疗，可达到健脾及解表的龚恩，对外感风寒湿邪引发的寒哮患者治疗效果显著。在研究过程中，除关注藿香正气丸治疗效果的同时，临床常见藿香正气丸的治疗标准作为研究重点，合理控制质量标准，有利于提升患者疾病治疗的有效率，降低患者用药时不良反应发生率。临床通过实验的方式对藿香正气丸治疗标准进行计算，分析其中的成分，使用不同测量方法，掌握其中的有效成分变化，达到标准的剂量，使儿童及成人均能用药，保证患者治疗效果。

在本研究中对既往资料展开分析，并选择乙醚及正己烷两种试剂，以同样的方法处理样本，观察到藿香正气丸浓缩丸，两种试剂均能见到比较理想的效果，TLC 法中利用乙醚提取水丸，可见到相同的斑点，但受到干扰的斑点数量较多。针对两种丸剂，正己烷的效果良好，在研究过程中测定橙皮苷及厚朴酚含量，参照《中国药典》2015年藿香正气水及胶囊对橙皮苷等进行检测，甲醇及水的比例保持在10%～90%，甲醇-水-乙腈比例为40：40：20。获得梯度脱洗等方法，但在研究中发现，乙腈2 mL/ L 磷酸溶剂系统峰值分离度一般，峰形差，最终获得其他两种分离度及理论塔板数等，经过全波段扫描，观察到橙皮苷在283nm 波长下最大吸收，而厚朴酚在293nm 波长最大吸收，在283nm 处均能达到较强的吸收，整体检测方法快捷、简单。在对照品及供试品在甲醇溶剂中溶解性较好，液相色谱保留一段时间后能保持一致，整体分离度较高，在15、30、45 min 超声后处理中，30 min 效果最好，质量鉴定及回收率较高，基线噪声小，能够作为藿香正气丸的质量控制方法。

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作者简介：黄淡霞，女，广州中医药大学第一附属医院药师。E-mail：634470173@qq.com

（收稿日期：2021-6-16 接受日期：2021-7-30）