青蒿琥酯通过Akt/HO-1 信号通路抑制诱导H2O2 的晶状体上皮细胞氧化应激和凋亡
2021-12-29覃晖赖莉
覃晖,赖莉
白内障是因眼睛晶状体混浊而引起的一种视力障碍性眼病[1],可以通过手术方式进行人工合成的晶状体置换,但后期会出现一些不良反应[2]。白内障发病机制尚不清楚,手术是目前唯一有效的治疗方法,其并发症风险与术前视力、年龄及眼部疾病等因素相关[3-4]。活性氧(reactive oxygen species,ROS),如过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)引起的氧化应激,是导致白内障发生的主要因素[5]。氧化应激是人晶状体上皮细胞凋亡的重要调节因子,被广泛认为是白内障发生和发展的共同分子机制[6]。因此,保护人晶状体上皮细胞免受H2O2诱导的氧化应激和凋亡,可能是延缓白内障发展的重要治疗策略。
青蒿琥酯(artesunate,Art)具有抗炎、免疫调节及抗氧化应激的作用[7]。前期有关研究[8]报道,Art 能够抑制由于缺氧诱导的小神经胶质细胞BV-2 的激活,降低了细胞氧化应激损伤和炎症因子的释放。然而,目前尚不清楚Art 是否会影响H2O2诱导的HLEB3 细胞氧化应激和凋亡。人晶状体上皮细胞暴露于H2O2会引起氧化应激损伤和凋亡,最终导致白内障的发生[9]。因此,实验利用H2O2刺激HLEB3 细胞模拟白内障发病的特点,观察Art 对H2O2诱导的HLEB3 细胞氧化应激和凋亡的影响,并进一步探讨相关的分子机制。
1 材料与方法
1.1 HLEB3 细胞
人晶状体上皮细胞系HLEB3 细胞购自武汉巴菲尔生物有限公司,采用DMEM 培养基(包含10%胎牛血清和1%青霉素(110 U/mL)-链霉素(100 μg/mL))在37 ℃、5%CO2培养箱中孵育。当细胞长满瓶底的80%~90%时便可进行传代培养,将对数生长期细胞接种于6 孔板,待细胞融合至50%,进行后续药物处理。
1.2 主要试剂
鼠抗Bcl-2、鼠抗Bax、鼠抗β-actin(英国Abcam公司),兔抗Akt、兔抗p-Akt、鼠抗HO-1、羊抗鼠二抗和羊抗兔二抗(美国Proteintech 公司)。……
