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红河产草果中桉油精含量测定的方法学研究

2022-01-27尹开云杨绍坤蒙国懿张晓灿宋红坤郭文娟

云南农业科技 2022年1期
关键词:无水乙醇草果红河

杨 瀚,尹开云,杨绍坤,蒙国懿,张晓灿,宋红坤,郭文娟*

(1.云南医药健康职业学院,云南 昆明 650106;2.云南经济管理学院,云南 昆明 650106;3.云南芳香技术研究院,云南 昆明 650106)

草果(Amomumtsao-ko)属于姜科(Zingiber-aceae)豆蔻属的多年生草本植物,又名草果子、草果仁,因其果实形状小似果而得名草果[1]。在中国,草果的种植历史悠久,可追溯到宋朝《太平惠民和剂局方》药籍记载。草果生长于亚热带地区的阔叶林生态环境中。在中国广泛分布在云南省、广西壮族自治区、贵州省等地[2]。该作物种植3~4年即可结果收获,可以持续采收10余年,是一种极其重要的经济作物。草果植物花色大多呈现黄色,生长环境阴湿,在阔叶林中不占用优质良田,是一种可持续发展的绿色经济作物[3]。

草果中富含多种化学成分[3-4],作为一种传统中药材,草果具有调节胃肠功能、降脂减肥、降血糖、抗氧化[5-9]等作用。目前,以草果为原料生产的草果保健茶、草果护肤液、草果调味油等都获得了相关专利[10-12]。

桉油精为草果中主要的指标成分。本试验以桉油精含量为指标,采用气相色谱法测定红河产草果中桉油精的含量,旨在为红河产草果质量评价提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

Agilengt 7890B气相色谱仪,电子天平(赛多利斯SI-224,d=0.1 mg),超声波清洗器(天津恒奥科技HU-15-005),桉油精标准品(厂家:上海安谱实验科技股份有限公司,批号:1210022),无水乙醇:(厂家:天津市风船化学试剂科技有限公司,批号:20201106),草果(干果2019年7月9日)购于云南红河州绿春县。

云南省红河产草果样品由云南经济管理学院医学院药学系中药师易建文鉴定,标本存放于云南经济管理学院医学院一教301中药材标本室,标本号:YNJG-YX-CG015。

1.2 试验方法

1.2.1 测定条件

Agilent 7890B气相色谱仪(FID检测器),色谱柱:HP-5(5%-苯基)-甲基聚硅氧烷为固定液的弹性石英毛细管柱(规格:30 m×0.32 mm×0.25μm),进样口温度250℃,检测器温度300℃,分流比1∶1,氮气流速1.5 mL·min-1。程序升温:初始温度65℃,以10℃·min-1升温至150℃,再以100℃·L-1升温至250℃,保持1 min。

1.2.2 溶液的制备

对照品储备溶液配制:取桉油精标准品20 mg,置于10 mL的容量瓶中,加无水乙醇定容至刻度,摇匀即得(浓度:2 mg·mL-1)。

对照品上机溶液配制:量取对照品储备溶液1~10 mL于容量瓶中,用无水乙醇稀释至刻度,摇匀即得(浓度:0.2 mg·mL-1)。

标准曲线溶液的配制:分别量取对照品储备溶液10μL、25μL、100μL、250μL、400μL于1 mL量瓶中,用无水乙醇稀释至刻度,摇匀即得,浓度分别为20μg·mL-1、50μg·mL-1、200μg·mL-1、500μg·mL-1、800μg·mL-1。

样品溶液的制备:取试样粉碎并全部通过2号筛,其中试样Ⅰ为粉碎后放置一段时间的样品,试样Ⅱ为每次临用前粉碎的样品。称取过2号筛的试样Ⅱ约3 g,精密称定,置于100 mL具塞锥形瓶中,精确加入75%乙醇25 mL,密封,浸泡。置于超声提取器内(提取温度25℃)提取30 min,静置15 min,取上清液用0.45μm滤膜过滤,即得。

2 结果与分析

2.1 线性关系与线性范围考察

取配置好的对照品溶液,进样1μL。以峰面积为纵坐标、进样量(ng)为横坐标,得到标准曲线回归方程Y=0.2049X+7.9136(R2=0.999),进样量在20~800 ng,线性关系良好。结果见表1。

2.2 精密度试验

取对照品上机溶液连续进样6针,记录峰面积,结果见表2。

表2 桉油精精密度试验

2.3 重复性试验

参照样品溶液的配制方法,取试样Ⅱ制备6份样品溶液,分别依次进样1μL。记录桉油精的保留时间和相应的峰面积,并计算桉油精的含量,结果见表3。

表3 桉油精重复性试验

2.4 稳定性试验

取制备好的供试品试液,密封,在4℃冰箱分别摆放0 h、1 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h分别进样1μL。记录桉油精的保留时间和相应的峰面积,结果见表4。

表4 桉油精稳定性试验

2.5 准确度试验

全程加标,加标量分别为所测样品含量的100%(平行测定9次),取试样Ⅱ,参照样品溶液的配制,样品含量为0.47%,结果见表5。

表5 桉油精准确度试验

2.6 专属性试验

参照对照品溶液的配制方法,配制对照品溶液1份,用配制对照品的溶剂作为溶剂空白溶液,分别进样,在对照品主要成分保留时间左右的位置,空白溶液相对应的时间应无杂质干扰峰,结果见图1、图2、图3。

图1 空白溶液色谱

图2 对照品溶液色谱

图3 供试品溶液色谱

3 结论

本研究建立了红河产草果桉油精的含量测定方法,对线性范围、精密度、准确度等各方面进行考察,发现该方法专属性好、实用性强,结果稳定可靠。

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