克百威快检试剂盒质量评价样品的分析

2022-04-01叶雅真骆和东

食品安全导刊·中旬刊 2022年2期

叶雅真骆和东

摘要：为保证克百威胶体金快检试剂盒质量评价工作的顺利开展，本研究依据《食品快速检测方法评价技术规范》制定制样方案，对克百威制备样品进行均一性和稳定性考察。考察结果显示，克百威制备样品的均匀性和稳定性均符合要求，在制备完成的10 d内可用于克百威快检试剂盒的质量评价。

关键词：克百威;胶体金免疫层析;质量评价;食品安全快速检测

Analysis of Evaluation Samples for the Quality Assessment of Kits for Rapid Detection of Carbofuran

YE Yazhen1， LUO Hedong1，2*

（1.Xiamen Institute for Food and Drug Quality Control， Xiamen 361012， China; 2.RayKol Group （Xiamen） Co.， Ltd.， Xiamen 361015， China）

Abstract： In order to ensure the smooth development of the quality evaluation of carbofuran colloidal gold rapid detection kit， the sample preparation scheme was formulated according to the Technical Specification on the Assessment of Food Rapid Detection， and the homogeneity and stability of carbofuran prepared samples were investigated. The investigation results showed that the stability and uniformity of the samples prepared by carbofuran were all meet the requirements， which could be used in 10 days after prepared.

Keywords： carbofuran; colloidal gold immunochromatography; quality assessment; rapid detection for food safety

克百威是一种氨基甲酸酯类农药，对人体具有胆碱神经毒性，中毒表现有流涎、流泪、瞳孔缩小及肌束震颤等，广泛用于果蔬中蚜虫、地老虎、线虫等病虫害的防治[1-2]。食用克百威农药残留量超标的食品将危害身体健康[3-5]。《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》（GB 2763—2021）中规定了食品中克百威的最大残留限量，其中果蔬中克百威的最大残留限量为0.02 mg/kg[6]。收集国家市场监督管理总局网站发布的不合格公告，发现在对食用农产品的监督抽检过程中，砂糖桔、橙、长豆、豇豆、茄子和芹菜等多种果蔬中常检出克百威农药残留超过最大残留限量值的问题。调研中发现，不合格食用农产品的召回是目前一大监管难题。因此，全国各地监管部门正逐步推行运用快检技术进行食用农产品的快检监管。克百威胶体金快速检测技术

20 min内可以出具准确快检结果，已逐步替代传统的酶抑制率法快检方法，广泛应用于市场监管部门对果蔬中克百威农药残留的快检监管。但由于国内快速检测产品生产门槛低，监管部门难以监管，市场上流通的快速检测产品质量参差不齐，符合监管需求的合格快检产品较少[7-14]。《关于规范食品快速检测方法使用管理的意见》（食药监科〔2017〕49号）文件中要求：正在使用和拟采购的快检产品应经过评价，评价结果显示不符合国家相应要求的，要立即停止使用或者不得采购[15]。为保证克百威胶体金快检试剂盒质量评价工作的顺利开展，本研究依据《食品快速检测方法評价技术规范》（食药监办科〔2017〕43号）制定制样方案，对克百威制备样品进行均一性和稳定性考察[16]。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

丙酮中克百威溶液标准物质（BePure-20953YB，1 000 μg/mL，BePure）;乙腈（色谱纯，德国MERCK）;甲酸（优级纯，德国MERCK）;氯化钠（分析纯，沪试）;GCB/NH2固相萃取小柱（德国CNWBOND）;有机过滤头（0.22 μm，津腾）。

1.2 仪器与设备

三重串联四极杆液相色谱质谱联用仪（Agilent 6470）;色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm，Agilent UPLC C18）;Milli-Q超纯水处理系统（美国Millipore）;电子天平（德国Sartorius）;移液枪（德国Eppendorf）;全自动均质机（Reeko AH-30）;台式离心机（美国Sigma）;旋转蒸发仪（瑞士BUCHI）;固相萃取仪（Lab Tech）;全自动氮吹浓缩仪（Reeko）。

1.3 评价方案

依据《食品快速检测方法评价技术规范》（食药监办科〔2017〕43号）制定制样方案，制备样品并进行稳定性考察，再统一制备评价样品，同时进行均匀性考察。参比方法为《水果和蔬菜中450种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱-串联质谱法》（GB/T 20769—2008）[17]。

使用经参比方法确证的阴性样为空白蔬菜样。浓度水平为0 mg/kg、0.01 mg/kg的样品用于考察试剂盒产品的假阳性率;浓度水平为0.02 mg/kg的样品用于考察试剂盒产品的假阴性率。因此，以空白蔬菜为基质，添加克百威标准溶液制成0 mg/kg、0.01 mg/kg 、0.02 mg/kg 3个添加水平的样品。用参比方法对制备样品进行均匀性和稳定性验证，稳定性考察指标t值和均匀性考察指标F值均符合要求的制备样品方可用于试剂盒质量评价。

2 结果与分析

2.1 制备样品的稳定性检验

用参比方法对制备样品进行稳定性检验，参照《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》（CNAS—GL 003：2018）中稳定性检验——t检验法分析制备的克百威加标样品的稳定性[18]。稳定性检验t临界值t0.05（10）=1.812 5。如表1和表2所示，0.01 mg/kg和0.02 mg/kg 2个浓度梯度的克百威加标样品在10 d内的测量含量与第1 d的测量含量比较的t值均<1.812 5，说明在10 d考察期间内，克百威含量均无明显差异。因此，用于试剂盒质量评价的制备样品在制备完成的10 d内可用于试剂盒质量评价。

2.2 制备样品的均匀性检验

用参比方法对制备样品分别进行均匀性检验，参照《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》（CNAS—GL 003：2018）中均匀性检验-单因子方差分析法分析制备的腐霉利加标样品的均匀性。如表3～表6所示，0.01 mg/kg和0.02 mg/kg 2个浓度梯度的克百威加标样品F值分别为2.79和1.46，均

3 结论

经考察，克百威制备样品的样品稳定性考察指标t值和均匀性考察指标F值均符合考察要求，在制备完成的10 d内可用于克百威快检试剂盒的质量评价。

参考文献

[1]姚蕾珺.吡虫啉，啶虫脒，克百威及涕灭威的免疫快速检测[D].无锡：江南大学，2018.

[2]单正军，陈祖义.农药对陆生环境生物的污染影响及污染控制技术[J].农药科学与管理，2007（11）：18-26.

[3]佚名.美国环保局欲全面禁止克百威登记[J].农村实用技术，2008（4）：23.

[4]任幸.优先控制潜在高环境风险农药及助剂的筛选[D].沈阳：沈阳农业大学，2020.

[5]刘红.集美区蔬菜农药残留色谱检测分析及毒性研究[D].厦门：集美大学，2016.

[6]国家卫生健康委员会，国家市场监督管理总局，农业农村部.食品安全国家标准食品中农药最大残留限量：GB 2763—2021[S].北京：中国标准出版社，2021.

[7]叶雅真.我国食品安全快检产品的现状和对策分析[J].食品安全质量检测学报，2019，10（12）：3719-3724.

[8]叶雅真，骆和东，张淑琼，等.食用油中黄曲霉毒素B1快速检测试剂盒的质量评价[J].中国油脂，2022，47（2）：91-95.

[9]谢刚，叶金，王松雪.食品安全快速检测方法评价技术研究进展[J].食品科学，2016，37（17）：270-274.