郑菲菲 朱岚 申卫红

外周T细胞淋巴瘤是一组有成熟T细胞免疫表型的异质型形态改变的侵袭性肿瘤。它们占所有非霍奇金淋 巴 瘤（non⁃hodgkin lymphoma，NHL）病 例 的7%。大多数外周T细胞淋巴瘤病人CD4阳性，但很少有CD8阳性、CD4和CD8双阳性或有自然杀伤（NK）细胞免疫表型。研究显示，在T细胞性淋巴瘤感染中，机体内CD8＋T细胞等经典免疫细胞在其中起相当重要的作用［1］。

滤泡辅助T细胞（Tfh）是最近发现的定位于人类淋巴滤泡组织内的一种新型免疫细胞群体，其在调控人类B细胞产生抗体的过程中起非常重要的作用。但是，由于人体中Tfh细胞的获得比较困难，因而关于Tfh的临床研究非常少见。Morita等［2］的研究显示，循环滤泡辅助T细胞（cTfh）的功能就是淋巴滤泡中Tfh细胞的功能，这为我们研究老年性T细胞性淋巴瘤的机制提供了一些新颖的研究方法。本研究从T细胞性淋巴瘤感染这一角度出发，探讨Tfh在老年性T细胞性淋巴瘤感染发病中的相关机制，为疾病的治疗提供参考。

1 对象与方法

1.1 研究对象 本研究共有3组研究对象：T细胞性淋巴瘤感染组、药物治疗组及健康对照组。T细胞性淋巴瘤感染组纳入标准［3］：外周血涂片分析有淋巴细胞增多。T细胞性淋巴瘤感染组和药物治疗组均选用2020年1～10月在江南大学附属医院血液科住院的T细胞性淋巴瘤感染病人各55例，其中感染组男30例，女25例，平均年龄（70.8±8.2）岁；治疗组男28例，女27例，平均年龄（70.1±8.0）岁。药物治疗组纳入标准：采用CHOP（环磷酰胺、阿霉素、长春新碱、强的松）、CHOEP（环磷酰胺、阿霉素、长春新碱、依托泊苷和强的松）、剂量调整的EPOCH（依托泊苷、泼尼松、长春新碱、环磷酰胺、阿霉素）、HyperCVAD（环磷酰胺、长春新碱、阿霉素和地塞米松），与大剂量甲氨喋呤和阿糖胞苷交替进行治疗。健康对照组选择同时期在本院健康体检者55例，其中男30例，女25例，平均年龄（65.8±4.7）岁。参加本研究的所有对象均签署了知情同意书。本研究获得江南大学附属医院伦理委员会批准。

1.2 研究方法

1.2.1 样本收集：分别于早晨采集研究对象的空腹静脉以及EDTA⁃K抗凝的外周血各4 mL，分别进行相关处理后，集中冰箱保存，准备待检。

1.2.2 采用流式细胞仪检测CD134水平：采用美国BD PharMingen公司的流式细胞仪试剂盒进行检测，检测流程严格按照说明书进行。

1.2.3 ELISA试剂盒检测IL⁃21、IL⁃4水平：各组收集样本上清后，严格按照试剂盒厂家说明书进行操作，根据各检测浓度和吸光度（OD）值算出标准曲线的回归方程进行计算。

1.3 统计学方法 所有数据采用SPSS 22.0统计软件进行处理分析，所得数据采用均数±标准差（±s）表示，组间比较采用单因素方差分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 流式细胞术检测cTfh表面相关分子标志物水平比较 流式细胞仪检测分析结果显示：T细胞淋巴瘤感染组CD134的比例为（22.30±6.45）%，高于健康对照组［（3.70±2.18）%］以及药物治疗组［（12.90±4.68）%］，差异有统计学意义（P＜0.05）；经过药物治疗后，T细胞淋巴瘤感染病人的cTfh细胞比例明显下降，但仍高于健康对照组，说明相关药物治疗有效。见图1。

图1 3组cTfh表面CD134水平

2.2 3组IL⁃21、IL⁃4的表达水平比较 ELISA检测结果显示，T细胞淋巴瘤感染组血清中IL⁃21、IL⁃4的水平明显高于药物治疗组及健康对照组，药物治疗组明显高于健康对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表1 3组IL⁃21、IL⁃4表达水平比较（±s，ng／L，n＝55）

表1 3组IL⁃21、IL⁃4表达水平比较（±s，ng／L，n＝55）

注：与对照组比较，∗P＜0.05；与药物治疗组比较，△P＜0.05

组别 IL⁃21 IL⁃4 T细胞淋巴瘤感染组142.85±5.57∗△ 115.66±6.33∗△药物治疗组 88.87±6.13∗ 70.44±5.87∗健康对照组 29.09±3.88 19.38±4.52

3 讨论

T细胞淋巴瘤是起源于淋巴造血系统的恶性肿瘤，主要表现为无痛性淋巴结肿大，肝脾肿大，全身各组织器官均可受累，伴发热、盗汗、消瘦、瘙痒等全身症状，给人们身心健康带来很大的危害。国内外研究显示，其发病机制主要包括免疫介导和T细胞直接损伤两种。目前病因不清。一般认为，可能和基因突变，以及病毒及其他病原体感染、放射线、化学药物，合并自身免疫病等有关［4］。以前的研究显示，普通T细胞免疫紊乱在其中占主要作用，而最新的国内外免疫学研究热点显示，cTfh细胞参与其中，并起到非常重要的作用。cTfh细胞是国际新发现的一群新型免疫细胞群体，其显著的特征性趋化因子受体为CXCR5，以及特异表面分子标志物CD134、CD95、CD154、CD69、CD57等及其分泌的细胞因子IL⁃4和IL⁃21，它们相互作用，在cTfh细胞的发育及形成进程中起非常重要的作用，参与T细胞淋巴瘤感染的免疫应答调节过程，并在其中起关键作用。而另一方面，IL⁃21受体广泛分布于B细胞、cTfh细胞中，其能通过自分泌的方式正向促进T细胞淋巴瘤病人体内CXCR5的表达［5⁃7］。

本研究结果显示，T细胞淋巴瘤感染组CD134比例高于药物治疗组以及健康对照组，而且差异有统计学意义；经过药物治疗后，T细胞淋巴瘤感染病人的cTfh细胞比例明显下降，但仍高于健康对照组，说明临床药物治疗有效。在细胞因子方面，T细胞淋巴瘤感染组中血清IL⁃21、IL⁃4的水平明显高于药物治疗组及健康对照组，经过临床药物治疗后，T细胞淋巴瘤感染病人的IL⁃21、IL⁃4水平明显下降，但仍高于健康体检组。结合这两方面的结果，说明cTfh细胞及其分泌的细胞因子IL⁃21、IL⁃4等在机体消除T细胞淋巴瘤感染的过程中起核心的作用，临床如若调节cTfh细胞相关标志物比例将会对T细胞淋巴瘤的治疗起非常重要的作用，有利于病人的康复。