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siRNA抑制牛睾丸细胞Nrf2基因表达的研究

2022-04-13胡修忠向敏余婕刘辰晖夏瑜陶弼菲周源王定发程蕾

中国奶牛 2022年3期
关键词:氧化应激水平检测

胡修忠,向敏,余婕,刘辰晖,夏瑜,陶弼菲,周源,王定发,程蕾

(武汉市农业科学院畜牧兽医科学研究所,武汉 430208)

热应激是指机体在高温条件下对热暴露所做出的非特异性生理反应的总和[1]。公牛睾丸温度比体温低2~6℃,这对于产生形态正常、有活力和可育的精子至关重要[2]。高温可引起睾丸组织氧化应激,导致生精上皮细胞凋亡和死亡,精子活力和密度降低[3]。当睾丸温度升高到38℃以上时,睾丸的生精机能受到损害,造成畸形精子和死亡精子数量增多,精子质量严重下降[4]。高温热应激所致的精液品质下降需经7~9周才能恢复正常[3]。

核因子E2相关因子(nuclear factor E2 related factor,Nrf2)是氧化应激表达的一种关键转录因子,通过抗氧化反应原件(antioxidant responsive element,ARE)调节下游靶基因完成抗氧化、保护机体的功能,具有抗炎、抗氧化、抗凋亡、抗衰老、抗细胞损伤、保护生育等作用[5]。研究表明,精子活力降低的男性精子中的Nrf2基因mRNA表达水平往往较低[6],而Nrf2启动子区单核苷酸多态性与Nrf2表达降低相关,并导致少、弱精子症[7]。Nrf2基因敲除小鼠睾丸组织氧化应激增加,细胞凋亡增加,精子数量显著降低,但血清睾酮水平没有发生变化[8]。抗氧化剂(N-乙酰半胱氨酸)可以提高少、弱精子症患者Nrf2基因表达和抗氧化酶水平,显著增加精子密度和活力,而异常形态精子和DNA断裂率显著降低[9]。基于此,本次试验通过下调体外培养牛睾丸细胞中Nrf2的表达,研究Nrf2对牛睾丸细胞的增殖、抗氧化基因表达的影响,探索Nrf2蛋白在牛睾丸细胞中的作用。

1 材料……
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